本文關鍵詞：低氧對肝癌HepG2細胞HIF-1α、VEGF、Bcl-2、Bax蛋白表達及增殖能力的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：1目的利用氯化鈷(CoCl2)建立肝癌HepG2細胞的體外低氧模型,觀察不同時間段的肝癌HepG2細胞在不同濃度CoCl2模擬的低氧化境中的增殖能力的變化,并討論其可能的原因。測定不同程度低氧對肝癌HepG2細胞中蛋白HIF-1α、VEGF、Bcl-2、Bax的表達情況,并考慮其原因和帶來的生物學效應。2方法用不同濃度的CoCl2 (0μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、 500μmol/L)模擬不同程度的低氧環(huán)境,在低氧環(huán)境中用不同的時間(12h、24h、 48h、 72h)培養(yǎng)肝癌HepG2細胞,誘導其缺氧,用CCK-8法檢測不同程度低氧下HepG2細胞增殖能力的變化。用不同濃度的CoCl2 (0μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、300μmol/L、 500μmol/L)模擬不同程度的低氧環(huán)境,在低氧環(huán)境中培養(yǎng)肝癌HepG2細胞48h,通過蛋白印跡法(Western Blot, WB)測定低氧環(huán)境中細胞內HIF-1α、VEGF、Bcl-2、Bax蛋白表達的變化。3結果經CCK-8法測定,結果示在一定濃度范圍以內(≤100p,mol/L)的CoCl2對HepG2細胞增殖能力的影響不明顯。當CoCl2濃度增加(≥200μmol/L)會抑制肝癌HepG2細胞的增殖能力,且濃度越高,抑制程度越強。經WB法檢測,結果示HIF-1α蛋白在50μmol/L、100pμnol/L、200μmol/L、300μmol/L、 500μmol/L濃度組相對灰度值依次為(0.277±0.003)、(0.272±0.003)、(0.333±0.005)(0.364±0.003)、(0.366±0.008),與常氧組的相對灰度值(0.122±0.002)相比均有統(tǒng)計學意義(P0.05)；低氧組中,50pmol/L濃度組和100μmol/L濃度組之間、300μmol/L濃度組和500μmol/L濃度組的相對灰度值之間無統(tǒng)計學意義(P0.05),其他相鄰組之間均有統(tǒng)計學意義(P0.05) 。VEGF蛋白在50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、300μmol/L、 500μmol/L濃度組相對灰度值依次為(0.268±0.003)、(0.368±0.009)、(0.450±0.007)(0.535±0.010)、(0.584±0.015),與常氧組的相對灰度值(0.149±0.003)相比均有統(tǒng)計學意義(P0.05)；低氧組的相對灰度值與前一濃度組比較均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。Bcl-2蛋白在50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、300μmol/L、500μmol/L濃度組相對灰度值依次為(0.439±0.003)、(0.399±0.005)、(0.322±0.004)、(0.263±0.001)、(0.124±0.002),與常氧組的相對灰度值(0.445±0.003)相比差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)；低氧組的相對灰度值與前一濃度組比較均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。Bax蛋白在50μmol/L、100μmol/L、 200μmol/L、300μmol/L、500μmol/L濃度組相對灰度值依次為(0.362±0.005)、(0.455±0.007)、(0.480±0.009)、(0.506±0.006)、(0.541±0.014),與常氧組的相對灰度值(0.243±0.003)相比之間差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)；低氧組的相對灰度值與前一濃度組比較均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。在低氧下細胞中的HIF-1α、VEGF、Bax蛋白的表達均增加,并且蛋白的表達程度與低氧程度成正比；Bcl-2蛋白在低氧下的表達受到抑制,并且蛋白的表達程度與低氧程度成反比。4結論通過不同濃度CoCl2建立肝癌HepG2細胞的體外低氧模型,一定濃度范圍以內(≤100μmol/L)的CoCl2對HepG2細胞增殖能力的影響不明顯,過高濃度的CoCl2 200μmol/L)會抑制HepG2細胞生長,且CoCl2濃度越高,抑制程度越強。CoCl2模擬的低氧環(huán)境可以誘導肝癌HepG2細胞的HIF-1α蛋白表達增強,同時使信號通路中位于HIF-1α下游的VEGF、Bax蛋白的表達增強,Bcl-2蛋白的表達減弱。
【關鍵詞】：低氧 肝細胞癌 HIF-1α VEGF Bcl-2 Bax
【學位授予單位】：揚州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• 英文摘要4-7
• 英文縮略詞表7-8
• 前言8-11
• 材料和方法11-17
• 實驗結果17-22
• 討論22-27
• 結論27-28
• 參考文獻28-31
• 綜述31-52
• 參考文獻43-52
• 致謝52
• 攻讀學位期間發(fā)表的學術論文目錄52-53

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 張翠萍,謝印芝,張延坤,張東祥,陳鵬;離體淋巴細胞經低氧及低氧預處理后免疫指標的變化[J];中華航空航天醫(yī)學雜志;2004年03期

2 陳偉;陳家佩;葛世麗;從玉文;付小兵;;低氧對肝腎組織內紅細胞生成素基因表達的影響[J];感染.炎癥.修復;2004年03期

3 張春雨,杜軍保,閆輝,唐朝樞;新型內源性氣體信號分子硫化氫對低氧性肺血管膠原重塑的影響[J];中華結核和呼吸雜志;2005年07期

4 秦嶺;文賽蘭;宋智;向陽;管茶香;;間歇性低氧對小白鼠營養(yǎng)代謝的影響[J];中國應用生理學雜志;2007年02期

5 王仁綱;翁錫全;林文_";陳曉彬;;低氧運動對身體功能的影響[J];中國組織工程研究與臨床康復;2007年30期

6 孟艷;林文_";翁錫全;陳景崗;王仁綱;;低氧運動對大鼠生長激素、胰島素樣生長因子-1的影響[J];軍事體育進修學院學報;2008年03期

7 朱艷媚;王建新;汪曉筠;曹成珠;楊春燕;嚴云飛;;低氧預處理對低氧誘導因子-1的表達及其腦保護作用的研究進展[J];高原醫(yī)學雜志;2009年03期

8 劉輝國;徐永健;;慢性阻塞性肺疾病睡眠低氧現狀與診治進展[J];中國實用內科雜志;2010年04期

9 雷雨;;低氧在健康促進中的應用[J];科技信息;2010年10期

10 王紅陽;楊林;陳寶元;;間歇性重度低氧對大鼠學習記憶影響[J];中國公共衛(wèi)生;2011年01期

中國重要會議論文全文數據庫 前10條

1 馬子敏;范明;;低氧損傷與離子通道[A];2003’離子通道、受體與信號轉導專題研討會專輯[C];2003年

2 李海生;陳金武;朱玲玲;趙彤;趙惠卿;馬蘭;丁愛石;范明;;不同程度持續(xù)低氧對人骨髓間充質干細胞增殖的作用[A];中國生理學會第六屆應用生理學委員會全國學術會議論文摘要匯編[C];2003年

3 何云凌;吳麗穎;趙彤;黃欣;張寬;王飛;朱玲玲;范明;;不同氧濃度對細胞存活和抗氧化能力的影響[A];中國生理學會第九屆全國青年生理學工作者學術會議論文摘要[C];2011年

4 慰曉娜;何金彩;;低氧聯合高脂飲食對小鼠學習記憶的影響研究[A];2012年浙江省神經病學學術年會論文集[C];2012年

5 佟長青;趙娟;李海英;薄海;;低氧及跑臺運動訓練對大鼠內皮素和降鈣素基因相關肽的影響[A];2008年神經內分泌暨神經免疫內分泌學術研討會論文摘要匯編[C];2008年

6 郝珂;陳學群;杜繼曾;;低氧抑制大鼠胰島素分泌機制的初步研究[A];中國生理學會消化內分泌生殖代謝生理專業(yè)委員會2011年消化內分泌生殖學術會議論文摘要匯編[C];2011年

7 黃麗英;陳福刁;;低氧運動干預對大鼠心肌細胞自噬作用的探討[A];第九屆全國體育科學大會論文摘要匯編(2)[C];2011年

8 甘祝軍;朱玲玲;范明;;低氧對小鼠腦鐵代謝相關蛋白表達的影響[A];中國生理學會第九屆全國青年生理學工作者學術會議論文摘要[C];2011年

9 慰曉娜;何金彩;;低氧聯合高糖飲食對小鼠學習記憶的影響研究[A];2012年浙江省神經病學學術年會論文集[C];2012年

10 李若華;曲璐;高亮;周維;;錢塘江河口低氧現象及形成機理初探[A];中國水利學會2013學術年會論文集——S5河口治理與保護[C];2013年

中國重要報紙全文數據庫 前8條

1 本報記者 周仲全;窒息的海洋[N];遼寧日報;2008年

2 ;低氧健身好處多[N];中國中醫(yī)藥報;2003年

3 王雪飛;間歇性低氧對學習記憶有利[N];健康報;2004年

4 李慶;健身新概念：低氧運動[N];工人日報;2000年

5 記者 馬芳;地下鼠低氧生存源自基因突變[N];南方日報;2014年

6 北京體育大學科研中心教授 胡揚;低氧運動也很棒[N];健康報;2010年

7 健康時報記者 葉依;睡幾天“低氧屋”也能減肥？[N];健康時報;2008年

8 記者 嚴存義 周丹波;高原低氧關注健康[N];甘肅日報;2003年

中國博士學位論文全文數據庫 前10條

1 李海生;低氧促進人骨髓間充質干細胞增殖和分化及其機制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2005年

2 黃群華;血小板源生長因子及其受體在低氧性肺血管平滑肌細胞增殖中的調節(jié)作用及其分子機制探討[D];中國協和醫(yī)科大學;1999年

3 張家興;模擬高原間歇性低氧對小鼠學習記憶功能的影響[D];浙江大學;2005年

4 何艷;淋巴細胞膜K（v）通道在低氧免疫及適應中的作用[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2002年

5 孫希武;不同程度減壓低氧對心功能的影響及其機制探討[D];中國協和醫(yī)科大學;1995年

6 鄭瀾;低氧運動促進肌組織血管生成的機制[D];上海體育學院;2004年

7 馬慧娟;活性氧在慢性間歇性低壓低氧適應性心臟保護形成中的作用和機制[D];河北醫(yī)科大學;2012年

8 戴濤;低氧對外周血內皮祖細胞功能的影響及機制探討[D];浙江大學;2008年

9 余斌;低氧及運動對骨骼肌中低氧誘導因子影響的實驗研究[D];第一軍醫(yī)大學;2005年

10 劉園園;高原健康理論框架下的漸進型間歇性低氧預習服訓練研究[D];山東大學;2014年

中國碩士學位論文全文數據庫 前10條

1 熊曉毅;甘肅鼢鼠骨骼肌低氧適應特征的研究[D];陜西師范大學;2010年

2 黃釗;高原低氧低溫復合作用對大鼠血管內皮細胞的損傷及其防治作用的研究[D];天津體育學院;2013年

3 劉山;惡性腫瘤高—低氧放療的Ⅰ期臨床觀察[D];青島大學;2007年

4 鄒志兵;低氧運動對大鼠心肌組織低氧誘導因子和血管新生的影響[D];湖南師范大學;2008年

5 崔芳;慢性間歇性低壓低氧對麻醉大鼠腎神經放電的影響[D];河北醫(yī)科大學;2008年

6 郭海濤;血管鈉肽對低氧促心成纖維細胞生長的抑制作用及其機制[D];第四軍醫(yī)大學;2001年

7 林松;低氧拮抗細胞程序性壞死的作用及其機制研究[D];廣西醫(yī)科大學;2014年

8 高璐;間歇性低氧對麻醉大鼠頸動脈竇壓力感受器反射的影響[D];河北醫(yī)科大學;2007年

9 張蕾;缺氧對二價金屬轉運體（DMT1）表達的影響[D];南通大學;2006年

10 高媛;甘肅鼢鼠β珠蛋白基因測序及分析[D];陜西師范大學;2012年

  本文關鍵詞：低氧對肝癌HepG2細胞HIF-1α、VEGF、Bcl-2、Bax蛋白表達及增殖能力的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：497110