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miR-185對(duì)胃癌細(xì)胞SGC-7901侵襲遷移及CDC42基因表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-06-21 15:06

  本文關(guān)鍵詞:miR-185對(duì)胃癌細(xì)胞SGC-7901侵襲遷移及CDC42基因表達(dá)的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:探討mi R-185對(duì)胃癌細(xì)胞SGC-7901侵襲遷移所起的作用,進(jìn)一步闡述mi R-185對(duì)CDC42基因的影響。方法:1.采用前期mi RNA微陣列芯片結(jié)果,選取目的mi RNA,q RT-PCR技術(shù)進(jìn)一步驗(yàn)證芯片結(jié)果。2.采用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法,將mi R-185 mimics和無(wú)義序列分別轉(zhuǎn)染至SGC-7901細(xì)胞,倒置熒光顯微鏡觀察細(xì)胞轉(zhuǎn)染情況,q RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率。胃癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染后侵襲和遷移能力的變化則通過(guò)Trans-well小室法和劃痕實(shí)驗(yàn)觀察。生物信息學(xué)軟件預(yù)測(cè)目的mi RNA的靶基因,q RT-PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染后各組中CDC42基因的m RNA轉(zhuǎn)錄水平,Western blot檢測(cè)其蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:1.q RT-PCR驗(yàn)證備選mi RNA的基因芯片結(jié)果。2.選取mi R-185作為研究對(duì)象,利用生物信息學(xué)篩選出CDC42為其靶基因。胃癌細(xì)胞SGC-7901轉(zhuǎn)染24小時(shí)后,倒置熒光顯微鏡觀察結(jié)果顯示細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率約為80%。轉(zhuǎn)染mi R-185 mimics后,q RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示SGC-7901細(xì)胞中mi R-185表達(dá)水平顯著升高。Trans-well小室法和劃痕試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染mi R-185 mimics后細(xì)胞侵襲和遷移能力均下降。q RT-PCR、Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示,mi R-185 mimics組較轉(zhuǎn)染陰性組、轉(zhuǎn)染試劑組及空白對(duì)照組CDC42基因的m RNA及蛋白表達(dá)水平均降低。結(jié)論:1、mi R-185過(guò)表達(dá)可抑制胃癌細(xì)胞SGC-7901侵襲和遷移能力。2、mi R-185過(guò)表達(dá)能夠下調(diào)CDC42基因m RNA及蛋白質(zhì)的表達(dá),mi R-185可能通過(guò)CDC42基因在胃癌發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。3、mi R-185在胃癌中可能扮演著抑癌基因作用。
【關(guān)鍵詞】:胃癌 mi R-185 CDC42
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R735.2
【目錄】:
  • 主要英文縮略語(yǔ)索4-5
  • 摘要5-7
  • Abstract7-10
  • 第一章 前言10-14
  • 第二章 實(shí)驗(yàn)材料14-18
  • 第三章 實(shí)驗(yàn)方法18-27
  • 第四章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-38
  • 第五章 討論38-42
  • 第六章 結(jié)論42-44
  • 參考文獻(xiàn)44-50
  • 綜述50-60
  • 參考文獻(xiàn)55-60
  • 攻讀學(xué)位期間的科研成果60-62
  • 致謝62

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本文編號(hào):469027

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