本文關(guān)鍵詞：人肝癌組織中肝癌干細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定

  更多相關(guān)文章： 肝癌組織 腫瘤干細(xì)胞 CD133 CD90 裸鼠成瘤

【摘要】：目的體外分離及培養(yǎng)人肝癌組織中的肝癌干細(xì)胞并鑒定其生物學(xué)特性。方法收集臨床肝癌患者術(shù)后肝癌組織,用酶消化法分離肝癌細(xì)胞,將其接種于無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng),并在超低粘附24孔板中觀察肝癌干細(xì)胞克隆球生長情況;用MTT比色法檢測肝癌干細(xì)胞增值能力;用肝癌干細(xì)胞表面標(biāo)記物CD90、CD133抗體,采用流式細(xì)胞儀鑒定并分選CD90+細(xì)胞、CD90-細(xì)胞,CD133+細(xì)胞、CD133-細(xì)胞,將4種不同細(xì)胞組成CD90+細(xì)胞CD133+細(xì)胞、CD90-細(xì)胞CD133+細(xì)胞、CD133-細(xì)胞CD90+細(xì)胞及CD133-細(xì)胞CD90-細(xì)胞,分別接種于裸鼠皮下觀察其成瘤能力并記錄腫瘤體積;將裸鼠成瘤后的組織進(jìn)行HE染色。結(jié)果在無血清培養(yǎng)基中,肝癌干細(xì)胞可以形成少量的細(xì)胞克隆球;MTT比色法檢測,在連續(xù)72小時里,肝癌干細(xì)胞克隆球始終處于持續(xù)增值狀態(tài);采用流式細(xì)胞儀檢測顯示肝癌干細(xì)胞表面標(biāo)記物CD90、CD133陽性率分別是7.2%、8.8%,并成功分選出CD90+細(xì)胞、CD90-細(xì)胞、CD133+細(xì)胞、CD133-細(xì)胞,將組成的4種不同細(xì)胞組分別接種于裸鼠皮下,結(jié)果顯示,CD90+細(xì)胞CD133+細(xì)胞、CD90-細(xì)胞CD133+細(xì)胞及CD133-細(xì)胞CD90+細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)均形成腫瘤,且CD90+細(xì)胞CD133+細(xì)胞組在最短時間內(nèi)出現(xiàn)了較高的致瘤能力。而CD133-細(xì)胞CD90-細(xì)胞在整個過程中未見腫瘤形成。將裸鼠體內(nèi)的腫瘤經(jīng)HE染色,其結(jié)果與人肝癌組織病理特點(diǎn)相似。結(jié)論成功建立了從人肝癌組織中分離培養(yǎng)肝癌干細(xì)胞的方法;培養(yǎng)得到的肝癌干細(xì)胞能在無血清培養(yǎng)基中形成克隆球,且具有較強(qiáng)的增值能力;部分細(xì)胞表達(dá)CD90+細(xì)胞和CD133+細(xì)胞,且在裸鼠體內(nèi)形成腫瘤;肝癌組織中CD90+細(xì)胞和CD133+細(xì)胞具有肝癌干細(xì)胞特性,可能為肝癌干細(xì)胞。
【關(guān)鍵詞】：肝癌組織 腫瘤干細(xì)胞 CD133 CD90 裸鼠成瘤
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7
【目錄】：

• 摘要4-5
• 英文摘要5-7
• 符號說明7-9
• 前言9-13
• 第一部分人肝癌組織中肝癌干細(xì)胞分離培養(yǎng)與分選13-27
• 1 實驗材料13-15
• 2 實驗方法及步驟15-19
• 3 實驗結(jié)果19-22
• 4 討論22-27
• 第二部分裸鼠皮下人肝癌干細(xì)胞成瘤模型27-35
• 1 實驗材料27
• 2 實驗方法及步驟27-29
• 3 實驗結(jié)果29-31
• 4 討論31-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-41
• 綜述41-55
• 綜述參考文獻(xiàn)51-55
• 致謝55-56
• 個人簡介56

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 宋凱;楊碩菲;吳俊華;江春平;;肝癌干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];世界華人消化雜志;2009年36期

2 嚴(yán)威;吳國洋;;肝癌干細(xì)胞分離鑒定研究進(jìn)展[J];肝膽外科雜志;2010年03期

3 李廣權(quán);陳偉強(qiáng);;肝癌干細(xì)胞的研究現(xiàn)狀[J];醫(yī)學(xué)綜述;2013年03期

4 張朵;朱海英;馬鳳云;胡以平;;肝癌干細(xì)胞的研究現(xiàn)狀[J];生命的化學(xué);2006年01期

5 陳麗;戴廣海;;肝癌干細(xì)胞研究現(xiàn)狀[J];臨床腫瘤學(xué)雜志;2008年12期

6 唐飛;呂洪敏;向慧玲;;肝癌干細(xì)胞的研究現(xiàn)狀[J];實用肝臟病雜志;2008年02期

7 張偉;陳孝平;;肝癌干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];臨床外科雜志;2008年09期

8 張華;高志紅;許田英;朱建鳳;文家斌;張陽;;常規(guī)化療對肝癌干細(xì)胞的作用[J];胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志;2009年06期

9 徐文;曹璐;殷正豐;;肝癌干細(xì)胞研究進(jìn)展與方向[J];癌癥;2009年09期

10 孫力超;趙璇;遇瓏;韓璐璐;劉彤;胡海;孫立新;楊治華;冉宇靚;;抗肝癌干細(xì)胞功能性單克隆抗體的研制[J];中國腫瘤生物治療雜志;2010年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 單娟娟;錢程;;懸浮條件培養(yǎng)法富集肝癌干細(xì)胞[A];中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會2010年學(xué)術(shù)年會日程及論文匯編[C];2010年

2 尹川;謝渭芬;;肝癌干細(xì)胞及其分化治療[A];第九次全國消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會議專題報告論文集[C];2009年

3 殷勝勇;陳新華;胡晨;;CD133陽性肝癌干細(xì)胞在肝癌肝移植術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)中的作用及納秒脈沖進(jìn)行干預(yù)的初步實驗研究[A];2013中國器官移植大會論文匯編[C];2013年

4 杜智;宋文芹;張世光;高英堂;朱爭艷;王毅軍;只丹琮;;人原發(fā)性肝癌細(xì)胞建系及其生物學(xué)特性的初步鑒定[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會2007年學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2007年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 本報記者 王雪敏;肝癌干細(xì)胞及其分化治療[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2010年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 雷增杰;組蛋白去甲基化酶LSD1促進(jìn)腫瘤細(xì)胞“干性”和侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 張克志;三氧化二砷抑制GLI1表達(dá)誘導(dǎo)肝癌干細(xì)胞分化延長術(shù)后生存期的實驗研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 張華;肝癌干細(xì)胞的鑒定及化療對肝癌干細(xì)胞作用的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2009年

4 黎江;肝癌干細(xì)胞新型培養(yǎng)體系的建立以及治療靶點(diǎn)篩選[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

5 郭哲;環(huán)氧化酶-2對肝癌干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響及機(jī)制研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2015年

6 劉衛(wèi)輝;大鼠肝干細(xì)胞和肝癌干細(xì)胞間生物學(xué)特性差異分析及相關(guān)分子調(diào)控機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2012年

7 朱政;肝癌干細(xì)胞表面標(biāo)志物的鑒定與特性研究[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

8 孫嵐;ACNP-MET納米藥物遞送系統(tǒng)及其對肝癌干細(xì)胞靶向性研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2013年

9 劉麗梅;去乙酰化酶SIRT1在肝癌干細(xì)胞自我更新中的作用及其機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

10 沈俊杰;Nanog陽性肝癌細(xì)胞在肝癌干細(xì)胞層級分化中的地位與作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬俊明;人肝癌組織中肝癌干細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2015年

2 曹璐;球培養(yǎng)法富集肝癌干細(xì)胞樣亞群及其特征鑒定[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

3 楊軍;肝癌干細(xì)胞特異性標(biāo)志物的實驗研究及其臨床病理聯(lián)系[D];中南大學(xué);2009年

4 常文娟;低劑量順鉑富集肝癌干細(xì)胞的實驗研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2011年

5 容雁;抗人肝癌干細(xì)胞功能性單抗的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2012年

6 陶璐;基于腫瘤耐藥特性構(gòu)建肝癌干細(xì)胞富集模式的實驗研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2012年

7 王云霞;人肝癌干細(xì)胞單抗抑制肝癌的生長和轉(zhuǎn)移[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

8 曲平波;靶向肝癌干細(xì)胞的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

9 閆偉偉;肝癌干細(xì)胞表面標(biāo)志物的初步篩查及其臨床應(yīng)用研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2010年

10 趙璇;抗人肝癌干細(xì)胞功能性抗體及靶抗原的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

，

本文編號：526019