本文關(guān)鍵詞：人乳腺癌MCF-7細(xì)胞在不同HER-2水平下外泌型miRNAs表達(dá)譜檢測(cè)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景：HER-2屬于膜酪氨酸激酶,是表皮生長(zhǎng)因子受體家族的成員,當(dāng)HER-2基因被激活,可導(dǎo)致細(xì)胞增生活躍和阻礙細(xì)胞的凋亡,這為腫瘤在乳腺癌中的發(fā)展提供主要的驅(qū)動(dòng)力。MicroRNAs (miRNAs)為一類(lèi)內(nèi)源性的非編碼RNA,含有18-24個(gè)核苷酸。miRNAs主要通過(guò)腫瘤生物學(xué)如細(xì)胞增殖、分化、侵襲、細(xì)胞凋亡和轉(zhuǎn)移等方面調(diào)節(jié)細(xì)胞的發(fā)生發(fā)展。研究結(jié)果顯示,miRNAs既可扮演癌基因又可扮演抑癌基因參與調(diào)控基因的表達(dá)。近些年有關(guān)HER-2和miRNAs之間關(guān)系的報(bào)道日益增多,其中有些研究提示乳腺癌的發(fā)生發(fā)展與HER-2的過(guò)表達(dá)和miRNAs的失調(diào)相關(guān)聯(lián)。本課題組前期的研究也顯示不同HER-2表達(dá)水平的乳腺癌細(xì)胞在miRNAs表達(dá)譜上存在差異。因此,探究miRNAs和HER-2之間的聯(lián)系極為重要。隨著液體活檢技術(shù)的臨床意義逐步被人們認(rèn)識(shí),在臨床上對(duì)腫瘤患者體液以及在實(shí)驗(yàn)室中對(duì)腫瘤培養(yǎng)上清內(nèi)腫瘤細(xì)胞外泌物質(zhì)的研究已成為研究熱點(diǎn)。目的：檢測(cè)不同HER-2表達(dá)水平人乳腺癌細(xì)胞培養(yǎng)上清中腫瘤細(xì)胞外泌的miRNAs,初步篩選出與HER-2表達(dá)相關(guān)的外泌型miRNAs表達(dá)譜。方法：(1)培養(yǎng)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染HER-2的MCF-7(MCF-7/HER-2),分別收集兩株細(xì)胞的培養(yǎng)上清,利用miRNAs芯片技術(shù)檢測(cè)其miRNAs的表達(dá),并與MCF-7和MCF-7/HER-2細(xì)胞中miRNAs表達(dá)譜進(jìn)行比對(duì)。(2)應(yīng)用生物信息學(xué)對(duì)miRNAs hsa-miR-5703、hsa-miR-92b-5p和miRNA hsa-miR-589-3p進(jìn)行與HER-2相關(guān)的信號(hào)通路的初步預(yù)測(cè)。結(jié)果：(1)通過(guò)對(duì)樣品miRNAs芯片表達(dá)譜的結(jié)果分析,對(duì)照組選取MCF-7細(xì)胞培養(yǎng)上清,以上調(diào)或下調(diào)≥2倍為基準(zhǔn),miRNAs與HER-2相關(guān)的通過(guò)篩選獲得138種,其中有86個(gè)miRNAs上調(diào),有52個(gè)miRNAs下調(diào)。在這些miRNAs中,上調(diào)高于5倍的有列舉如下:hsa-miR-4489、hsa-miR-92b-5p、hsa-miR-3150b-3p、 hsa-miR-302d-5p、hsa-miR-5703、hsa-miR-583、hsa-miR-582-3p和hsa-miR-4270共8個(gè),而下調(diào)高于5倍的有hsa-miR-589-3p。(2)將細(xì)胞培養(yǎng)上清液中篩選出與HER-2相關(guān)的外泌型miRNAs與本課題組前期研究細(xì)胞裂解液中篩選出與HER-2相關(guān)的miRNAs進(jìn)行比對(duì),兩者中同時(shí)上調(diào)的有7種；同時(shí)下調(diào)的有7種；在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中上調(diào)而在細(xì)胞中下調(diào)的有1種；在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中下調(diào)而在細(xì)胞中上調(diào)的有7種。(3)生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)hsa-miR-5703、hsa-miR-92b-5p和hsa-miR-589-3p信號(hào)通路可能與HER-2直接或間接相關(guān)聯(lián)。結(jié)論：(1)不同HER-2水平的人乳腺癌細(xì)胞外泌miRNAs存在差異性表達(dá)。(2)人乳腺癌細(xì)胞外泌miRNAs與其細(xì)胞中miRNAs含量不平行。(3)生物信息學(xué)預(yù)測(cè)提示hsa-miR-57、hsa-miR-92b-5p和hsa-miR-589-3p可能通過(guò)與HER-2相關(guān)信號(hào)通路調(diào)控腫瘤的發(fā)生發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】：乳腺腫瘤 細(xì)胞培養(yǎng)上清 miRNAs
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R737.9
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 1 引言11-13
• 2 材料13-18
• 3 方法18-22
• 4 結(jié)果22-28
• 5 討論28-33
• 6 結(jié)論33-34
• 7 小結(jié)34
• 8 進(jìn)一步打算34-35
• 參考文獻(xiàn)35-41
• 附錄41-43
• 致謝43-44
• 綜述44-56
• 參考文獻(xiàn)53-56

【相似文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：人乳腺癌MCF-7細(xì)胞在不同HER-2水平下外泌型miRNAs表達(dá)譜檢測(cè)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：442501