目的:肺癌是呼吸系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤,其發(fā)病率和死亡率在各系統(tǒng)腫瘤中均局首位。目前的研究認(rèn)為,肺癌的發(fā)生不僅與細(xì)胞中異常啟動(dòng)的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移等有關(guān)的信號(hào)通路有關(guān),更與端粒酶活性的異常升高有著千絲萬(wàn)縷的聯(lián)系。因此,全面理解肺癌細(xì)胞中端粒酶活性的調(diào)控機(jī)制,可為開(kāi)發(fā)全新的腫瘤靶向藥物提供方向,為臨床診療提供新的思路。人乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)是一種小DNA病毒,大量流行病學(xué)證據(jù)表明人類多種良惡性疾病與HPV的感染有著密不可分的關(guān)系,而長(zhǎng)期持續(xù)性的高危型HPV感染可能誘發(fā)宮頸癌。HPV16是常見(jiàn)的高危型HPV,E6/E7是HPV16的兩個(gè)主要致病癌蛋白,目前認(rèn)為HPV16與非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)的發(fā)生密切相關(guān),然而E6/E7在NSCLC的發(fā)生中作用機(jī)理尚不清楚。本人之前的研究發(fā)現(xiàn)E6/E7能夠引起抑癌基因LKB1的失活,而且LKB1能夠通過(guò)下調(diào)轉(zhuǎn)錄因子SP1的轉(zhuǎn)錄活性而降低端粒酶中hTERT的表達(dá)。雖然我們已經(jīng)找到了E6/E7促進(jìn)癌癥發(fā)生可能的路徑,而隱藏在此現(xiàn)象中的具體調(diào)控機(jī)制尚不清楚。我們課題組前期研究結(jié)果表明肺癌細(xì)胞中端粒酶的RNA模板hTE...

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
2 材料和方法
    2.1 患者信息和標(biāo)本
    2.2 細(xì)胞系
    2.3 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染和小干擾RNA處理
    2.4 蛋白質(zhì)免疫印跡
    2.5 Quantitativereal-timePCR
    2.6 熒光素酶報(bào)告基因
    2.7 染色質(zhì)免疫共沉淀
    2.8 熒光原位雜交
    2.9 統(tǒng)計(jì)分析
3 結(jié)果
    3.1 E6/E7,LKB1,SP1,hTERC的mRNA表達(dá)和hTERC的異型擴(kuò)增在臨床患者良惡性支氣管刷檢細(xì)胞中均有顯著差異
    3.2 肺癌患者支氣管刷檢細(xì)胞中SP1,hTERC的mRNA和hTERC的異型擴(kuò)增與E6/E7mRNA呈正相關(guān),而LKB1與E6/E7,SP1,hTERC的mRNA和hTERC的異型擴(kuò)增呈負(fù)相關(guān)
    3.3 E6/E7負(fù)向調(diào)控LKB1的表達(dá)并正向調(diào)控SP1和hTERC的表達(dá)和SP1的轉(zhuǎn)錄活性
    3.4 LKB1負(fù)向調(diào)控SP1、hTERC表達(dá)以及SP1的轉(zhuǎn)錄活性,并磷酸化SP1
    3.5 LKB1對(duì)SP1的磷酸化作用能夠以時(shí)間依賴的方式被E6/E7解除
    3.6 SP1通過(guò)與hTERC啟動(dòng)子直接結(jié)合上調(diào)hTERC的轉(zhuǎn)錄
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3781091