本文關(guān)鍵詞：迷走神經(jīng)調(diào)控對肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的影響及其相關(guān)機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：一、背景在我國肝細(xì)胞癌已成為排名第二位的癌癥死亡原因。外科手術(shù)是肝癌治療最為有效的手段,但是肝癌患者術(shù)后5年內(nèi)的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率卻高達80%,成為肝臟外科面臨的首要問題。肝癌的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移與腫瘤細(xì)胞的遷移、侵襲密切相關(guān)。近年來大量的研究證據(jù)表明,腫瘤的發(fā)生發(fā)展與神經(jīng)調(diào)控關(guān)系密切。本課題組前期的研究已經(jīng)證明交感神經(jīng)過度興奮可以加重肝臟損傷時發(fā)生的炎癥反應(yīng),進而促進肝癌的發(fā)生;另外,副交感神經(jīng)可以通過“膽堿能抗炎通路”抑制炎癥反應(yīng)的理論已經(jīng)得到公認(rèn)。然而,迷走神經(jīng)能否對肝癌的侵襲轉(zhuǎn)移產(chǎn)生影響,還未見文獻報道。二、目的明確迷走神經(jīng)分布及調(diào)控與肝細(xì)胞癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性,探討關(guān)鍵迷走神經(jīng)遞質(zhì)對人肝癌細(xì)胞遷移、侵襲能力所產(chǎn)生的影響及其相關(guān)的分子機制。三、方法1.收集原發(fā)及復(fù)發(fā)肝細(xì)胞癌患者的臨床手術(shù)切除標(biāo)本,利用免疫組織化學(xué)和Western Blot技術(shù),探討迷走神經(jīng)與肝細(xì)胞癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。2.體外培養(yǎng)SMMC-7721和HepG2兩種人肝癌細(xì)胞株,利用RT-PCR及免疫熒光技術(shù)檢測其中迷走神經(jīng)遞質(zhì)受體的表達表況,并用Transwell實驗探討迷走神經(jīng)遞質(zhì)在細(xì)胞水平對人肝癌細(xì)胞遷移、侵襲能力產(chǎn)生的影響。3.分別在M受體和N受體激動劑和阻滯劑作用下培養(yǎng)SMMC-7721和HepG2兩種人肝癌細(xì)胞株,通過Transwell實驗,明確M受體和N受體激動或阻滯后對兩種細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響;利用Cell Titer Blue細(xì)胞活性檢測技術(shù),探討迷走神經(jīng)遞質(zhì)及M受體和N受體的激動劑和阻滯劑對兩種細(xì)胞增殖能力的影響。最后,用Western Blotting檢測在上述不同物質(zhì)作用下SMMC-7721和Hep G2細(xì)胞中上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)標(biāo)志蛋白質(zhì)的表達變化情況。四、結(jié)果1.在肝細(xì)胞癌腫瘤組織中有迷走神經(jīng)纖維末稍分布,且其分布密度高于癌旁肝組織。這種現(xiàn)象的發(fā)生率在復(fù)發(fā)病例中更高,與原發(fā)病例相比差異顯著。2.SMMC-7721和Hep G2細(xì)胞上均有NK-1受體及膽堿能受體(包括M受體和N受體)表達。P物質(zhì)、乙酰膽堿、氯貝膽堿及尼古丁均能夠促進SMMC-7721和HepG2細(xì)胞遷移和侵襲;其中,氯貝膽堿及尼古丁的這種作用可分別被阿托品和美加明所抑制。3.P物質(zhì)、乙酰膽堿、氯貝膽堿、尼古丁、阿托品及美加明在短期內(nèi)(96小時)不對SMMC-7721和Hep G2細(xì)胞的增殖產(chǎn)生影響。4.P物質(zhì)、乙酰膽堿、氯貝膽堿及尼古丁可上調(diào)SMMC-7721和Hep G2細(xì)胞中N-Cadherin和Slug的表達,而下調(diào)E-Cadherin的表達;其中,氯貝膽堿及尼古丁的這種作用可分別被阿托品和美加明所抑制。五、結(jié)論1.在人肝細(xì)胞癌腫瘤組織中有迷走神經(jīng)纖維分布,且復(fù)發(fā)病例腫瘤組織中迷走神經(jīng)分布密度明顯增高,迷走神經(jīng)調(diào)控可能促進了肝細(xì)胞癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的形成。2.人肝癌細(xì)胞株上有NK-1受體及多種膽堿能受體表達;迷走神經(jīng)通過釋放P物質(zhì)及乙酰膽堿,分別與NK-1受體及膽堿能受體(M、N受體)結(jié)合,促進人肝癌細(xì)胞發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化,進而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞遷移、侵襲能力增強。
【關(guān)鍵詞】：迷走神經(jīng) 肝細(xì)胞癌 侵襲轉(zhuǎn)移 上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 英文摘要6-9
• 中文摘要9-11
• 第一章 前言11-13
• 第二章 迷走神經(jīng)分布與肝細(xì)胞癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性13-25
• 2.1 材料和方法13-20
• 2.2 結(jié)果20-23
• 2.3 討論23-25
• 第三章 不同迷走神經(jīng)遞質(zhì)對人肝癌細(xì)胞遷移、侵襲能力的影響25-45
• 3.1 材料和方法25-35
• 3.2 結(jié)果35-43
• 3.3 討論43-45
• 第四章 迷走神經(jīng)遞質(zhì)通過EMT促進人肝癌細(xì)胞遷移、侵襲45-66
• 4.1 材料和方法45-54
• 4.2 結(jié)果54-64
• 4.3 討論64-66
• 全文總結(jié)66-67
• 參考文獻67-71
• 文獻綜述 迷走神經(jīng)對肝臟病理生理過程調(diào)節(jié)作用的研究進展71-78
• 參考文獻75-78
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果78-79
• 致謝79

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李勇,黃瀛;S-100蛋白與周圍神經(jīng)[J];解剖學(xué)雜志;1995年05期

  本文關(guān)鍵詞：迷走神經(jīng)調(diào)控對肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的影響及其相關(guān)機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：476553