本文關(guān)鍵詞：XPD基因?qū)MMC-7721細(xì)胞增殖、遷移及PTEN基因表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討人剪切修復(fù)基因XPD(Xeroderma pigmentosum D)轉(zhuǎn)染至人肝癌SMMC-7721細(xì)胞后,對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖、遷移、凋亡以及PTEN基因表達(dá)的影響。方法:本實(shí)驗(yàn)使用脂質(zhì)體Lipofectamine TM 2000作為載體介質(zhì),用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染法將空載質(zhì)粒pEGFP-N2和重組質(zhì)粒pEGFP-N2-XPD轉(zhuǎn)染入人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721細(xì)胞內(nèi)。實(shí)驗(yàn)分為四個(gè)組:空白對(duì)照組、脂質(zhì)體組、pEGFP-N2組、pEGFP-N2-XPD組。通過熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白的表達(dá);蛋白印跡(Western blotting)法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞中XPD和PTEN蛋白的表達(dá)水平;MTT法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的增殖水平;Transwell實(shí)驗(yàn)觀測(cè)腫瘤細(xì)胞遷移能力的改變;流式細(xì)胞儀檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的凋亡水平。結(jié)果:轉(zhuǎn)染空載質(zhì)粒pEGFP-N2和重組質(zhì)粒pEGFP-N2-XPD的人肝癌SMMC-7721細(xì)胞在熒光顯微鏡下均可見綠色熒光,表明轉(zhuǎn)染有效。pEGFP-N2-XPD組與其它三組相比:XPD和PTEN蛋白的表達(dá)量均明顯增加(p0.01);細(xì)胞的增殖能力均明顯減弱(p0.01);細(xì)胞的遷移能力均明顯下降(p0.05);細(xì)胞的凋亡率均明顯上升(p0.01)。結(jié)論:XPD能促進(jìn)PTEN基因的表達(dá),并能抑制肝癌細(xì)胞的增殖、遷移,促進(jìn)其凋亡。
【關(guān)鍵詞】：肝癌 XPD PTEN 增殖 遷移 凋亡
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-7
• 中英文縮略詞表7-8
• 第1章 前言8-10
• 第2章 材料和方法10-24
• 2.1 材料10-15
• 2.1.1 細(xì)胞株、空載及重組質(zhì)粒10
• 2.1.2 主要材料及試劑10-11
• 2.1.3 主要儀器設(shè)備11
• 2.1.4 自配試劑11-15
• 2.2 方法15-24
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)技術(shù)15-16
• 2.2.2 質(zhì)粒提取16-18
• 2.2.3 分組及質(zhì)粒的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染18-19
• 2.2.4 Western blot檢測(cè)相應(yīng)蛋白的表達(dá)19-21
• 2.2.5 MTT檢測(cè)細(xì)胞的增殖水平變化21-22
• 2.2.6 Transwell小室檢測(cè)遷移能力22
• 2.2.7 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞的凋亡情況22-23
• 2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析23-24
• 第3章 結(jié)果24-29
• 3.1 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染結(jié)果24
• 3.2 各組細(xì)胞XPD、PTEN蛋白表達(dá)結(jié)果24-25
• 3.3 MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖水平25-26
• 3.4 TRANSWELL遷移結(jié)果26-27
• 3.5 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡水平27-29
• 第4章 討論29-33
• 第5章 結(jié)論33-34
• 致謝34-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果39-40
• 綜述40-47
• 參考文獻(xiàn)44-47

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