本文關(guān)鍵詞：2-甲氧基雌二醇對鼻咽癌CNE-2干細(xì)胞增殖、遷移及放療抵抗性的影響及機(jī)制

  更多相關(guān)文章： 2-甲氧基雌二醇 鼻咽癌 腫瘤干細(xì)胞 NF-κB HIF-1

【摘要】：背景及目的:腫瘤干細(xì)胞(cancer stem cell,CSC)理論表明,腫瘤放療抵抗的根源在于其干細(xì)胞的存在,然而其機(jī)制還不夠清晰。2-甲氧基雌二醇(2-Methoxyestradiol,2-ME2)是雌激素在體內(nèi)的代謝產(chǎn)物。最近研究發(fā)現(xiàn)2-ME2能通過調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子活性(包括NF-κB/HIF-1),介導(dǎo)多種腫瘤的凋亡與化療的抵抗,因而目前正作為一種抗腫瘤藥物被研究。本研究的目的是明確2-ME2對鼻咽癌CNE-2干細(xì)胞(nasopharyngeal carcinoma CNE-2 stem cells,NPCSC)增殖、遷移與放療抵抗的影響及其機(jī)制,對降低鼻咽癌干細(xì)胞的放療抵抗,進(jìn)而提高鼻咽癌的治愈率具有重要意義。方法:1 NPCSC模型建立利用無血清懸浮系統(tǒng)富集獲得鼻咽癌CNE-2干細(xì)胞,并通過再分化、軟瓊脂克隆、Transwell小室實(shí)驗和FCM法檢測富集獲得的CNE-2干細(xì)胞分化、自我更新、遷移及CD133+細(xì)胞比例的變化。RT-PCR法檢測NPCSC中干細(xì)胞表面標(biāo)志物Bmi-1、Twist1和Oct4 mRNA的表達(dá)�？寺⌒纬蓪�(shí)驗檢測NPCSC對放療的抵抗性。22-ME2對NPCSC增殖、遷移及放療抵抗性的影響及機(jī)制探討采用不同濃度的2-ME2(0、4和8μmol/L)處理CNE-2干細(xì)胞,再聯(lián)合X射線(0/2/4/8GY)照射,CCK-8及Transwell檢測干細(xì)胞增殖及遷移能力的變化,克隆形成實(shí)驗檢測NPCSC放療抵抗性的改變;FCM及蛋白質(zhì)印跡法檢測不同濃度2-ME2處理后干細(xì)胞CD133+細(xì)胞比例變化及HIF-1α、NF-κB p65和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)換(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相關(guān)標(biāo)志物蛋白的表達(dá)。3 NF-κB p65對2-ME2抗癌效應(yīng)的影響及機(jī)制利用慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)沉默NF-κB p65基因,聯(lián)合X射線照射,探討NF-κB p65對2-ME2抗癌效應(yīng)的影響。結(jié)果:1該方法獲得的干樣細(xì)胞具有較強(qiáng)的自我更新及分化能力,相對于親本CNE-2細(xì)胞具有更強(qiáng)的克隆(p0.01)及遷移(p0.01)能力、更高的CD133+細(xì)胞比例(p0.01)及干性基因比例(p0.05),說明該細(xì)胞具有較強(qiáng)干性。同時克隆形成實(shí)驗顯示干樣細(xì)胞對放療具有較強(qiáng)的抵抗性。我們將此細(xì)胞作為NPCSC用于后續(xù)實(shí)驗。2 2-ME2(0/4/8μmol/L)處理NPCSC后,隨濃度增加,NPCSC增殖活力降低,遷移能力降低,對放療抵抗性降低,同時CD133+細(xì)胞比例降低,HIF-1α、NF-κB p65蛋白表達(dá)降低,EMT標(biāo)志物E-cad增加、N-cad及Vimentin降低。3沉默NF-κB p65后,隨2-ME2濃度增加,鼻咽癌干細(xì)胞的增殖、遷移及放療敏感性沉默組比對照組下降更加明顯。結(jié)論:2-甲氧基雌二醇抑制鼻咽癌CNE-2干細(xì)胞的增殖及遷移能力并降低其放療抵抗,其機(jī)制可能為2-甲氧基雌二醇抑制HIF-1/NF-κB信號通路并逆轉(zhuǎn)細(xì)胞EMT。
【關(guān)鍵詞】：2-甲氧基雌二醇 鼻咽癌 腫瘤干細(xì)胞 NF-κB HIF-1
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R739.63
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 第一節(jié) 鼻咽癌CNE-2 干細(xì)胞模型的建立10-15
• 前言10
• 1 方法10-13
• 2 結(jié)果13-14
• 3 討論14-15
• 第二節(jié) 2-甲氧基雌二醇對鼻咽癌干細(xì)胞增殖、遷移及放療抵抗性的影響及機(jī)制探討15-20
• 前言15
• 1 材料與方法15-17
• 2 結(jié)果17-18
• 3 討論18-20
• 第三節(jié) NF-κB p65對 2-甲氧基雌二醇抗癌效應(yīng)的影響及機(jī)制20-24
• 前言20
• 1 方法20-22
• 2 結(jié)果22-23
• 3 討論23-24
• 全文總結(jié)24-25
• 附圖25-29
• 參考文獻(xiàn)29-33
• 文獻(xiàn)綜述33-35
• 致謝35-36
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文36

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本文編號：537643