本文關(guān)鍵詞：硼替佐米耐藥多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞基因表達(dá)譜分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景：多發(fā)性骨髓瘤是一種起源于漿細(xì)胞的惡性克隆性增殖疾病,好發(fā)于中老年,我國的平均發(fā)病年齡大約58歲,北美和歐洲約為70歲。我國人口的老齡化使得多發(fā)性骨髓瘤的發(fā)病率逐年升高。迄今為止,臨床上采用的放化療、自體/異體干細(xì)胞移植和靶向藥物治療多發(fā)性骨髓瘤,提高了患者生活質(zhì)量、延長生存期,但仍無法治愈。硼替佐米是一種蛋白酶體抑制劑,通過靶向作用于泛素-蛋白酶體系統(tǒng),抑制核因子NF-κB的活性促進(jìn)細(xì)胞凋亡,進(jìn)而發(fā)揮抗腫瘤作用。目前硼替佐米已成為多發(fā)性骨髓瘤的首選藥物,硼替佐米、地塞米松和/或傳統(tǒng)化療藥物組成的聯(lián)合化療方案是多發(fā)性骨髓瘤的標(biāo)準(zhǔn)治療選擇。隨著硼替佐米臨床上的廣泛應(yīng)用,原發(fā)或繼發(fā)耐藥也隨之產(chǎn)生。多發(fā)性骨髓瘤對硼替佐米的耐藥機(jī)制極為復(fù)雜,研究發(fā)現(xiàn)可能與NF-κB通路、PSMB5突變及漿細(xì)胞去分化有關(guān)。然而至今尚未完全闡明,尤其是不同于現(xiàn)有腫瘤多發(fā)耐藥的耐藥機(jī)制。因此,我們需要深入研究探尋預(yù)防及逆轉(zhuǎn)其耐藥的靶點(diǎn)。目的：應(yīng)用基因芯片技術(shù)分析硼替佐米敏感多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株KM3與耐藥多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株KM3/BTZ基因表達(dá)的差異性,探討硼替佐米耐藥相關(guān)基因及耐藥發(fā)生機(jī)制。方法：1.采用Affymetrix U133 plus 2.0全基因組表達(dá)譜芯片,分析KM3與KM3/BTZ之間的基因表達(dá)。2.采用RT-PCR法進(jìn)一步檢測基因表達(dá)的差異性。3.采用Western Blot法進(jìn)一步檢測差異基因蛋白表達(dá)水平的差異性。4.采用RT-PCR法檢測初診多發(fā)性骨髓瘤患者與難治復(fù)發(fā)多發(fā)性骨髓瘤患者差異基因的表達(dá)。5.運(yùn)用分子注釋系統(tǒng)MAS3.0軟件和已知耐藥相關(guān)基因進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果：1. KM3/BTZ與KM3相比,670個基因的表達(dá)具有差異性,差異表達(dá)10倍以上基因32個,主要涉及轉(zhuǎn)錄調(diào)控、信號傳導(dǎo)通路等生物效應(yīng)過程分子；HSPB2、ZNF及MS4A家族部分基因在KM3中低表達(dá),然而在KM3/BTZ中明顯上調(diào)；2.RT-PCR法檢測顯示,在KM3和KM3/BTZ細(xì)胞中,除JUN基因,其他7個基因(CA12、CYP1B1、EPB41L3、HSPB2、MS4A4A、SDPR、PAWR)與芯片檢測表達(dá)差異結(jié)果相符。3. Western Blot法檢測顯示,Par4蛋白表達(dá)與芯片檢測表達(dá)差異結(jié)果相符。4.復(fù)發(fā)進(jìn)展MM患者PAWR基因表達(dá)水平(0.034±0.013),明顯低于初診MM患者PAWR基因表達(dá)水平(0.11±0.053),P0.05。5.采用分子注釋系統(tǒng)(MAS)3.0中的GO生物學(xué)過程對基因表達(dá)差異富集分析顯示,耐藥細(xì)胞株相對于原代細(xì)胞株上調(diào)基因的表達(dá)差異主要參與免疫反應(yīng)、依賴DNA的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、轉(zhuǎn)錄、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)、細(xì)胞黏附及神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育等方面。下調(diào)基因主要集中在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、離子轉(zhuǎn)運(yùn)、依賴DNA的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、轉(zhuǎn)導(dǎo)及細(xì)胞黏附。結(jié)論：1.在KM3與KM3/BTZ篩選中,ZNF、MS4A家族部分成員以及另外30個表達(dá)差異10倍以上的基因,均有可能與多發(fā)性骨髓瘤硼替佐米耐藥相關(guān),尤其是PAWR基因。2.全基因數(shù)據(jù)篩選和耐藥相關(guān)基因具體分析,是探討多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞耐藥機(jī)制的理想方法之一
【關(guān)鍵詞】：多發(fā)性骨髓瘤 硼替佐米 耐藥 基因芯片
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R733.3
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 符號說明11-12
• 前言12-15
• 材料與方法15-31
• 結(jié)果31-33
• 討論33-38
• 結(jié)論38-39
• 附表39-42
• 附圖42-46
• 參考文獻(xiàn)46-50
• 致謝50-51
• 碩士研究生期間發(fā)表的文章51-52
• 附件52

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：480577