本文關(guān)鍵詞：低氧對(duì)肝癌HepG2細(xì)胞HIF-1α、VEGF、Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)及增殖能力的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：1目的利用氯化鈷(CoCl2)建立肝癌HepG2細(xì)胞的體外低氧模型,觀察不同時(shí)間段的肝癌HepG2細(xì)胞在不同濃度CoCl2模擬的低氧化境中的增殖能力的變化,并討論其可能的原因。測(cè)定不同程度低氧對(duì)肝癌HepG2細(xì)胞中蛋白HIF-1α、VEGF、Bcl-2、Bax的表達(dá)情況,并考慮其原因和帶來(lái)的生物學(xué)效應(yīng)。2方法用不同濃度的CoCl2 (0μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、 500μmol/L)模擬不同程度的低氧環(huán)境,在低氧環(huán)境中用不同的時(shí)間(12h、24h、 48h、 72h)培養(yǎng)肝癌HepG2細(xì)胞,誘導(dǎo)其缺氧,用CCK-8法檢測(cè)不同程度低氧下HepG2細(xì)胞增殖能力的變化。用不同濃度的CoCl2 (0μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、300μmol/L、 500μmol/L)模擬不同程度的低氧環(huán)境,在低氧環(huán)境中培養(yǎng)肝癌HepG2細(xì)胞48h,通過(guò)蛋白印跡法(Western Blot, WB)測(cè)定低氧環(huán)境中細(xì)胞內(nèi)HIF-1α、VEGF、Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的變化。3結(jié)果經(jīng)CCK-8法測(cè)定,結(jié)果示在一定濃度范圍以內(nèi)(≤100p,mol/L)的CoCl2對(duì)HepG2細(xì)胞增殖能力的影響不明顯。當(dāng)CoCl2濃度增加(≥200μmol/L)會(huì)抑制肝癌HepG2細(xì)胞的增殖能力,且濃度越高,抑制程度越強(qiáng)。經(jīng)WB法檢測(cè),結(jié)果示HIF-1α蛋白在50μmol/L、100pμnol/L、200μmol/L、300μmol/L、 500μmol/L濃度組相對(duì)灰度值依次為(0.277±0.003)、(0.272±0.003)、(0.333±0.005)(0.364±0.003)、(0.366±0.008),與常氧組的相對(duì)灰度值(0.122±0.002)相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；低氧組中,50pmol/L濃度組和100μmol/L濃度組之間、300μmol/L濃度組和500μmol/L濃度組的相對(duì)灰度值之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其他相鄰組之間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05) 。VEGF蛋白在50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、300μmol/L、 500μmol/L濃度組相對(duì)灰度值依次為(0.268±0.003)、(0.368±0.009)、(0.450±0.007)(0.535±0.010)、(0.584±0.015),與常氧組的相對(duì)灰度值(0.149±0.003)相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；低氧組的相對(duì)灰度值與前一濃度組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Bcl-2蛋白在50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、300μmol/L、500μmol/L濃度組相對(duì)灰度值依次為(0.439±0.003)、(0.399±0.005)、(0.322±0.004)、(0.263±0.001)、(0.124±0.002),與常氧組的相對(duì)灰度值(0.445±0.003)相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；低氧組的相對(duì)灰度值與前一濃度組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Bax蛋白在50μmol/L、100μmol/L、 200μmol/L、300μmol/L、500μmol/L濃度組相對(duì)灰度值依次為(0.362±0.005)、(0.455±0.007)、(0.480±0.009)、(0.506±0.006)、(0.541±0.014),與常氧組的相對(duì)灰度值(0.243±0.003)相比之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；低氧組的相對(duì)灰度值與前一濃度組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。在低氧下細(xì)胞中的HIF-1α、VEGF、Bax蛋白的表達(dá)均增加,并且蛋白的表達(dá)程度與低氧程度成正比；Bcl-2蛋白在低氧下的表達(dá)受到抑制,并且蛋白的表達(dá)程度與低氧程度成反比。4結(jié)論通過(guò)不同濃度CoCl2建立肝癌HepG2細(xì)胞的體外低氧模型,一定濃度范圍以內(nèi)(≤100μmol/L)的CoCl2對(duì)HepG2細(xì)胞增殖能力的影響不明顯,過(guò)高濃度的CoCl2 200μmol/L)會(huì)抑制HepG2細(xì)胞生長(zhǎng),且CoCl2濃度越高,抑制程度越強(qiáng)。CoCl2模擬的低氧環(huán)境可以誘導(dǎo)肝癌HepG2細(xì)胞的HIF-1α蛋白表達(dá)增強(qiáng),同時(shí)使信號(hào)通路中位于HIF-1α下游的VEGF、Bax蛋白的表達(dá)增強(qiáng),Bcl-2蛋白的表達(dá)減弱。
【關(guān)鍵詞】：低氧 肝細(xì)胞癌 HIF-1α VEGF Bcl-2 Bax
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• 英文摘要4-7
• 英文縮略詞表7-8
• 前言8-11
• 材料和方法11-17
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-22
• 討論22-27
• 結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-31
• 綜述31-52
• 參考文獻(xiàn)43-52
• 致謝52
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄52-53

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本文編號(hào)：497110