目的:檢測有絲分裂誘導(dǎo)基因6(MIG-6)在正常胃黏膜上皮細(xì)胞與胃癌細(xì)胞株、胃癌組織與癌旁組織中的表達(dá)差異,探索其在胃癌細(xì)胞遷移、增殖中的作用及其分子機(jī)制,為胃癌的分子靶向治療提供新的思路和理論依據(jù)。方法:采用免疫組織化學(xué)和熒光定量PCR的方法,檢測胃癌組織和配對的癌旁組織中的MIG-6 mRNA和蛋白的表達(dá)差異;Western blot的方法檢測正常的胃粘膜上皮細(xì)胞以及胃癌細(xì)胞株中的MIG-6表達(dá)差異。運(yùn)用RNA干擾技術(shù)(RNAi)、Western blot方法探討MIG-6表達(dá)被抑制后對EMT相關(guān)基因(E-cadherin、N-cadherin、snail、vimentin)等表達(dá)的影響;并通過CCK-8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、Transwell遷移實(shí)驗(yàn)觀察沉默MIG-6后對胃癌細(xì)胞增殖及遷移能力的影響。采用基因過表達(dá)技術(shù)構(gòu)建MIG-6的過表達(dá)質(zhì)粒,并轉(zhuǎn)染至BGC-823胃癌細(xì)胞株,觀察EMT相關(guān)基因表達(dá)情況及其過表達(dá)后對細(xì)胞增殖和遷移的影響。結(jié)果:免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示,MIG-6在胃癌組織中表達(dá)量高于相配對的癌旁組織;熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果及ONCOMINE數(shù)據(jù)庫數(shù)據(jù)分析...

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.1免疫組織化學(xué)(IHC)檢測胃癌和癌旁組織中MIG-6蛋白表達(dá)及定位

.2MIG-6mRNA在胃癌組織以及癌旁組織中的表達(dá)情況采用qPCR的方法檢測了43對胃癌組織和癌旁組織中MIG-6mRNA表達(dá)的異，以GAPDH為內(nèi)參基因。數(shù)據(jù)處理后的結(jié)果顯示，MIG-6mRNA在胃癌織中表達(dá)量高于相對應(yīng)的癌旁組織有28對，約占....

圖3.3實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測胃癌和癌旁組織MIG-6mRNA的表達(dá)

3.3.3ONCOMINE數(shù)據(jù)庫分析MIG-6mRNA在臨床組織標(biāo)本的表達(dá)情況為進(jìn)一步分析MIG-6mRNA在胃癌組織和癌旁組織中的表達(dá)情況，我通過ONCOMINE數(shù)據(jù)庫分析了46例癌旁組織和38例胃癌組織，結(jié)果顯示平均水平上胃癌組織中MIG-6m....

圖3.4ONCOMINE數(shù)據(jù)庫分析MIG-6mRNA在胃癌和癌旁組織中的表達(dá)情況

ONCOMINE數(shù)據(jù)庫分析MIG-6mRNA在臨床組織標(biāo)本的表達(dá)情況為進(jìn)一步分析MIG-6mRNA在胃癌組織和癌旁組織中的表達(dá)情況，我ONCOMINE數(shù)據(jù)庫分析了46例癌旁組織和38例胃癌組織，結(jié)果顯水平上胃癌組織中MIG-6mRNA的表達(dá)量高于癌....

圖4.1MIG-6在正常胃黏膜上皮細(xì)胞以及胃癌細(xì)胞株中的表達(dá)情況

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文織水平和mRNA水平的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)MIG-6在癌組織中的表達(dá)量均高于癌旁組織，初步證明MIG-6在胃癌中呈現(xiàn)高表達(dá)的情況，為進(jìn)一步探索MIG-6在胃癌中的分子機(jī)制，我們提取了正常胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1以及胃癌細(xì)胞株BG....

本文編號：3979635