目的：通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)觀察中藥單體人參皂苷Rg3、分子靶向藥物索拉非尼單藥及聯(lián)合對人肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖、凋亡、周期及PI3K/Akt信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。從分子生物學(xué)水平探討藥物作用機(jī)制,為臨床中藥與分子靶向藥物的聯(lián)合使用提供理論依據(jù)。方法：以人肝癌SMMC-7721細(xì)胞株為研究對象,PI3K/Akt通路抑制劑LY294002為陽性對照,具體實(shí)驗(yàn)方法如下:(1)通過MTT法觀察人參皂苷Rg3、索拉非尼、LY294002單藥及不同聯(lián)合方案對SMMC-7721細(xì)胞增殖抑制的情況；(2)應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測各組藥物作用后細(xì)胞凋亡及周期分布情況；(3)應(yīng)用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)法和Western blotting法檢測各組藥物作用后SMMC-7721細(xì)胞PI3K/Akt信號通路上相關(guān)蛋白(PI3K, p-PI3K、 Akt、p-Akt)的表達(dá)情況。結(jié)果：(1)MTT法顯示：PI3K/Akt通路抑制劑LY294002單藥可以有效抑制人肝癌SMMC-7721細(xì)胞的增殖,并呈時間、劑量依賴性。適宜濃度的人參皂苷Rg3、索拉非尼、LY294002單藥及不同聯(lián)合方案均能有效抑制人肝癌SMMC-...

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 理論研究
    1 中醫(yī)學(xué)對肝癌的研究進(jìn)展
        1.1 肝癌的病名沿革
        1.2 肝癌的病因病機(jī)
    2 PI3K/Akt信號通路概述
        2.1 PI3K/Akt信號通路的組成
        2.2 PI3K/Akt信號通路的傳導(dǎo)與調(diào)節(jié)
    3 PI3K/Akt信號通路在肝癌中的研究進(jìn)展
        3.1 PI3K/Akt信號通路與肝癌的發(fā)生發(fā)展
            3.1.1 PI3K/Akt信號通路與肝癌細(xì)胞的凋亡
            3.1.2 PI3K/Akt信號通路與肝癌細(xì)胞的周期
            3.1.3 PBK/Akt信號通路與肝癌的侵襲轉(zhuǎn)移
            3.1.4 PI3K/Akt信號通路與肝癌的血管生成
        3.2 PI3K/Akt信號通路與肝癌的治療
            3.2.1 PI3K/Akt信號通路與肝癌的化療耐藥
            3.2.2 PI3K/Akt信號通路與肝癌的放療
        3.3 PI3K/Akt信號通路抑制劑與肝癌
    4 總結(jié)
第二部分 人參皂苷Rg3、索拉非尼單藥及聯(lián)合對肝癌細(xì)胞PI3K/Akt信號通路影響的實(shí)驗(yàn)研究
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1 MTT法觀察人參皂苷Rg3、索拉非尼、LY294002單藥及聯(lián)合對SMMC-7721細(xì)胞增殖抑制的情況
        2.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測藥物作用后各組SMMC-7721細(xì)胞凋亡情況
        2.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測藥物作用后各組SMMC-7721細(xì)胞周期分布情況
        2.4 免疫熒光細(xì)胞化學(xué)法檢測各組SMMC-7721細(xì)胞PI3K/Akt信號通路上相關(guān)蛋白(PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt)的表達(dá)情況
        2.5 Western blotting法檢測各組SMMC-7721細(xì)胞PI3K/Akt信號通路上相關(guān)蛋白(PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt)的表達(dá)情況
第三部分 討論
    1 人參皂苷Rg3、索拉非尼單藥及聯(lián)合對人肝癌SMMC-7721細(xì)胞的增殖抑制作用
    2 人參皂苷Rg3、索拉非尼單藥及聯(lián)合對人肝癌SMMC-7721細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡及周期阻滯作用
    3 人參皂苷Rg3、索拉非尼單藥及聯(lián)合對人肝癌SMMC-7721細(xì)胞PI3K/Akt信號通路的影響
    4 不足與展望
第四部分 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果
致謝



本文編號：3895989