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MiR-182對惡性胸膜間皮瘤細胞活力、增殖及侵襲能力的影響及機制

發(fā)布時間:2024-02-06 22:36
  目的:探討Mi R-182對惡性胸膜間皮瘤(malignant pleural mesothelioma,MPM)細胞中的生物學行為的影響及作用機制。方法:構(gòu)建人mi R-182的類似物mi R-182 mimic及對照NC-mimic。將人間皮瘤細胞NCI-H2452分為如下三組:Control組(不轉(zhuǎn)染),NC-mimic組(NC-mimic轉(zhuǎn)染組),mi R-182 mimic組(mi R-182 mimic轉(zhuǎn)染組)。然后,RT-PCR測定各組細胞mi R-182的表達,MTT法評估細胞的活力,流式檢測細胞的增殖、凋亡情況,而Transwell檢測侵襲能力。此外,熒光素酶報告實驗及Western blot實驗明確下游靶分子。結(jié)果:mi R-182 mimic組中mi R-182的表達顯著高于Control組及NC-mimic組(P<0.001)。mi R-182 mimic組的細胞活力與增殖較Control組及NC-mimic組顯著升高。此外,mi R-182 mimic組穿過Transwell小室的細胞數(shù)明顯增加(P<0.01)。雙熒光素酶報告實驗表明mi R-18...

【文章頁數(shù)】:43 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.RT-PCR檢測各組細胞中miR-182的表達

圖1.RT-PCR檢測各組細胞中miR-182的表達

實驗結(jié)果7實驗結(jié)果1miR-182mimic可上調(diào)miR-182的表達在MPM細胞系NCI-H2452轉(zhuǎn)染miR-182mimic24h后,miR-182mimic組miR-182的表達顯著高于對照組(圖1,P<0.001),而NCmimic、Control兩對照組間無差異。這提....


圖2.miR-182mimic對NCI-H2452活力的影響

圖2.miR-182mimic對NCI-H2452活力的影響

青島大學碩士學位論文82高表達miR-182對NCI-H2452活力的影響為明確miR-182對NCI-H2452活力的作用,轉(zhuǎn)染miR-182mimic或NC-mimic48h并行MTT實驗。MTT結(jié)果顯示,miR-182mimic組的細胞活力顯著高于對照組(圖2,P<0.00....


圖3.流式法檢測各組細胞的周期分布

圖3.流式法檢測各組細胞的周期分布

實驗結(jié)果93高表達miR-182促進NCI-H2452的增殖細胞增殖、分裂往往伴隨細胞周期的改變,而細胞周期的改變亦反映細胞的增殖情況,為明確miR-182對NCI-H2452細胞增殖及周期分布的影響,我們待細胞轉(zhuǎn)染48h后,采用流式進行了周期檢測。細胞周期檢測顯示,miR-18....


圖4.流式檢測細胞的凋亡

圖4.流式檢測細胞的凋亡

青島大學碩士學位論文104高表達miR-182對細胞凋亡的影響凋亡抵抗是包括胸膜間皮瘤在內(nèi)多種腫瘤的重要細胞病理改變,為評估m(xù)iR-182對NCI-H2452凋亡的影響,我們對干預后的細胞進行AnnexinⅤ-FITC和PI雙重染色,并流式上機檢測。流式檢測結(jié)果示:miR-182....



本文編號:3896306

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