目的:探討Mi R-182對惡性胸膜間皮瘤(malignant pleural mesothelioma,MPM)細(xì)胞中的生物學(xué)行為的影響及作用機(jī)制。方法:構(gòu)建人mi R-182的類似物mi R-182 mimic及對照NC-mimic。將人間皮瘤細(xì)胞NCI-H2452分為如下三組:Control組(不轉(zhuǎn)染),NC-mimic組(NC-mimic轉(zhuǎn)染組),mi R-182 mimic組(mi R-182 mimic轉(zhuǎn)染組)。然后,RT-PCR測定各組細(xì)胞mi R-182的表達(dá),MTT法評估細(xì)胞的活力,流式檢測細(xì)胞的增殖、凋亡情況,而Transwell檢測侵襲能力。此外,熒光素酶報告實(shí)驗(yàn)及Western blot實(shí)驗(yàn)明確下游靶分子。結(jié)果:mi R-182 mimic組中mi R-182的表達(dá)顯著高于Control組及NC-mimic組(P<0.001)。mi R-182 mimic組的細(xì)胞活力與增殖較Control組及NC-mimic組顯著升高。此外,mi R-182 mimic組穿過Transwell小室的細(xì)胞數(shù)明顯增加(P<0.01)。雙熒光素酶報告實(shí)驗(yàn)表明mi R-18...

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.RT-PCR檢測各組細(xì)胞中miR-182的表達(dá)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果7實(shí)驗(yàn)結(jié)果1miR-182mimic可上調(diào)miR-182的表達(dá)在MPM細(xì)胞系NCI-H2452轉(zhuǎn)染miR-182mimic24h后，miR-182mimic組miR-182的表達(dá)顯著高于對照組(圖1，P＜0.001)，而NCmimic、Control兩對照組間無差異。這提....

圖2.miR-182mimic對NCI-H2452活力的影響

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文82高表達(dá)miR-182對NCI-H2452活力的影響為明確miR-182對NCI-H2452活力的作用，轉(zhuǎn)染miR-182mimic或NC-mimic48h并行MTT實(shí)驗(yàn)。MTT結(jié)果顯示，miR-182mimic組的細(xì)胞活力顯著高于對照組(圖2，P＜0.00....

圖3.流式法檢測各組細(xì)胞的周期分布

實(shí)驗(yàn)結(jié)果93高表達(dá)miR-182促進(jìn)NCI-H2452的增殖細(xì)胞增殖、分裂往往伴隨細(xì)胞周期的改變，而細(xì)胞周期的改變亦反映細(xì)胞的增殖情況，為明確miR-182對NCI-H2452細(xì)胞增殖及周期分布的影響，我們待細(xì)胞轉(zhuǎn)染48h后，采用流式進(jìn)行了周期檢測。細(xì)胞周期檢測顯示，miR-18....

圖4.流式檢測細(xì)胞的凋亡

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文104高表達(dá)miR-182對細(xì)胞凋亡的影響凋亡抵抗是包括胸膜間皮瘤在內(nèi)多種腫瘤的重要細(xì)胞病理改變，為評估m(xù)iR-182對NCI-H2452凋亡的影響，我們對干預(yù)后的細(xì)胞進(jìn)行AnnexinⅤ-FITC和PI雙重染色，并流式上機(jī)檢測。流式檢測結(jié)果示：miR-182....

本文編號：3896306