本文關(guān)鍵詞：CDC25C對食管鱗狀細胞癌放療敏感性影響的實驗研究

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【摘要】：目的:探討人食管鱗狀細胞癌EC9706細胞中CDC25C的表達對放射治療敏感性的影響。方法:1)構(gòu)建靶向人CDC25C基因的特異性干擾質(zhì)粒GV248-h CDC25C-sh RNA,通過慢病毒包裝并轉(zhuǎn)染EC9706細胞;培養(yǎng)出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染靶向CDC25C干擾質(zhì)粒的細胞株和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染陰性質(zhì)粒的細胞株;2)RT-PCR及Western blot鑒定轉(zhuǎn)染前后細胞中CDC25C在m RNA和蛋白水平的表達情況;3)對兩種細胞株進行不同劑量X線照射,采用MTT和細胞克隆形成實驗分別檢測其增殖活性及放射敏感性。結(jié)果:1)成功培養(yǎng)出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染靶向CDC25C干擾質(zhì)粒的細胞株Knockdown和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染陰性質(zhì)粒的細胞株Control。2)MTT實驗結(jié)果顯示隨著X線照射劑量的增加,Knockdown和Control細胞的增殖活性均受到抑制,且Control細胞株的細胞增殖活性抑制更明顯(p0.05)。3)細胞克隆形成實驗發(fā)現(xiàn)經(jīng)過X線處理后,空白對照組與實驗組相比較,其存活分?jǐn)?shù)下降更明顯(p0.05)。結(jié)論:下調(diào)CDC25C的表達可降低食管鱗狀細胞癌的放射敏感性和增殖活性。
【關(guān)鍵詞】：CDC25C 輻射耐受性 食管腫瘤 RNA干擾
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.1
【目錄】：

• 中文摘要6-7
• 英文摘要7-8
• 1 前言8-11
• 2 材料與方法11-28
• 2.1 實驗材料11-15
• 2.1.1 實驗細胞11
• 2.1.2 主要試劑及耗材11-12
• 2.1.3 主要實驗儀器12-13
• 2.1.4 常用試劑配制13-15
• 2.2 實驗方法15-28
• 2.2.1 細胞培養(yǎng)15-18
• 2.2.2 細胞轉(zhuǎn)染18-20
• 2.2.3 篩選轉(zhuǎn)染后最有效干擾CDC25C基因的細胞系20-25
• 2.2.4 MTT實驗檢測細胞照射后的增殖情況25-26
• 2.2.5 細胞克隆形成實驗檢測細胞照射后的克隆形成率26-27
• 2.2.6 統(tǒng)計方法27-28
• 3 結(jié)果28-36
• 3.1 穩(wěn)定細胞株的建立28-30
• 3.2 篩選最有效干擾CDC25C的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞株30-32
• 3.2.1 RT-PCR檢測慢病毒轉(zhuǎn)染EC9706細胞后CDC25C在m RNA水平的表達30-31
• 3.2.2 Western blot檢測慢病毒轉(zhuǎn)染EC9706細胞后CDC25C蛋白的表達31-32
• 3.2.3 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CDC25C-sh RNA的細胞株的篩選與鑒定32
• 3.3 MTT實驗檢測Control和Knockdown組細胞照射后的增殖情況32-33
• 3.3.1 sh RNA轉(zhuǎn)染EC9706細胞后生長活力觀察32
• 3.3.2 X線照射后Control細胞株與Knockdown細胞株的增殖情況32-33
• 3.4 克隆形成法分析Control和Knockdown組細胞不同劑量照射后的細胞克隆存活情況33-36
• 4 討論36-40
• 5 結(jié)論40-41
• 6 參考文獻41-46
• 7 致謝46-47
• 8 附錄47-56
• 附錄A 英中文術(shù)語和縮略語對照表47-48
• 附錄B 綜述48-56
• 參考文獻55-56

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Bao-Zhong Li;Zhao-Li Chen;Su-Sheng Shi;Xiao-Li Feng;Xiao-Gang Tan;Fang Zhou;Jie He;;Overexpression of Cdc25C predicts response to radiotherapy and survival in esophageal squamous cell carcinoma patients treated with radiotherapy followed by surgery[J];Chinese Journal of Cancer;2013年07期

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本文編號：526012