本文關(guān)鍵詞：雄激素受體剪切變異體7在前列腺癌去勢(shì)抵抗中的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:1、建立耐Enzalutamide前列腺癌ENZ-R-LNCaP細(xì)胞模型,并驗(yàn)證雄激素受體剪切變異體7(AR-V7)在ENZ-R-LNCaP細(xì)胞的表達(dá)。2、免疫組化驗(yàn)證AR-V7在低、中、高危前列腺癌標(biāo)本中的表達(dá)情況。方法:1、于含活性炭/葡聚糖處理過的胎牛血清培養(yǎng)基培養(yǎng)前列腺癌LNCaP細(xì)胞,其中加入0.1、0.3、1.0uM三個(gè)不同濃度二代雄激素受體拮抗劑Enzalutamide(MDV3100),進(jìn)行連續(xù)傳代培養(yǎng),建立耐Enzalutamide的ENZ-R-LNCaP細(xì)胞模型,倒置顯微鏡下觀察LNCaP細(xì)胞在無雄激素下的生長(zhǎng)狀態(tài)以及其形態(tài)的變化,并運(yùn)用western blot技術(shù)檢測(cè)前列腺癌LNCaP細(xì)胞AR-FL及AR-V7蛋白表達(dá)變化。2、根據(jù)2015年歐洲泌尿外科學(xué)會(huì)(European Association Of Urology,EUA)標(biāo)準(zhǔn),收集南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科前列腺癌術(shù)后臨床組織標(biāo)本40例,其中低危10例,中、高危組各15例,運(yùn)用免疫組化染色方法,分別檢測(cè)在不同危險(xiǎn)度前列腺癌標(biāo)本AR-V7蛋白的表達(dá)。結(jié)果:1、LNCaP細(xì)胞在活性炭/葡聚糖處理過的胎牛血清培養(yǎng)液+Enzalutamide中,初期(3代)生長(zhǎng)受到明顯抑制,表現(xiàn)為細(xì)胞難以貼壁,出現(xiàn)大量細(xì)胞死亡,僅少數(shù)存活,開始向周圍伸出突起;約傳至9代后可見細(xì)胞逐漸向周圍伸出較多突起,并相互聯(lián)系成網(wǎng)狀,細(xì)胞呈自分泌狀態(tài);當(dāng)繼續(xù)培養(yǎng)到12代時(shí),細(xì)胞不再呈自分泌狀態(tài),隨著細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)4個(gè)月后LNCaP細(xì)胞呈鋪開樣生長(zhǎng),且細(xì)胞狀態(tài)及形態(tài)發(fā)生了變化,細(xì)胞體積變小,呈圓形或梭形,細(xì)胞突觸較少。2、western blot檢測(cè)AR-FL和AR-V7:加0.1,0.3,1.0uM Enzalutamide(MDV3100)的三個(gè)實(shí)驗(yàn)組與未加Enzalutamide組比較,AR-V7蛋白表達(dá)呈顯著上調(diào)(P0.05),且在不同劑量下表達(dá)差異明顯(P0.05)。3、免疫組化顯示:結(jié)果示AR-V7絕大多數(shù)表達(dá)于細(xì)胞核內(nèi),僅少量表達(dá)于胞質(zhì)中;40例前列腺癌標(biāo)本AR-V7有19例陽性表達(dá),總陽性表達(dá)率47.5%(19/40),其中低危陽性表達(dá)為20%(2/10)、中危陽性表達(dá)40%(6/15)及高危陽性表達(dá)73.3%(11/15),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1、在含活性炭/葡聚糖處理的胎牛血清培養(yǎng)液中加入雄激素受體阻斷劑Enzalutamide,對(duì)前列腺癌細(xì)胞LNCaP進(jìn)行連續(xù)傳代培養(yǎng),可建立耐Enzalutamide的ENZ-R-LNCaP細(xì)胞模型。2、AR-V7的表達(dá)量可能與前列腺癌危險(xiǎn)因素等級(jí)相關(guān),并可能與前列腺癌去勢(shì)抵抗的發(fā)生、進(jìn)展密切相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：前列腺癌 雄激素受體 雄激素受體剪切變異體 AR-FL AR-V7
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.25
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-8
• 中英文縮略詞表8-10
• 第1章 引言10-13
• 第2章 材料與方法13-25
• 2.1 材料13-15
• 2.1.1 細(xì)胞株來源13
• 2.1.2 主要試劑13-14
• 2.1.3 主要儀器與設(shè)備14-15
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟15-23
• 2.2.1 耐Enzalutamide前列腺癌ENZ-R-LNCaP細(xì)胞建立15-18
• 2.2.2 Western blot檢測(cè)各組全長(zhǎng)雄激素受體(AR-FL)及雄激素受體剪切變異體7(AR-V7)蛋白質(zhì)表達(dá)水平18-21
• 2.2.3 前列腺癌臨床標(biāo)本AR-V7免疫組化21-23
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理23-25
• 第3章 結(jié)果25-28
• 3.1 ENZ-R-LNCaP前列腺癌細(xì)胞模型的建立25-26
• 3.2 western blot檢測(cè)不同劑量條件下AR-FL和AR-V7蛋白表達(dá)26
• 3.3 免疫組化AR-V7在前列腺癌的表達(dá)情況26-28
• 第4章 討論28-32
• 第5章 結(jié)論32-33
• 致謝33-34
• 參考文獻(xiàn)34-38
• 綜述38-43
• 參考文獻(xiàn)42-43

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王海青;楊崇禮;;雄激素的療愈原理[J];天津醫(yī)藥;1986年05期

2 崔毓桂;雄激素受體研究方法及其進(jìn)展[J];實(shí)用男科雜志;1996年03期

3 劉穎,陸一帆;運(yùn)動(dòng)對(duì)制動(dòng)大鼠骨骼肌中雄激素受體的影響[J];中國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志;2001年04期

4 張子彥;雄激素受體的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè));2002年02期

5 江軍,金錫御,靳風(fēng)爍,王洛夫;雄激素對(duì)大鼠前列腺不同分葉雄激素受體及其mRNA表達(dá)的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2003年13期

6 陳蕾蕾,姚兵;睪丸外組織雄激素受體的分布及檢測(cè)[J];中華男科學(xué);2003年01期

7 梁軍;雄激素對(duì)淋巴細(xì)胞的調(diào)節(jié)[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2004年03期

8 王洛夫,江軍;雄激素受體在雄激素非依賴性前列腺癌中的作用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2004年24期

9 楊潔,張秋養(yǎng),葛玲,邱曙東;青春期大鼠實(shí)驗(yàn)性精索靜脈曲張對(duì)附睪雄激素受體的影響[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2005年01期

10 朱院山;蔡力群;;雄激素對(duì)男性性別、行為和認(rèn)知的影響(英文)[J];中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2006年02期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 謝駿逸;陳力;;雄激素及其相關(guān)因素對(duì)痤瘡影響的研究進(jìn)展[A];2010全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

2 游冬青;肖錦松;趙芳;;人雄激素受體激素結(jié)合區(qū)的克隆表達(dá)與活性研究[A];第三屆全國現(xiàn)代生物物理技術(shù)學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];2000年

3 邱云霞;曲燕;李相如;于建榮;;雄激素受體抵抗1例[A];第5次全國中西醫(yī)結(jié)合男科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編暨男科提高班講義[C];2007年

4 田軍;陶天遵;王凱夫;高峰;單雨;李磊;;雄性大鼠成骨細(xì)胞內(nèi)雄激素受體表達(dá)的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第三次全國骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)會(huì)議暨骨質(zhì)疏松診斷技術(shù)繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2004年

5 李霖;李紅;尹雪瑤;潘倩倩;吳芳;;雄激素受體在波動(dòng)性高糖致人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十一次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

6 溫俊平;陳剛;薛瑩;;雄激素不敏感綜合征的臨診應(yīng)對(duì)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

7 劉娜;賈影;戚基萍;;雄激素受體在乳腺癌中的表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)日程及論文匯編[C];2010年

8 郭東星;張華屏;劉立民;艾曉杰;喬中東;;核因子--κB在雄激素處理的巨噬細(xì)胞中的表達(dá)[A];動(dòng)物學(xué)專輯——上海市動(dòng)物學(xué)會(huì)2002年年會(huì)論文集[C];2002年

9 張曼娜;孫首悅;張惠杰;顧衛(wèi)瓊;洪潔;劉建民;王衛(wèi)慶;寧光;李小英;;4例雄激素受體不敏感型綜合征患者的分子遺傳學(xué)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第二屆糖尿病及性腺疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

10 桂耀庭;;雄激素受體在精子發(fā)生的作用及其分子機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)生殖醫(yī)學(xué)分會(huì)人類精子庫管理學(xué)組第三屆年會(huì)全國男性生殖醫(yī)學(xué)和精子庫管理新進(jìn)展第四次研討會(huì)論文匯編[C];2012年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 張超群 李幼玲 范曉莉;山西醫(yī)大第一醫(yī)院研究發(fā)現(xiàn)：雄激素受體與再障貧血有關(guān)[N];中國醫(yī)藥報(bào);2005年

2 白毅;新型雄激素受體調(diào)節(jié)劑有望治療前列腺癌[N];中國醫(yī)藥報(bào);2008年

3 陳茂j　余寧寧;ASC-J9為肌肉萎縮癥治療帶來曙光[N];中國醫(yī)藥報(bào);2007年

4 美國紐約羅切斯特大學(xué)教授 張傳祥;雄激素 膀胱癌研究新目標(biāo)[N];健康報(bào);2007年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 莫文娟;前列腺癌雄激素轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

2 趙靜雯;雄激素受體調(diào)控的eRNA在去勢(shì)抵抗型前列腺癌enzalutamide抵抗中的作用研究[D];吉林大學(xué);2016年

3 盧益甄;前列腺癌遺傳多態(tài)性風(fēng)險(xiǎn)位點(diǎn)功能及機(jī)制分析[D];浙江大學(xué);2016年

4 潘家驊;雄激素/AR-Twist2軸的調(diào)控及其促進(jìn)前列腺癌惡性侵襲的機(jī)制研究[D];上海交通大學(xué);2015年

5 蔣璐頻;雄激素/雄激素受體軸調(diào)控Nanog基因?qū)δ[瘤細(xì)胞干性影響及機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2016年

6 張紀(jì)元;雄激素受體介導(dǎo)的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)及蛋白磷酸酶2Cκ的進(jìn)一步功能研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

7 鄒惟瑩;Trihydrophobin 1促進(jìn)雄激素受體降解及其在乳腺癌進(jìn)展過程中作用的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

8 龐瑩;痤瘡的流行病學(xué)及與雄激素受體基因多態(tài)性的相關(guān)研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2008年

9 伍學(xué)焱;雄激素受體結(jié)合分析和5α-還原酶活性測(cè)定方法的建立及初步臨床應(yīng)用[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1998年

10 曾星;L型鈣通道CACNA1D調(diào)控前列腺癌細(xì)胞雄激素受體活性的機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張聰哲;LSD1介導(dǎo)的組蛋白H3K4去甲基化對(duì)雄激素受體調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

2 徐鵬;醋酸阿比特龍治療轉(zhuǎn)移去勢(shì)抵抗性前列腺癌早期療效和安全性評(píng)價(jià)[D];吉林大學(xué);2016年

3 郭廣柱;3- (4-氟苯基)-1H-吡唑類雄激素受體拮抗劑的合成及其活性評(píng)價(jià)[D];山東大學(xué);2016年

4 陳立黎;雌、雄激素對(duì)羅非魚性別分化和性腺基因表達(dá)的影響[D];西南大學(xué);2016年

5 吳萬明;雄激素受體在乳腺癌中的表達(dá)及意義[D];暨南大學(xué);2016年

6 馬一鳴;雄激素受體在周期性機(jī)械牽拉調(diào)控骨骼肌C2C12細(xì)胞增殖中的作用及機(jī)制[D];上海體育學(xué)院;2016年

7 李光磊;前列腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞中雄激素受體促進(jìn)前列腺癌生長(zhǎng)及侵襲轉(zhuǎn)移能力的研究[D];濱州醫(yī)學(xué)院;2015年

8 何根業(yè);選擇性雄激素受體調(diào)節(jié)劑（SARMs）檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用[D];北京體育大學(xué);2015年

9 肖澤文;雄激素受體剪切變異體7在前列腺癌去勢(shì)抵抗中的實(shí)驗(yàn)研究[D];南昌大學(xué);2016年

10 吳淑芬;再生障礙性貧血患者雄激素和雄激素受體的改變及其意義[D];山西醫(yī)科大學(xué);2004年

  本文關(guān)鍵詞：雄激素受體剪切變異體7在前列腺癌去勢(shì)抵抗中的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：435801