miR-103a-3p對PANC-1細胞增殖與遷移侵襲能力的影響
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【摘要】:目的:胰腺癌是具有高侵襲轉(zhuǎn)移生物學(xué)特征的消化道腫瘤之一,而胰腺癌的發(fā)生、發(fā)展及侵襲轉(zhuǎn)移等過程與mi RNA密切相關(guān)。本課題組前期通過應(yīng)用q RT-PCR檢測mi R-103a-3p在胰腺癌細胞株中表達明顯增高,并通過構(gòu)建其抑制表達的慢病毒感染PANC-1細胞從而獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細胞株[1]。本研究旨在細胞層面了解mi R-103a-3p對PANC-1胰腺癌細胞增殖與遷移侵襲能力的影響,并為下一步的動物體內(nèi)實驗及靶基因機制及其信號通路的研究提供實驗及理論基礎(chǔ)。方法:1、選取課題組前期PANC-1細胞株作為研究對象,將課題組前期構(gòu)建好的抑制mi R-103a-3p表達的慢病毒載體分別取1ul、5ul、10ul、20ul和空病毒載體分別轉(zhuǎn)染PANC-1細胞株。2、利用熒光顯微鏡觀察其轉(zhuǎn)染效率,再通過q RT-PCR檢測其表達情況,并篩選出mi R-103a-3p表達量最低的一組慢病毒轉(zhuǎn)染的PANC-1細胞株和空病毒轉(zhuǎn)染的PANC-1細胞株。3、將篩選出來的PANC-1細胞株分為三組:1)抑制mi R-103a-3p表達的慢病毒載體感染的PANC-1組(controlPANC-1);2)空病毒載體感染的PANC-1細胞株(NC-PANC-1);3)胰腺癌細胞組(PANC-1)。4、MTT法檢測三組細胞株的增殖能力;5、劃痕愈合試驗檢測三組細胞株的遷移能力;6、Transwell小室實驗檢測三組細胞株的侵襲能力。結(jié)果:1)將mi R-103a-3p-inhibitor慢病毒和空病毒載體轉(zhuǎn)染PANC-1細胞株后觀察其轉(zhuǎn)染效率,通過q RT-PCR檢測后篩選mi R-103a-3p表達量最低的PANC-1細胞株。2)MTT法檢測結(jié)果顯示:與空白組和NC-PANC-1相比,control-PANC-1組的PANC-1細胞數(shù)明顯減少(P0.05),并且隨著培養(yǎng)時間延長,control-PANC-1組細胞數(shù)量增長幅度比PANC-1組和NC-PANC-1組逐漸減弱。3)劃痕愈合試驗結(jié)果顯示:下調(diào)mi R-103a-3p表達量的control-PANC-1組比NC-PANC-1和空白組的劃痕愈合能力明顯下降。4)Transwell小室實驗結(jié)果顯示:下調(diào)mi R-103a-3p表達量的control-PANC-1組比NC-PANC-1和空白組的侵襲能力明顯下降。結(jié)論:mi R-103a-3p的高表達能促進PANC-1胰腺癌細胞的增殖、遷移及侵襲能力。
【關(guān)鍵詞】:mi R-103a-3p PANC-1細胞 增殖 遷移 侵襲
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R735.9
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-11
- 第1章 前言11-15
- 第2章 實驗內(nèi)容15-25
- 第3章 實驗結(jié)果25-31
- 第4章 討論31-37
- 第5章 結(jié)論37-39
- 參考文獻39-43
- 綜述43-51
- 參考文獻47-51
- 附錄51-53
- 致謝53
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9 朱sヨ,
本文編號:481966
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