本文關(guān)鍵詞：低氧微環(huán)境對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞線粒體功能的影響

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【摘要】：第-部分：低氧微環(huán)境對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔功能的影響[目的]線粒體通透性轉(zhuǎn)化孔作為線粒體內(nèi)膜和外膜上多種蛋白組成的蛋白孔道,對線粒體內(nèi)外物質(zhì)的通透性起著重要作用,MPTP開放可以導致小分子物質(zhì)大量進入線粒體內(nèi)膜,引起線粒體腫脹、外膜破裂,使位于線粒體內(nèi)外膜之間的細胞色素C、細胞凋亡因子等物質(zhì)進入細胞質(zhì),引起凋亡。該部分研究通過測量不同氧濃度下MPTP的開放情況,了解不同氧濃度對線粒體功能的影響。[方法]神經(jīng)膠質(zhì)瘤T98g細胞在常氧下培養(yǎng)至細胞性狀穩(wěn)定表達,三氣低氧培養(yǎng)箱分5%、0.1%兩個不同的氧濃度,培養(yǎng)細胞,將同源同代細胞傳代于6盤培養(yǎng)皿中,低氧組和常氧組各3盤細胞,對應24h、48h,72h。于相應時間將對應的細胞用線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔試劑盒處理后,在流式細胞儀下膜通透性轉(zhuǎn)化孔的開放情況(激發(fā)波長488nm)。[結(jié)果]神經(jīng)膠質(zhì)瘤T98g細胞在5%的低氧條件下膜通透性轉(zhuǎn)換孔開放程度與常氧組相似；0.1%低氧組較常氧組MPTP開放程度明顯增加：同等低氧程度下,細胞所處低氧時間越長,其膜通透性轉(zhuǎn)換孔開放程度越高：常氧組、5%低氧組、0.1%低氧組3組細胞,在相同培育時間下,氧濃度越低,其膜通透性轉(zhuǎn)換孔開放程度越高。[結(jié)論]神經(jīng)膠質(zhì)瘤T98g細胞系在適度低氧微環(huán)境下,線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔開放程度輕度增加,低氧程度進一步增加至極度低氧后,線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔開放程度明顯增加。第二部分：低氧微環(huán)境對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞線粒體膜電位的影響[目的]線粒體膜電位是指線粒體內(nèi)膜與外膜兩側(cè)的電位差,引起線粒體生物膜兩側(cè)產(chǎn)生不同的離子濃度,是反應線粒體功能完整性較為敏感的指標,該部分研究通過對不同氧濃度下線粒體膜電位的研究,了解不同氧濃度對線粒體功能的影響,從亞細胞層面探尋低氧微環(huán)境對神經(jīng)膠質(zhì)瘤T98g細胞凋亡的影響。[方法]將神經(jīng)膠質(zhì)瘤T98g細胞在常氧下培養(yǎng)至細胞性狀穩(wěn)定表達,低氧培養(yǎng)箱分5%、0.1%兩個不同的氧濃度培養(yǎng)細胞,將同源同代細胞傳代于不同的12孔板中,低氧組和常氧組各3盤細胞,對應48h,72h；使用6cm細胞培養(yǎng)皿培養(yǎng)細胞,48小時、72小時后進行線粒體提取,并于相應時間對相應的細胞加入稀釋后的JC-1染色劑,孵育20分鐘后,于激光共聚焦顯微鏡下觀察(波長n=485nm以及n=570nm),并觀察熒光強度。[結(jié)果]正常氧濃度下,神經(jīng)膠質(zhì)瘤T98g細胞線粒體膜電位正常,在JC-1的染色下呈紅色；5%低氧組在激光顯微鏡下多呈紅色,少量線粒體呈綠色,0.1%低氧組線粒體經(jīng)JC-1染色后,線粒體多呈綠色,少量線粒體呈紅色；神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞在同等低氧情況下培育時間越長,線粒體經(jīng)JC-1染色后綠色熒光程度越強。[結(jié)論]神經(jīng)膠質(zhì)瘤T98g細胞系在常氧和5%的低氧微環(huán)境下,線粒體膜電位多呈紅色熒光,線粒體功能正常,而0.1%低氧下線粒體膜電位多呈綠色,說明線粒體膜電位下降明顯,線粒體功能明顯下降。
【關(guān)鍵詞】：神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 低氧微環(huán)境 凋亡 線粒體 膜通透性轉(zhuǎn)換孔 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 低氧微環(huán)境 凋亡 線粒體 膜電位
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R739.41
【目錄】：

• 縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-18
• 參考文獻16-18
• 第一部分：低氧微環(huán)境對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔功能的影響18-31
• 材料和方法19-22
• 實驗結(jié)果22-25
• 討論25-28
• 參考文獻28-31
• 第二部分：低氧微環(huán)境對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞線粒體膜電位的影響31-49
• 材料和方法32-35
• 實驗結(jié)果35-40
• 討論40-46
• 參考文獻46-49
• 全文總結(jié)49-50
• 綜述50-59
• 參考文獻55-59
• 研究生期間發(fā)表文章情況59-60
• 致謝60

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2 陳贊 ,楊立莊 ,葉偉;神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞熱休克蛋白抗原肽復合物的研究[J];哈爾濱醫(yī)科大學學報;2003年05期

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8 戴捷,于\，

本文編號：540058