發(fā)布時間：2017-07-08 16:31

  本文關鍵詞：4，-甲基-2，4-二羥基查爾酮抗肝癌作用研究

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【摘要】：原發(fā)性肝癌簡稱肝癌，是消化系統(tǒng)常見惡性腫瘤之一，一般好發(fā)于肝炎流行國家。在亞洲，中國和日本是肝癌的高發(fā)國家。中國肝癌的發(fā)病率較高，死亡人數(shù)每年達23萬人之多，每年新患病人數(shù)占世界肝癌新患病人數(shù)55%，已成為我國高發(fā)病率、高死亡率的惡性腫瘤。 在原發(fā)性肝癌臨床確診患者中，有80%已是晚期患者，大部分患者已不適合采用手術方法切除腫物。能夠手術治療的患者,大都是采用經(jīng)皮肝動脈化療栓塞術（Transcatheter Arterial Chemoembolization, TACE）進行外科治療。雖然外科手術治療具有一定的效果，但仍有部分患者會發(fā)生肝癌復發(fā)、肝內(nèi)或肝外腫瘤科擴散轉移等情況。因此，尋求綜合、有效的治療方法已經(jīng)成為原發(fā)性肝癌治療和研究急需解決的問題。 查爾酮類化合物以1,3-二苯基丙烯酮為基本骨架結構，是植物體內(nèi)合成黃酮的前體。由于查爾酮累化合物分子具有較大柔性，能與不同的生物受體結合，而表現(xiàn)出抗炎、抗病毒、抗氧化、鎮(zhèn)痛、抗艾滋病、抗抑郁、抗真菌、免疫抑制等多種藥理活性。有大量研究表明，查爾酮及其衍生物具有良好的抗腫瘤作用，能夠從多靶點、多途徑抑制多種腫瘤細胞的生物學活性。4，，-甲基-2,4-二羥基查爾酮是一種新合成的查爾酮衍生物，前期實驗結果顯示其對多種腫瘤細胞有較好的增殖抑制作用。 本課題將4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮的研究開發(fā)和肝癌的生物學特性研究結合在一起，研究4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對肝癌細胞增殖、誘發(fā)凋亡、侵襲與轉移等生物學行為的影響，并探討4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮治療肝癌的相關機制，本研究將對開發(fā)新的抗肝癌藥物具有重要現(xiàn)實意義和應用價值。 本研究在篩選4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對多種肝癌細胞抑制作用基礎上，又進行了對4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮較為敏感的人肝癌HCCLM3細胞系生物學行為干預作用的研究，并對4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮抗肝癌HCCLM3細胞的作用機制進行了初步探討，為4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對肝癌HCCLM3細胞的生物學功能的影響和作用，提供實驗基礎和理論依據(jù)。 1.4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對四種肝癌細胞的抑制作用 方法：利用MTT法測定4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對HepG2、Bel7402、SMMC7721和HCCLM3四種肝癌細胞株的生長抑制情況，并測定IC，50。結果：4-甲基-2,4-二羥基查爾酮對肝癌HepG2、Bel7402、SMMC7721和HCCLM3四種細胞均有增殖抑制作用，IC50分別為0.57、0.84、1.24、0.486μmol/L，其中對HCCLM3的抑制效果最為明顯,與陽性藥物As2O3相近。結論：4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對HepG2、Bel7402、SMMC7721和HCCLM3四種肝癌細胞均有增殖抑制作用，其中對肝癌HCCLM3細胞作用效果最好。 2.4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對HCCLM3細胞凋亡的影響 方法：Hochest染色和流式細胞術檢測4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對HCCLM3細胞的凋亡作用。Westernblot檢測了4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對對凋亡通路中信號物質(zhì)pro-Caspase-9、Bcl-2，Bαx和Caspase-3的表達的干預作用。結果：4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮可以HCCLM3細胞發(fā)生凋亡。4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮可上調(diào)pro-Caspase-9表達量，可以使bαx基因的表達上調(diào)，bcl-2表達下調(diào)，上調(diào)Caspase-3的表達，激活凋亡信號通路。結論：4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮可以在體外抑制HCCLM3細胞的增殖，并誘導其凋亡。可以作用于pro-Caspase-9、bcl-2/bαx家族，活化Caspase-3，誘導凋亡發(fā)生。 3.4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對HCCLM3細胞侵襲和轉移的影響 方法：利用細胞劃痕實驗、Transwell侵襲小室模型，觀察4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對HCCLM3細胞侵襲能力的影響。結果：0.4μmol/L和0.8μmol/L4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮作用HCCLM3細胞12h后，能顯著抑制細胞的侵襲能力（P＜0.01）。其中0.4μmol/L組的抑制率為40.05%，0.8μmol/L組的抑制率為53.72%。 結論：4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮能夠在體外抑制HCCLM3細胞的侵襲和轉移的能力。
【關鍵詞】：肝癌 4 -甲基-2 4-二羥基查爾酮 細胞凋亡 抗腫瘤
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 第1章 緒論10-20
• 1.1 原發(fā)性肝癌的治療10-12
• 1.2 查爾酮化合物抗腫瘤作用的研究進展12-17
• 1.2.1 細胞毒性12
• 1.2.2 細胞凋亡12-14
• 1.2.3 信號轉導14-15
• 1.2.4 細胞周期調(diào)控15-16
• 1.2.5 抗侵襲轉移16
• 1.2.6 抗腫瘤血管生成作用16-17
• 1.3 實驗設計和創(chuàng)新點17-20
• 1.3.1 實驗方案17-18
• 1.3.2 實驗流程18
• 1.3.3 研究特色和創(chuàng)新點18-20
• 第2章 4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對肝癌細胞增殖與凋亡的影響20-37
• 2.1 材料和方法20-27
• 2.1.1 材料20-22
• 2.1.2 實驗方法22-27
• 2.1.3 統(tǒng)計學方法27
• 2.2 結果27-34
• 2.2.1 4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對四種肝癌細胞的抑制作用27-28
• 2.2.2 不同濃度 4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對 HCCLM3 細胞形態(tài)的影響28-34
• 2.3 討論34-36
• 2.4 小結36-37
• 第3章 4，-甲基-2,4-二羥基查爾酮對肝癌 HCCLM3 細胞侵襲與轉移的影響37-42
• 3.1 材料和方法37-39
• 3.1.1 材料37
• 3.1.2 實驗方法37-39
• 3.2 實驗結果39-40
• 3.2.1 劃痕實驗39-40
• 3.3 討論40-41
• 3.4 小結41-42
• 第4章 結論42-43
• 參考文獻43-52
• 作者簡介及在學期間所取得的科研成果52-53
• 致謝53

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 陳曉明，羅鵬飛，胡景鈴，邵培堅，周澤健，符力，湯毅，余元新;肝癌經(jīng)導管肝動脈碘油抗癌藥混懸劑栓塞后肝臟的延期不良反應[J];癌癥;1994年01期

2 李娜;高俊巖;劉敏;;細胞凋亡和腫瘤的關系研究進展[J];當代醫(yī)學;2009年16期

3 趙蔭農(nóng),楊南武,袁衛(wèi)平,張傳珉,李航;腫瘤血流監(jiān)測經(jīng)皮肝動脈門靜脈化療栓塞治療大肝癌[J];肝膽外科雜志;1998年05期

4 劉曉婷;王延讓;張明;;線粒體介導細胞凋亡的研究進展[J];環(huán)境與健康雜志;2013年02期

本文編號：535412