本文關鍵詞：雄激素受體剪切變異體7在前列腺癌去勢抵抗中的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:1、建立耐Enzalutamide前列腺癌ENZ-R-LNCaP細胞模型,并驗證雄激素受體剪切變異體7(AR-V7)在ENZ-R-LNCaP細胞的表達。2、免疫組化驗證AR-V7在低、中、高危前列腺癌標本中的表達情況。方法:1、于含活性炭/葡聚糖處理過的胎牛血清培養(yǎng)基培養(yǎng)前列腺癌LNCaP細胞,其中加入0.1、0.3、1.0uM三個不同濃度二代雄激素受體拮抗劑Enzalutamide(MDV3100),進行連續(xù)傳代培養(yǎng),建立耐Enzalutamide的ENZ-R-LNCaP細胞模型,倒置顯微鏡下觀察LNCaP細胞在無雄激素下的生長狀態(tài)以及其形態(tài)的變化,并運用western blot技術檢測前列腺癌LNCaP細胞AR-FL及AR-V7蛋白表達變化。2、根據(jù)2015年歐洲泌尿外科學會(European Association Of Urology,EUA)標準,收集南昌大學第一附屬醫(yī)院泌尿外科前列腺癌術后臨床組織標本40例,其中低危10例,中、高危組各15例,運用免疫組化染色方法,分別檢測在不同危險度前列腺癌標本AR-V7蛋白的表達。結果:1、LNCaP細胞在活性炭/葡聚糖處理過的胎牛血清培養(yǎng)液+Enzalutamide中,初期(3代)生長受到明顯抑制,表現(xiàn)為細胞難以貼壁,出現(xiàn)大量細胞死亡,僅少數(shù)存活,開始向周圍伸出突起;約傳至9代后可見細胞逐漸向周圍伸出較多突起,并相互聯(lián)系成網(wǎng)狀,細胞呈自分泌狀態(tài);當繼續(xù)培養(yǎng)到12代時,細胞不再呈自分泌狀態(tài),隨著細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)4個月后LNCaP細胞呈鋪開樣生長,且細胞狀態(tài)及形態(tài)發(fā)生了變化,細胞體積變小,呈圓形或梭形,細胞突觸較少。2、western blot檢測AR-FL和AR-V7:加0.1,0.3,1.0uM Enzalutamide(MDV3100)的三個實驗組與未加Enzalutamide組比較,AR-V7蛋白表達呈顯著上調(diào)(P0.05),且在不同劑量下表達差異明顯(P0.05)。3、免疫組化顯示:結果示AR-V7絕大多數(shù)表達于細胞核內(nèi),僅少量表達于胞質(zhì)中;40例前列腺癌標本AR-V7有19例陽性表達,總陽性表達率47.5%(19/40),其中低危陽性表達為20%(2/10)、中危陽性表達40%(6/15)及高危陽性表達73.3%(11/15),差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:1、在含活性炭/葡聚糖處理的胎牛血清培養(yǎng)液中加入雄激素受體阻斷劑Enzalutamide,對前列腺癌細胞LNCaP進行連續(xù)傳代培養(yǎng),可建立耐Enzalutamide的ENZ-R-LNCaP細胞模型。2、AR-V7的表達量可能與前列腺癌危險因素等級相關,并可能與前列腺癌去勢抵抗的發(fā)生、進展密切相關。
【關鍵詞】：前列腺癌 雄激素受體 雄激素受體剪切變異體 AR-FL AR-V7
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.25
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-8
• 中英文縮略詞表8-10
• 第1章 引言10-13
• 第2章 材料與方法13-25
• 2.1 材料13-15
• 2.1.1 細胞株來源13
• 2.1.2 主要試劑13-14
• 2.1.3 主要儀器與設備14-15
• 2.2 實驗方法與步驟15-23
• 2.2.1 耐Enzalutamide前列腺癌ENZ-R-LNCaP細胞建立15-18
• 2.2.2 Western blot檢測各組全長雄激素受體(AR-FL)及雄激素受體剪切變異體7(AR-V7)蛋白質(zhì)表達水平18-21
• 2.2.3 前列腺癌臨床標本AR-V7免疫組化21-23
• 2.3 統(tǒng)計學處理23-25
• 第3章 結果25-28
• 3.1 ENZ-R-LNCaP前列腺癌細胞模型的建立25-26
• 3.2 western blot檢測不同劑量條件下AR-FL和AR-V7蛋白表達26
• 3.3 免疫組化AR-V7在前列腺癌的表達情況26-28
• 第4章 討論28-32
• 第5章 結論32-33
• 致謝33-34
• 參考文獻34-38
• 綜述38-43
• 參考文獻42-43

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王海青;楊崇禮;;雄激素的療愈原理[J];天津醫(yī)藥;1986年05期

2 崔毓桂;雄激素受體研究方法及其進展[J];實用男科雜志;1996年03期

3 劉穎,陸一帆;運動對制動大鼠骨骼肌中雄激素受體的影響[J];中國康復醫(yī)學雜志;2001年04期

4 張子彥;雄激素受體的研究進展[J];國外醫(yī)學(分子生物學分冊);2002年02期

5 江軍,金錫御,靳風爍,王洛夫;雄激素對大鼠前列腺不同分葉雄激素受體及其mRNA表達的影響[J];第三軍醫(yī)大學學報;2003年13期

6 陳蕾蕾,姚兵;睪丸外組織雄激素受體的分布及檢測[J];中華男科學;2003年01期

7 梁軍;雄激素對淋巴細胞的調(diào)節(jié)[J];現(xiàn)代免疫學;2004年03期

8 王洛夫,江軍;雄激素受體在雄激素非依賴性前列腺癌中的作用[J];第三軍醫(yī)大學學報;2004年24期

9 楊潔,張秋養(yǎng),葛玲,邱曙東;青春期大鼠實驗性精索靜脈曲張對附睪雄激素受體的影響[J];西安交通大學學報(醫(yī)學版);2005年01期

10 朱院山;蔡力群;;雄激素對男性性別、行為和認知的影響(英文)[J];中南大學學報(醫(yī)學版);2006年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 謝駿逸;陳力;;雄激素及其相關因素對痤瘡影響的研究進展[A];2010全國中西醫(yī)結合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2010年

2 游冬青;肖錦松;趙芳;;人雄激素受體激素結合區(qū)的克隆表達與活性研究[A];第三屆全國現(xiàn)代生物物理技術學術討論會論文摘要匯編[C];2000年

3 邱云霞;曲燕;李相如;于建榮;;雄激素受體抵抗1例[A];第5次全國中西醫(yī)結合男科學術會議論文匯編暨男科提高班講義[C];2007年

4 田軍;陶天遵;王凱夫;高峰;單雨;李磊;;雄性大鼠成骨細胞內(nèi)雄激素受體表達的研究[A];中華醫(yī)學會第三次全國骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學術會議暨骨質(zhì)疏松診斷技術繼續(xù)教育學習班論文匯編[C];2004年

5 李霖;李紅;尹雪瑤;潘倩倩;吳芳;;雄激素受體在波動性高糖致人臍靜脈內(nèi)皮細胞損傷中的作用[A];中華醫(yī)學會第十一次全國內(nèi)分泌學學術會議論文匯編[C];2012年

6 溫俊平;陳剛;薛瑩;;雄激素不敏感綜合征的臨診應對[A];中華醫(yī)學會第十二次全國內(nèi)分泌學學術會議論文匯編[C];2013年

7 劉娜;賈影;戚基萍;;雄激素受體在乳腺癌中的表達[A];中華醫(yī)學會病理學分會2010年學術年會日程及論文匯編[C];2010年

8 郭東星;張華屏;劉立民;艾曉杰;喬中東;;核因子--κB在雄激素處理的巨噬細胞中的表達[A];動物學專輯——上海市動物學會2002年年會論文集[C];2002年

9 張曼娜;孫首悅;張惠杰;顧衛(wèi)瓊;洪潔;劉建民;王衛(wèi)慶;寧光;李小英;;4例雄激素受體不敏感型綜合征患者的分子遺傳學研究[A];中華醫(yī)學會第二屆糖尿病及性腺疾病學術會議論文集[C];2012年

10 桂耀庭;;雄激素受體在精子發(fā)生的作用及其分子機制[A];中華醫(yī)學會生殖醫(yī)學分會人類精子庫管理學組第三屆年會全國男性生殖醫(yī)學和精子庫管理新進展第四次研討會論文匯編[C];2012年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 張超群 李幼玲 范曉莉;山西醫(yī)大第一醫(yī)院研究發(fā)現(xiàn)：雄激素受體與再障貧血有關[N];中國醫(yī)藥報;2005年

2 白毅;新型雄激素受體調(diào)節(jié)劑有望治療前列腺癌[N];中國醫(yī)藥報;2008年

3 陳茂j　余寧寧;ASC-J9為肌肉萎縮癥治療帶來曙光[N];中國醫(yī)藥報;2007年

4 美國紐約羅切斯特大學教授 張傳祥;雄激素 膀胱癌研究新目標[N];健康報;2007年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 莫文娟;前列腺癌雄激素轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡的研究[D];復旦大學;2010年

2 趙靜雯;雄激素受體調(diào)控的eRNA在去勢抵抗型前列腺癌enzalutamide抵抗中的作用研究[D];吉林大學;2016年

3 盧益甄;前列腺癌遺傳多態(tài)性風險位點功能及機制分析[D];浙江大學;2016年

4 潘家驊;雄激素/AR-Twist2軸的調(diào)控及其促進前列腺癌惡性侵襲的機制研究[D];上海交通大學;2015年

5 蔣璐頻;雄激素/雄激素受體軸調(diào)控Nanog基因?qū)δ[瘤細胞干性影響及機制研究[D];第三軍醫(yī)大學;2016年

6 張紀元;雄激素受體介導的基因調(diào)控網(wǎng)絡及蛋白磷酸酶2Cκ的進一步功能研究[D];復旦大學;2010年

7 鄒惟瑩;Trihydrophobin 1促進雄激素受體降解及其在乳腺癌進展過程中作用的研究[D];復旦大學;2010年

8 龐瑩;痤瘡的流行病學及與雄激素受體基因多態(tài)性的相關研究[D];中國醫(yī)科大學;2008年

9 伍學焱;雄激素受體結合分析和5α-還原酶活性測定方法的建立及初步臨床應用[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;1998年

10 曾星;L型鈣通道CACNA1D調(diào)控前列腺癌細胞雄激素受體活性的機制研究[D];華中科技大學;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張聰哲;LSD1介導的組蛋白H3K4去甲基化對雄激素受體調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄的影響[D];復旦大學;2013年

2 徐鵬;醋酸阿比特龍治療轉(zhuǎn)移去勢抵抗性前列腺癌早期療效和安全性評價[D];吉林大學;2016年

3 郭廣柱;3- (4-氟苯基)-1H-吡唑類雄激素受體拮抗劑的合成及其活性評價[D];山東大學;2016年

4 陳立黎;雌、雄激素對羅非魚性別分化和性腺基因表達的影響[D];西南大學;2016年

5 吳萬明;雄激素受體在乳腺癌中的表達及意義[D];暨南大學;2016年

6 馬一鳴;雄激素受體在周期性機械牽拉調(diào)控骨骼肌C2C12細胞增殖中的作用及機制[D];上海體育學院;2016年

7 李光磊;前列腺癌相關成纖維細胞中雄激素受體促進前列腺癌生長及侵襲轉(zhuǎn)移能力的研究[D];濱州醫(yī)學院;2015年

8 何根業(yè);選擇性雄激素受體調(diào)節(jié)劑（SARMs）檢測方法的建立及應用[D];北京體育大學;2015年

9 肖澤文;雄激素受體剪切變異體7在前列腺癌去勢抵抗中的實驗研究[D];南昌大學;2016年

10 吳淑芬;再生障礙性貧血患者雄激素和雄激素受體的改變及其意義[D];山西醫(yī)科大學;2004年

  本文關鍵詞：雄激素受體剪切變異體7在前列腺癌去勢抵抗中的實驗研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：435801