發(fā)布時間：2017-06-29 05:19

  本文關(guān)鍵詞：病毒巨噬細胞炎性蛋白ⅡN端肽抗腦膠質(zhì)瘤作用及分子機制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：研究病毒巨噬細胞炎性蛋白IIN端肽(NT21MP)對腦膠質(zhì)瘤的抑制作用及其分子機制。方法： 1.免疫熒光染色檢測人腦膠質(zhì)瘤細胞株U251、SHG-44中CXCR4受體和分化蛋白GFAP的表達情況；2.MTT、劃痕和趨化實驗檢測NT21MP對人腦膠質(zhì)瘤細胞U251、SHG-44增殖、遷移和侵襲能力；3.流式細胞技術(shù)檢測NT21MP對人腦膠質(zhì)瘤細胞U251、SHG-44細胞周期和凋亡的影響；4.實時定量PCR技術(shù)(qRT-PCR)檢測NT21MP對人腦膠質(zhì)瘤細胞周期調(diào)控分子(CyclinD1、CDK4)和凋亡相關(guān)分子(Bak1、Bcl-2、Bax)的表達變化；5.蛋白印跡技術(shù)(Western blotting)檢測周期調(diào)控蛋白(CyclinD1、CDK4)、凋亡相關(guān)蛋白(Bak1、Bcl-2、 Bax、Caspase3)的變化；6.通過qRT-PCR篩選高表達CXCR4腦膠質(zhì)瘤細胞株；7.利用RNA干擾技術(shù)下調(diào)CXCR4表達,通過體外活性檢測確認NT21MP是否通過阻滯CXCR4受體信號發(fā)揮抗腦膠質(zhì)瘤作用：CXCR4干擾后,通過劃痕、趨化實驗檢測NT21MP對細胞遷移侵襲的影響；通過流式細胞技術(shù)檢測NT21MP對細胞周期和凋亡的影響;通過qRT-PCR和Western blotting檢測NT21MP對周期和凋亡相關(guān)分子調(diào)控的影響；8.構(gòu)建腦膠質(zhì)瘤裸鼠原位和皮下模型,檢測NT21MP對腫瘤生長的抑制作用；9.HE染色檢測腫瘤組織形態(tài)變化。結(jié)果：1.SHG-44和U251細胞均表達CXCR4; 2.NT21MP抑制SDF-la誘導的細胞增殖,且呈劑量依賴性(P0.05), NT21MP抑制SDF-1a誘導的細胞遷移和侵襲(P0.05); 3. NT21MP阻滯SDF-1a誘導的腦膠質(zhì)瘤細胞細胞周期于G0/G1期,促進細胞的凋亡(P0.05); 4.NT21MP上調(diào)凋亡相關(guān)蛋白(Bak1、 Caspase3)的表達,下調(diào)Bcl-2/Bax和周期調(diào)控分子(CyclinD1、CDK4)的表達(P0.05)；5.干擾SHG44細胞中CXCR4后,NT21MP對SDF-1a誘導的遷移侵襲抑制率明顯減弱(P0.05),對細胞周期和細胞凋亡的調(diào)控率明顯下降(P0.05),對細胞周期和凋亡相關(guān)分子和蛋白的調(diào)控率均明顯下降(P0.05)；6.NT21MP體內(nèi)可以明顯抑制小鼠腦膠質(zhì)瘤的生長(P0.05),其腫瘤抑癌率為60.7%；7.HE染色進一步說明了NT21MP可以明顯抑制腦膠質(zhì)瘤的生長(P0.05)。結(jié)論：1.NT21MP通過阻滯SDF-1a/CXCR4生物軸,抑制腦膠質(zhì)瘤細胞的增殖、遷移和侵襲,誘導腫瘤細胞向正常星形膠質(zhì)樣細胞分化；2.NT21MP通過上調(diào)凋亡蛋白(Bak1、Caspase3)的表達,抑制Bcl-2/Bax和周期調(diào)控分子(CyclinD1、 CDK4)的表達,阻滯細胞周期從G1期向S期過渡,抑制腦膠質(zhì)瘤細胞增殖和促進凋亡,從而發(fā)揮抗腦膠質(zhì)瘤作用。
【關(guān)鍵詞】：腦膠質(zhì)瘤 病毒巨噬細胞炎性蛋白Ⅱ N端肽 CXCR4 SHG-44 U251
【學位授予單位】：蚌埠醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R739.41
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-13
• 材料和儀器13-16
• 實驗方法16-29
• 實驗結(jié)果29-52
• 討論52-57
• 結(jié)論57-58
• 參考文獻58-64
• 致謝64-65
• 附錄A 英文縮略詞65-66
• 附錄B 主要試劑配制66-67
• 附錄C 個人簡歷及發(fā)表文章67-68
• 附錄D 綜述68-78
• 參考文獻74-78
• 附件78-81

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本文編號：496723