本文關(guān)鍵詞：ECHS1基因在肝癌細(xì)胞遷移中的作用及其機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景和目的:肝細(xì)胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是一種發(fā)病率高、病程短、且生存率極低的惡性腫瘤,占腫瘤致死病因的第二位,僅次于肺癌。大部分肝癌患者就診時(shí)已發(fā)現(xiàn)肝癌浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移,嚴(yán)重影響預(yù)后和生存,目前尚無有效的治療肝癌的方法,近年來分子基因靶向治療惡性腫瘤成為醫(yī)學(xué)研究熱點(diǎn)。本課題主要探索烯脂酰輔酶A水合酶短鏈1(Short chain enoyl-CoA hydratase,ECHS1)對(duì)肝癌細(xì)胞遷移能力的影響及其相關(guān)機(jī)制。方法:首先應(yīng)用RNA干擾(RNA interference,RNAi)技術(shù)構(gòu)建穩(wěn)定干擾ECHS1基因的肝癌細(xì)胞株HepG2和Huh7,Western Blot檢測(cè)其干擾效果。隨后應(yīng)用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)ECHS1干擾后的兩組肝癌細(xì)胞遷移情況。為探索其相關(guān)機(jī)制,RT-PCR檢測(cè)比較HepG2細(xì)胞干擾組和對(duì)照組中細(xì)胞遷移相關(guān)的多種基因mRNA相對(duì)表達(dá)量,最后利用Western Blot方法研究細(xì)胞遷移相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果:成功構(gòu)建了兩組干擾ECHS1表達(dá)的肝癌細(xì)胞株HepG2和Huh7(HepG2-si ECHS1及其對(duì)照細(xì)胞株HepG2-p U6、Huh7-siECHS1及其對(duì)照細(xì)胞株Huh7-pLV)),Western Blot驗(yàn)證兩組細(xì)胞干擾效果顯著(P0.05)。細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示ECHS1干擾后的肝癌細(xì)胞遷移能力減弱。RT-PCR和Western Blot提示肝癌細(xì)胞干擾ECHS1后β3-Integrin、p-FAK、p-ERK蛋白表達(dá)水平降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:綜上所述,ECHS1促進(jìn)肝癌細(xì)胞遷移,并可能通過整合素信號(hào)通路進(jìn)行調(diào)控。
【關(guān)鍵詞】：肝癌 ECHS1 小干擾RNA 遷移
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-8
• 中英文縮略詞表8-9
• 第1章 前言9-12
• 第2章 材料與方法12-22
• 2.1 相關(guān)穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的建立12-18
• 2.1.1 材料12-14
• 2.1.2 方法14-18
• 2.2 穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞遷移能力研究18-19
• 2.2.1 材料18
• 2.2.2 方法18-19
• 2.3 ECHS1參與細(xì)胞遷移信號(hào)通路調(diào)控的研究19-22
• 2.3.1 材料19-20
• 2.3.2 方法20-22
• 第3章 結(jié)果與分析22-30
• 3.1 驗(yàn)證HepG2和Huh7細(xì)胞株中ECHS1表達(dá)及干擾效果22-23
• 3.1.1 結(jié)果22-23
• 3.1.2 小結(jié)23
• 3.2 干擾ECHS1表達(dá)后HepG2和Huh7細(xì)胞株遷移能力減弱23-26
• 3.2.1 結(jié)果23-26
• 3.2.2 小結(jié)26
• 3.3 敲除ECHS1后β3-Integrin表達(dá)下降，影響FAK的磷酸化而減弱肝癌細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)性26-30
• 3.3.1 結(jié)果26-28
• 3.3.2 小結(jié)28-30
• 第4章 討論30-33
• 第5章 結(jié)論與展望33-34
• 5.1 結(jié)論33
• 5.2 展望33-34
• 致謝34-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果39-40
• 綜述40-45
• 參考文獻(xiàn)43-45

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：508254