S100A9在口腔腫瘤生長與增殖中的調(diào)控作用
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【摘要】:目的研究S100A9在涎腺腫瘤及正常涎腺組織中的表達(dá)水平,并分析S100A9對SCC-3細(xì)胞的增殖和遷移的影響,了解S100A9在口腔腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中可能所起的作用,可能為口腔腫瘤的早期臨床診斷及預(yù)后評估提供新方法。方法通過收集15例涎腺腫瘤手術(shù)的良性腫瘤標(biāo)本(多形性腺瘤)及瘤旁正常組織標(biāo)本,抽提出收集標(biāo)本組織的總RNA,逆轉(zhuǎn)錄為c DNA,再采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的技術(shù)方法檢測出腫瘤及正常組織中S100A9 m RNA的表達(dá)水平。采用RNA干擾技術(shù),構(gòu)建出S100A9 sh RNA,沉默和過表達(dá)S100A9,利用大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞DH 5α進(jìn)行了轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn),使用293T細(xì)胞來包裝慢病毒,再使慢病毒載體感染SCC-3細(xì)胞。應(yīng)用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)來檢測S100A9沉默組和S100A9過表達(dá)組分別與對照組相比對SCC-3細(xì)胞遷移的影響。應(yīng)用噻唑藍(lán)MTT比色實(shí)驗(yàn)來檢測S100A9沉默組和S100A9過表達(dá)組分別與對照組相比對SCC-3細(xì)胞的生長活力和增殖能力的影響。結(jié)果1.實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示:與正常組織相比,15組腫瘤樣本中,有10組腫瘤組織中S100A9 m RNA高表達(dá),5組腫瘤組織中的S100A9 m RNA為低表達(dá),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,p0.05,15組腫瘤組織中S100A9 m RNA表達(dá)水平與正常組有顯著差異,且為高表達(dá)。2.細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示:在劃痕后24h,S100A9過表達(dá)組的SCC-3細(xì)胞遷移速度明顯高于對照組,S100A9沉默組的SCC-3細(xì)胞的遷移速度與對照組相比,細(xì)胞的遷移速度明顯低于對照組細(xì)胞的遷移速度。3.噻唑藍(lán)MTT比色實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示:在0h,12h,24h,48h,S100A9過表達(dá)組中相對SCC-3細(xì)胞數(shù)目均高于對照組,而S100A9沉默組的相對SCC-3細(xì)胞數(shù)目明顯低于同一時(shí)間下的對照組的細(xì)胞數(shù)目。結(jié)論1.S100A9在涎腺腫瘤中的表達(dá)量明顯高于正常涎腺組織,兩組間有明顯差異,說明S100A9可能與口腔腫瘤的發(fā)生有關(guān)。2.當(dāng)S100A9過表達(dá)時(shí),細(xì)胞的增殖及遷移明顯高于正常組。3.當(dāng)沉默S100A9時(shí),細(xì)胞的增殖和遷移相對于對照組的細(xì)胞情況來說受到了明顯的抑制。綜上所述,S100A9可能在口腔腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用,可能成為口腔腫瘤的特異性標(biāo)志物,可能有利于對口腔腫瘤患者的早期診斷及預(yù)后評估,但是S100A9在口腔腫瘤中具體的作用機(jī)制還需要我們進(jìn)一步的研究。
【關(guān)鍵詞】:口腔腫瘤 S100A9 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn) MTT
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R739.85
【目錄】:
- 中英文縮略詞表5-6
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-10
- 1 前言10-16
- 2 實(shí)驗(yàn)方法與材料16-27
- 3 結(jié)果27-30
- 4 討論30-32
- 5 結(jié)論32-34
- 參考文獻(xiàn)34-39
- 附錄39-40
- 致謝40-41
- 綜述41-47
- 參考文獻(xiàn)45-47
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,本文編號(hào):523992
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