發(fā)布時(shí)間：2023-01-07 10:02

　　研究背景:肝癌是全世界常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一。肝細(xì)胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是由肝細(xì)胞癌變引起的一種原發(fā)性肝臟癌癥,它在原發(fā)性肝癌的組織學(xué)類型中占了很大的比重,約為90%以上,是世界上最流行的癌癥之一。HCC的發(fā)病率和死亡率在近幾年全世界地區(qū),包括中歐、拉丁美洲和北美都在增加,其發(fā)病率在全球惡性腫瘤中排在第五位,僅次于肺癌、乳腺癌、直結(jié)腸癌和胃癌,其致死率在惡性腫瘤中排在第三位。HCC的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)很復(fù)雜的過程,其發(fā)病比較隱匿,發(fā)現(xiàn)時(shí)大多都已是中晚期,侵襲性強(qiáng),大多數(shù)已經(jīng)發(fā)生了擴(kuò)散轉(zhuǎn)移,且轉(zhuǎn)移速度很快,死亡率極高,術(shù)后極易復(fù)發(fā)。谷氨酰胺（glutamine,Gln）是人類及哺乳動物血漿中含量最豐富且最重要的一種游離氨基酸,它既是正常分化的細(xì)胞所需要的能源物質(zhì),也是腫瘤細(xì)胞的重要能源物質(zhì)。研究表明Gln在肝癌細(xì)胞的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移等過程中發(fā)揮了重要的作用,因此我們研究了Gln剝奪對肝癌細(xì)胞的影響,以及Gln剝奪能否指導(dǎo)肝癌的臨床治療。研究材料和方法:本研究采用了DMEM培養(yǎng)液和無Gln的DMEM培養(yǎng)液來研究Gln剝奪對HCC活力、遷移和血管生... 

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
中英文縮略詞表
第1章 緒論
    1.1 肝癌的研究現(xiàn)狀
        1.1.1 肝癌的介紹
        1.1.2 肝癌的危險(xiǎn)因素
        1.1.3 肝癌的治療
    1.2 谷氨酰胺及其生物學(xué)功能
        1.2.1 谷氨酰胺的生物學(xué)功能
        1.2.2 谷氨酰胺的代謝
        1.2.3 谷氨酰胺代謝調(diào)控的相關(guān)基因
    1.3 谷氨酰胺與腫瘤
        1.3.1 谷氨酰胺酶與腫瘤
        1.3.2 谷氨酰胺在腫瘤中的代謝
        1.3.3 谷氨酰胺與腫瘤治療
第2章 肝癌細(xì)胞谷氨酰胺剝奪誘導(dǎo)血管生成的研究
    2.1 實(shí)驗(yàn)儀器和材料
        2.1.1 主要儀器
        2.1.2 主要試劑和耗材
        2.1.3 主要試劑配制
        2.1.4 細(xì)胞來源
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞的傳代、凍存、復(fù)蘇
        2.2.2 MTT法
        2.2.3 克隆形成實(shí)驗(yàn)
        2.2.4 劃痕實(shí)驗(yàn)
        2.2.5 Transwell實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 血管形成實(shí)驗(yàn)
    2.3 數(shù)據(jù)處理
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 谷氨酰胺剝奪降低肝癌細(xì)胞HepG2和HCCC-9810的活力
        2.4.2 谷氨酰胺剝奪促進(jìn)肝癌細(xì)胞HepG2和HCCC-9810的遷移
        2.4.3 谷氨酰胺剝奪促進(jìn)肝癌細(xì)胞HepG2和HCCC-9810的侵襲
        2.4.4 無谷氨酰胺的條件培養(yǎng)液能夠增加人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC的活力
        2.4.5 無谷氨酰胺的條件培養(yǎng)液能夠促進(jìn)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC的血管生成
    2.5 討論
第3章 谷氨酰胺剝奪誘導(dǎo)血管生成的機(jī)理研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)儀器和材料
        3.1.1 主要儀器
        3.1.2 主要試劑和耗材
        3.1.3 主要試劑配制
        3.1.4 細(xì)胞來源
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 ELISA實(shí)驗(yàn)
        3.2.2 qRT-PCR
        3.2.3 WesternBlot
        3.2.4 果糖-6-磷酸激酶(PFK)活性測定
        3.2.5 乳酸脫氫酶(LDH)活性測定
        3.2.6 己糖激酶(HK)活性測定
    3.3 數(shù)據(jù)處理
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 谷氨酰胺剝奪能夠使肝癌細(xì)胞HepG2和HCCC-9810VEGF的水平升高
        3.4.2 谷氨酰胺剝奪能夠促進(jìn)肝癌細(xì)胞HepG2和HCCC-9810中HIF-1α和VEGF的mRNA的表達(dá)
        3.4.3 谷氨酰胺剝奪能夠促進(jìn)肝癌細(xì)胞HepG2和HCCC-9810中HIF-1α和VEGF的蛋白表達(dá)
        3.4.4 谷氨酰胺剝奪能夠促進(jìn)肝癌細(xì)胞HepG2和HCCC-9810中PI3K、AKT蛋白表達(dá)
        3.4.5 谷氨酰胺剝奪能夠促進(jìn)肝癌細(xì)胞HepG2和HCCC-9810中糖酵解相關(guān)酶的mRNA表達(dá)
        3.4.6 谷氨酰胺剝奪能夠提高肝癌細(xì)胞HepG2和HCCC-9810中糖酵解相關(guān)酶的活力
        3.4.7 谷氨酰胺剝奪時(shí)抑制糖酵解會抑制血管生成
    3.5 討論
第4章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]谷氨酰胺對斷奶仔豬免疫應(yīng)激調(diào)節(jié)作用及其分子機(jī)制的研究[D]. 王麗.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]去甲腎上腺素介導(dǎo)的β-腎上腺素能受體活化通過激活ERK1/2/CREB和PI3K/PDK1/AKT信號通路促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖[D]. 何晶晶.南昌大學(xué) 2017
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本文編號：3728428