本文關(guān)鍵詞：金納米星SERS基底用于肺癌細(xì)胞分析檢測(cè)的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：表面增強(qiáng)拉曼散射(surface-enhanced Raman scattering, SERS)作為一種有發(fā)展?jié)摿Φ男屡d的光譜分析技術(shù),具有穩(wěn)定、不易猝滅、損壞小、不受水的干擾以及指紋識(shí)別等特征,在化學(xué)、生物和醫(yī)學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域得到了很好的應(yīng)用。獲取SERS信號(hào)的前提是增強(qiáng)基底的使用,而金納米顆粒因具有易合成性、無(wú)毒性和好的穩(wěn)定性等多方面的優(yōu)勢(shì)常被用來(lái)作為信號(hào)增強(qiáng)基底。當(dāng)被檢測(cè)物質(zhì)接近增強(qiáng)基底時(shí),SERS信號(hào)可以實(shí)現(xiàn)1013-1014的增強(qiáng),甚至能達(dá)到單分子的檢測(cè)水平。在眾多的金納米顆粒中,金納米星被報(bào)導(dǎo)發(fā)現(xiàn)比球狀或者棒狀納米結(jié)構(gòu)具有更好的SERS效應(yīng),主要?dú)w因于其表面含有的多枝角狀結(jié)構(gòu)。利用靜電吸附法對(duì)金納米星進(jìn)行組裝,可以獲得更優(yōu)異的SERS效應(yīng)。所以,作為一種好的信號(hào)增強(qiáng)基底,金納米星近年來(lái)吸引了很多研究者的興趣,被用于生物蛋白檢測(cè)和細(xì)胞SERS研究等領(lǐng)域。本論文的工作主要是通過(guò)種子介導(dǎo)法制備了形狀和大小均一的金納米星,然后利用靜電吸附法有序組裝金納米星制備了均一性好、重現(xiàn)性好、穩(wěn)定性好的SERS活性基底,利用基底優(yōu)異的SERS增強(qiáng)效應(yīng)實(shí)現(xiàn)了對(duì)肺癌生物標(biāo)志物癌胚抗原(CEA)的SERS免疫測(cè)定,以及對(duì)兩種肺癌細(xì)胞(A549,H1229)和一種正常細(xì)胞(AT Ⅱ)SERS光譜的檢測(cè)和區(qū)分。具體工作內(nèi)容如下：1.金納米星SERS基底的制備和表征采用種子介導(dǎo)法制備了形貌和大小比較均勻的金納米星顆粒,并且拉曼檢測(cè)結(jié)果表明其具有好的SERS增強(qiáng)效果。為了獲得更優(yōu)異的SERS增強(qiáng)效果,利用靜電自組裝的方法將制備好的金納米星顆粒組裝到導(dǎo)電玻璃的表面,獲得了大面積的金納米星SERS基底。研究了不同組裝時(shí)間對(duì)基底SERS活性的影響,以及基底的均一性、重現(xiàn)性和穩(wěn)定性等性質(zhì)。結(jié)果表明,利用靜電自組裝法制備的金納米星SERS基底不僅具有優(yōu)異的SERS效應(yīng),而且具有比較好的均一性、重現(xiàn)性和穩(wěn)定性。2.金納米星SERS基底用于肺癌生物標(biāo)志物癌胚抗原的檢測(cè)基于金納米星基底構(gòu)建了一個(gè)用于肺癌生物標(biāo)志物癌胚抗原(CEA)檢測(cè)的SERS免疫測(cè)定系統(tǒng)。一方面,構(gòu)建了修飾4-巰基苯甲酸(MBA)和CEA抗體分子的金納米星SERS探針。另一方面,構(gòu)建了修飾二巰基丁二酸(DMSA)和不同濃度CEA抗原分子的金納米星免疫基底。當(dāng)探針存在的時(shí)候,CEA抗原分子就可以和免疫基底上的抗體進(jìn)行結(jié)合,從而檢測(cè)到MBA的信號(hào),并且強(qiáng)度的大小受CEA濃度的影響。結(jié)果表明,隨著CEA濃度的升高,檢測(cè)到的信號(hào)強(qiáng)度也越來(lái)越高,并且在峰位1077 cm-1處的強(qiáng)度和被處理的CEA濃度(10 pg/mL-1 μg/mL)的對(duì)數(shù)值之間存在很好的線性關(guān)系。3.金納米星SERS基底用于肺癌細(xì)胞和正常細(xì)胞的檢測(cè)和區(qū)分基于金納米星SERS基底實(shí)現(xiàn)了對(duì)兩種肺癌細(xì)胞(A549、H1229)和正常細(xì)胞(AT Ⅱ)的SERS光譜的檢測(cè)和區(qū)分。首先,將處理好的金納米星SERS基底與三種細(xì)胞共培養(yǎng)來(lái)獲得每種細(xì)胞的平均SERS光譜。其次,分析和比較了三種細(xì)胞SERS光譜之間的差譜,包括A549-ATⅡ差譜、H1229-AT Ⅱ差譜和A549-H1229差譜。同時(shí),也比較了不同細(xì)胞在特定峰位處的相對(duì)強(qiáng)度的差異,包括756 cm-1,1249 cm-1,1343 cm-1、1608 cm-1和1659 cm-1等。為了更好的呈現(xiàn)不同細(xì)胞之間的差異,對(duì)三種細(xì)胞的SERS光譜也進(jìn)行了相應(yīng)的主成分分析和散點(diǎn)圖分析。
【關(guān)鍵詞】：金納米星 組裝 表面增強(qiáng)拉曼散射 癌胚抗原 肺癌細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R734.2;TB383.1
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 第一章 緒論10-25
• 1.1 選題背景10
• 1.2 表面增強(qiáng)拉曼散射(SERS)在生物蛋白檢測(cè)上的應(yīng)用10-14
• 1.2.1 拉曼染料非標(biāo)記的檢測(cè)方法11-12
• 1.2.2 拉曼染料標(biāo)記的檢測(cè)方法12-14
• 1.3 表面增強(qiáng)拉曼散射(SERS)在細(xì)胞檢測(cè)上的應(yīng)用14-16
• 1.3.1 直接檢測(cè)細(xì)胞法14-16
• 1.3.2 間接檢測(cè)細(xì)胞法16
• 1.4 金納米星的研究概況16-20
• 1.4.1 金納米星的制備17
• 1.4.2 金納米星的組裝17-18
• 1.4.3 金納米星的應(yīng)用18-20
• 1.5 本論文的研究目的和主要研究?jī)?nèi)容20-21
• 參考文獻(xiàn)21-25
• 第二章 金納米星SERS基底的制備和表征25-37
• 2.1 引言25-26
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分26-28
• 2.2.1 試劑和材料26
• 2.2.2 儀器與設(shè)備26
• 2.2.3 金納米星的制備26-27
• 2.2.4 金納米星SERS基底的制備27
• 2.2.5 金納米星和金納米星基底的SERS效應(yīng)檢測(cè)27-28
• 2.2.6 表征28
• 2.3 結(jié)果與討論28-34
• 2.3.1 金納米星的表征28-30
• 2.3.2 金納米星SERS基底的表征30-34
• 2.4 本章小結(jié)34-35
• 參考文獻(xiàn)35-37
• 第三章 金納米星SERS基底用于肺癌生物標(biāo)志物癌胚抗原的檢測(cè)37-48
• 3.1 引言37-38
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分38-41
• 3.2.1 試劑和材料38
• 3.2.2 儀器與設(shè)備38-39
• 3.2.3 金納米星的制備39
• 3.2.4 金納米星SERS基底的制備39
• 3.2.5 金納米星SERS探針的制備39-40
• 3.2.6 金納米星免疫基底的制備40
• 3.2.7 CEA免疫反應(yīng)測(cè)定的過(guò)程40-41
• 3.2.8 表征41
• 3.3 結(jié)果與討論41-46
• 3.3.1 金納米星的表征41-42
• 3.3.2 金納米星SERS基底的表征42-43
• 3.3.3 金納米星SERS探針的表征43-45
• 3.3.4 金納米星免疫基底的表征45
• 3.3.5 CEA免疫反應(yīng)測(cè)定的結(jié)果表征45-46
• 3.4 本章小結(jié)46-47
• 參考文獻(xiàn)47-48
• 第四章 金納米星SERS基底用于肺癌細(xì)胞和正常細(xì)胞的檢測(cè)和區(qū)分48-59
• 4.1 引言48-49
• 4.2 實(shí)驗(yàn)部分49-52
• 4.2.1 試劑和材料49
• 4.2.2 儀器與設(shè)備49-50
• 4.2.3 金納米星的制備50
• 4.2.4 金納米星SERS基底的制備、清洗和滅菌50-51
• 4.2.5 細(xì)胞的培養(yǎng)和樣品的制備51
• 4.2.6 表征51-52
• 4.3 結(jié)果與討論52-56
• 4.3.1 金納米星SERS基底的表征52
• 4.3.2 三種細(xì)胞(A549、H1229和ATⅡ)的SERS光譜分析52-56
• 4.4 本章小結(jié)56-57
• 參考文獻(xiàn)57-59
• 第五章 總結(jié)與展望59-61
• 碩士期間的研究成果61-62
• 致謝62

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本文編號(hào)：481919