本文關(guān)鍵詞：4，-甲基-2，4-二羥基查爾酮抗肝癌作用研究

  更多相關(guān)文章： 肝癌 4 -甲基-2 4-二羥基查爾酮 細(xì)胞凋亡 抗腫瘤

【摘要】：原發(fā)性肝癌簡(jiǎn)稱肝癌，是消化系統(tǒng)常見惡性腫瘤之一，一般好發(fā)于肝炎流行國(guó)家。在亞洲，中國(guó)和日本是肝癌的高發(fā)國(guó)家。中國(guó)肝癌的發(fā)病率較高，死亡人數(shù)每年達(dá)23萬(wàn)人之多，每年新患病人數(shù)占世界肝癌新患病人數(shù)55%，已成為我國(guó)高發(fā)病率、高死亡率的惡性腫瘤。 在原發(fā)性肝癌臨床確診患者中，有80%已是晚期患者，大部分患者已不適合采用手術(shù)方法切除腫物。能夠手術(shù)治療的患者,大都是采用經(jīng)皮肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)（Transcatheter Arterial Chemoembolization, TACE）進(jìn)行外科治療。雖然外科手術(shù)治療具有一定的效果，但仍有部分患者會(huì)發(fā)生肝癌復(fù)發(fā)、肝內(nèi)或肝外腫瘤科擴(kuò)散轉(zhuǎn)移等情況。因此，尋求綜合、有效的治療方法已經(jīng)成為原發(fā)性肝癌治療和研究急需解決的問題。 查爾酮類化合物以1,3-二苯基丙烯酮為基本骨架結(jié)構(gòu)，是植物體內(nèi)合成黃酮的前體。由于查爾酮累化合物分子具有較大柔性，能與不同的生物受體結(jié)合，而表現(xiàn)出抗炎、抗病毒、抗氧化、鎮(zhèn)痛、抗艾滋病、抗抑郁、抗真菌、免疫抑制等多種藥理活性。有大量研究表明，查爾酮及其衍生物具有良好的抗腫瘤作用，能夠從多靶點(diǎn)、多途徑抑制多種腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)活性。4，，-甲基-2,4-二羥基查爾酮是一種新合成的查爾酮衍生物，前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示其對(duì)多種腫瘤細(xì)胞有較好的增殖抑制作用。 本課題將4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮的研究開發(fā)和肝癌的生物學(xué)特性研究結(jié)合在一起，研究4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對(duì)肝癌細(xì)胞增殖、誘發(fā)凋亡、侵襲與轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為的影響，并探討4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮治療肝癌的相關(guān)機(jī)制，本研究將對(duì)開發(fā)新的抗肝癌藥物具有重要現(xiàn)實(shí)意義和應(yīng)用價(jià)值。 本研究在篩選4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對(duì)多種肝癌細(xì)胞抑制作用基礎(chǔ)上，又進(jìn)行了對(duì)4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮較為敏感的人肝癌HCCLM3細(xì)胞系生物學(xué)行為干預(yù)作用的研究，并對(duì)4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮抗肝癌HCCLM3細(xì)胞的作用機(jī)制進(jìn)行了初步探討，為4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對(duì)肝癌HCCLM3細(xì)胞的生物學(xué)功能的影響和作用，提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。 1.4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對(duì)四種肝癌細(xì)胞的抑制作用 方法：利用MTT法測(cè)定4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對(duì)HepG2、Bel7402、SMMC7721和HCCLM3四種肝癌細(xì)胞株的生長(zhǎng)抑制情況，并測(cè)定IC，50。結(jié)果：4-甲基-2,4-二羥基查爾酮對(duì)肝癌HepG2、Bel7402、SMMC7721和HCCLM3四種細(xì)胞均有增殖抑制作用，IC50分別為0.57、0.84、1.24、0.486μmol/L，其中對(duì)HCCLM3的抑制效果最為明顯,與陽(yáng)性藥物As2O3相近。結(jié)論：4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對(duì)HepG2、Bel7402、SMMC7721和HCCLM3四種肝癌細(xì)胞均有增殖抑制作用，其中對(duì)肝癌HCCLM3細(xì)胞作用效果最好。 2.4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對(duì)HCCLM3細(xì)胞凋亡的影響 方法：Hochest染色和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對(duì)HCCLM3細(xì)胞的凋亡作用。Westernblot檢測(cè)了4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對(duì)對(duì)凋亡通路中信號(hào)物質(zhì)pro-Caspase-9、Bcl-2，Bαx和Caspase-3的表達(dá)的干預(yù)作用。結(jié)果：4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮可以HCCLM3細(xì)胞發(fā)生凋亡。4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮可上調(diào)pro-Caspase-9表達(dá)量，可以使bαx基因的表達(dá)上調(diào)，bcl-2表達(dá)下調(diào)，上調(diào)Caspase-3的表達(dá)，激活凋亡信號(hào)通路。結(jié)論：4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮可以在體外抑制HCCLM3細(xì)胞的增殖，并誘導(dǎo)其凋亡。可以作用于pro-Caspase-9、bcl-2/bαx家族，活化Caspase-3，誘導(dǎo)凋亡發(fā)生。 3.4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對(duì)HCCLM3細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的影響 方法：利用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell侵襲小室模型，觀察4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對(duì)HCCLM3細(xì)胞侵襲能力的影響。結(jié)果：0.4μmol/L和0.8μmol/L4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮作用HCCLM3細(xì)胞12h后，能顯著抑制細(xì)胞的侵襲能力（P＜0.01）。其中0.4μmol/L組的抑制率為40.05%，0.8μmol/L組的抑制率為53.72%。 結(jié)論：4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮能夠在體外抑制HCCLM3細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移的能力。
【關(guān)鍵詞】：肝癌 4 -甲基-2 4-二羥基查爾酮 細(xì)胞凋亡 抗腫瘤
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 第1章 緒論10-20
• 1.1 原發(fā)性肝癌的治療10-12
• 1.2 查爾酮化合物抗腫瘤作用的研究進(jìn)展12-17
• 1.2.1 細(xì)胞毒性12
• 1.2.2 細(xì)胞凋亡12-14
• 1.2.3 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)14-15
• 1.2.4 細(xì)胞周期調(diào)控15-16
• 1.2.5 抗侵襲轉(zhuǎn)移16
• 1.2.6 抗腫瘤血管生成作用16-17
• 1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和創(chuàng)新點(diǎn)17-20
• 1.3.1 實(shí)驗(yàn)方案17-18
• 1.3.2 實(shí)驗(yàn)流程18
• 1.3.3 研究特色和創(chuàng)新點(diǎn)18-20
• 第2章 4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對(duì)肝癌細(xì)胞增殖與凋亡的影響20-37
• 2.1 材料和方法20-27
• 2.1.1 材料20-22
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法22-27
• 2.1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法27
• 2.2 結(jié)果27-34
• 2.2.1 4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對(duì)四種肝癌細(xì)胞的抑制作用27-28
• 2.2.2 不同濃度 4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對(duì) HCCLM3 細(xì)胞形態(tài)的影響28-34
• 2.3 討論34-36
• 2.4 小結(jié)36-37
• 第3章 4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對(duì)肝癌 HCCLM3 細(xì)胞侵襲與轉(zhuǎn)移的影響37-42
• 3.1 材料和方法37-39
• 3.1.1 材料37
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法37-39
• 3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果39-40
• 3.2.1 劃痕實(shí)驗(yàn)39-40
• 3.3 討論40-41
• 3.4 小結(jié)41-42
• 第4章 結(jié)論42-43
• 參考文獻(xiàn)43-52
• 作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果52-53
• 致謝53

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 陳曉明，羅鵬飛，胡景鈴，邵培堅(jiān)，周澤健，符力，湯毅，余元新;肝癌經(jīng)導(dǎo)管肝動(dòng)脈碘油抗癌藥混懸劑栓塞后肝臟的延期不良反應(yīng)[J];癌癥;1994年01期

2 李娜;高俊巖;劉敏;;細(xì)胞凋亡和腫瘤的關(guān)系研究進(jìn)展[J];當(dāng)代醫(yī)學(xué);2009年16期

3 趙蔭農(nóng),楊南武,袁衛(wèi)平,張傳珉,李航;腫瘤血流監(jiān)測(cè)經(jīng)皮肝動(dòng)脈門靜脈化療栓塞治療大肝癌[J];肝膽外科雜志;1998年05期

4 劉曉婷;王延讓;張明;;線粒體介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展[J];環(huán)境與健康雜志;2013年02期

本文編號(hào)：535412