發(fā)布時(shí)間：2017-06-25 09:19

  本文關(guān)鍵詞：下調(diào)XIAP對(duì)胃癌細(xì)胞凋亡、增殖及細(xì)胞周期的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：前期研究發(fā)現(xiàn)miR-30a-5p在胃癌細(xì)胞株中低表達(dá),并初步證實(shí)XIAP為miR-30a-5p的靶基因。本課題旨在探討XIAP在人胃癌組織和胃癌細(xì)胞中的表達(dá)情況,以及下調(diào)XIAP后對(duì)胃癌細(xì)胞凋亡、增殖和細(xì)胞周期的影響及其可能的作用機(jī)制。方法：收集54例胃癌患者的組織標(biāo)本及其臨床資料,用qRT-PCR法檢測(cè)組織標(biāo)本中XIAP mRNA的表達(dá)情況；以人正常胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1為對(duì)照,采用qRT-PCR法和Western Blot檢測(cè)胃癌細(xì)胞AGS、SGC-7901、MGC-803、BGC-823中XIAP mRNA和蛋白的表達(dá)情況。人工設(shè)計(jì)合成兩對(duì)XIAP siRNA干擾序列瞬時(shí)轉(zhuǎn)染以上5株細(xì)胞,以si-NC為對(duì)照,用同上方法檢測(cè)XIAP mRNA和蛋白的表達(dá)水平及干擾效率。Annexin V/PI法、CCK8法及流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)沉默XIAP后細(xì)胞凋亡、增殖及細(xì)胞周期的變化。結(jié)果：XIAP在胃癌組織中的表達(dá)高于癌旁組織(P0.001),且與免疫組化標(biāo)記物Her-2的表達(dá)有相關(guān)性(P0.01)。在胃癌細(xì)胞株AGS、SGC-7901、 MGC-803、BGC-823中XIAP蛋白的表達(dá)均高于正常胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1(P0.05),但在AGS細(xì)胞中XIAP mRNA的相對(duì)表達(dá)量低于GES-1。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染以上5株細(xì)胞后,XIAP mRNA和蛋白的表達(dá)均較陰性對(duì)照序列組(si-NC)降低(P0.05/P0.01),干擾效率顯著。下調(diào)XIAP后可增加胃癌細(xì)胞的凋亡率,呈時(shí)間依賴性抑制胃癌細(xì)胞的增殖(P0.05/P0.01),并誘導(dǎo)G0/G1和(或)G2/M期細(xì)胞阻滯。結(jié)論：XIAP mRNA在胃癌組織中表達(dá)上調(diào),且與免疫組化標(biāo)記物Her-2的表達(dá)有相關(guān)性。XIAP蛋白在胃癌細(xì)胞株中表達(dá)上調(diào),但與細(xì)胞內(nèi)XIAPmRNA的表達(dá)水平有差異。下調(diào)XIAP后,可明顯促進(jìn)胃癌細(xì)胞凋亡,抑制細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生G0/G1和(或)G2/M期細(xì)胞阻滯。
【關(guān)鍵詞】：XIAP 胃癌 凋亡 細(xì)胞增殖 細(xì)胞周期
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要3-4
• Abstract4-8
• 前言8-12
• 材料與方法12-24
• 1 材料12-13
• 1.1 組織標(biāo)本12
• 1.2 細(xì)胞株12
• 1.3 主要試劑12
• 1.4 主要儀器12
• 1.5 主要溶液配制12-13
• 2 方法13-24
• 2.1 組織標(biāo)本收取13-14
• 2.2 細(xì)胞培養(yǎng)14-15
• 2.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染15-16
• 2.4 RNA提取和qRT-PCR反應(yīng)16-18
• 2.5 Western Blot實(shí)驗(yàn)18-21
• 2.6 流式細(xì)胞術(shù)21-22
• 2.7 CCK-8實(shí)驗(yàn)22-23
• 2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理23-24
• 結(jié)果24-40
• 1 XIAP mRNA在胃癌組織中表達(dá)上調(diào)且與Her-2的表達(dá)有相關(guān)性24-26
• 2 XIAP mRNA和蛋白在胃癌細(xì)胞株中的表達(dá)具有差異性26-29
• 2.1 qRT-PCR檢測(cè)XIAP mRNA表達(dá)量26-27
• 2.2 Western Blot檢測(cè)XIAP蛋白表達(dá)量27-29
• 3 siRNA下調(diào)胃癌細(xì)胞XIAP的表達(dá)29-31
• 3.1 qRT-PCR觀察轉(zhuǎn)染效率29
• 3.2 Western Blot觀察轉(zhuǎn)染效率29-31
• 4 下調(diào)XIAP促進(jìn)胃癌細(xì)胞凋亡31-32
• 5 下調(diào)XIAP抑制胃癌細(xì)胞增殖32-35
• 6 下調(diào)XIAP誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯35-40
• 討論40-48
• 結(jié)論48-49
• 參考文獻(xiàn)49-53
• 中英文縮略詞表53-55
• 附錄55-65
• 附錄1 主要試劑55-57
• 附錄2 主要儀器57-58
• 附錄3 胃癌組織標(biāo)本入庫(kù)登記表58-59
• 附錄4 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表格59-65
• 在學(xué)期間成果65-66
• 致謝66

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 王廷超;胃癌患者為何年輕化?[J];解放軍健康;2003年06期

2 許永杰;;胃癌年輕化與飲食因素[J];健康博覽;1998年07期

3 高玉敏,胡月玲,辛志春,遲寶峰;心理因素及煙酒茶嗜好與胃癌關(guān)系的Meta分析[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年04期

  本文關(guān)鍵詞：下調(diào)XIAP對(duì)胃癌細(xì)胞凋亡、增殖及細(xì)胞周期的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：481626