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基于免疫磁分離和酶催化放大的腫瘤標(biāo)志物生物傳感器的構(gòu)建和應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2022-11-05 11:34
  近年來(lái)腫瘤性疾病嚴(yán)重威脅著人類的身體健康,腫瘤標(biāo)志物的快速、高靈敏檢測(cè)對(duì)疾病的早期診斷有著重要的意義。然而,目前腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)方法存在操作繁瑣、靈敏度低、需要昂貴的試劑及儀器等缺陷。因此,開(kāi)發(fā)一些簡(jiǎn)單、不需要復(fù)雜儀器且靈敏度高的腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)方法具有重要的意義。液晶生物傳感器以液晶作為信號(hào)轉(zhuǎn)換元件,可以通過(guò)液晶光學(xué)圖像豐富的織構(gòu)變化來(lái)實(shí)現(xiàn)目標(biāo)物的可視化檢測(cè),該方法與其他檢測(cè)技術(shù)相比,具有成本低、操作簡(jiǎn)單快捷、無(wú)需特殊儀器設(shè)備和光源、易于實(shí)現(xiàn)微型化等優(yōu)點(diǎn)。然而,目前科研工作者構(gòu)建的液晶生物傳感器普遍存在靈敏度偏低、抗干擾能力弱的缺點(diǎn),難以滿足現(xiàn)代分析技術(shù)的要求。基于磁球的免疫分析方法,不僅可以通過(guò)提高信號(hào)分子的固載量來(lái)實(shí)現(xiàn)高靈敏檢測(cè),還可以簡(jiǎn)化樣品的前處理過(guò)程、縮短免疫反應(yīng)時(shí)間、提高傳感器的抗干擾能力。因此,為了適應(yīng)臨床診斷的需求,我們結(jié)合免疫磁分離和各種信號(hào)放大策略,采用液晶生物傳感等高靈敏的檢測(cè)方法,建立了幾種靈敏度高、抗干擾能力強(qiáng),且不需要復(fù)雜儀器的免疫分析方法,并將其應(yīng)用于腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè),主要包括以下幾部分:1.基于納米金誘導(dǎo)銀沉積反應(yīng)與酶促金屬化信號(hào)放大策略,我們構(gòu)建了一種... 

【文章頁(yè)數(shù)】:91 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 前言
    1.2 腫瘤標(biāo)志物的概述
        1.2.1 常見(jiàn)的腫瘤標(biāo)志物
        1.2.2 腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)方法
    1.3 免疫磁分離技術(shù)
        1.3.1 磁性納米材料
        1.3.2 免疫分析
        1.3.3 基于磁球的免疫分析方法
    1.4 液晶生物傳感器
        1.4.1 液晶生物傳感器的檢測(cè)原理
        1.4.2 液晶生物傳感器的研究現(xiàn)狀
        1.4.3 液晶生物傳感器信號(hào)放大策略
    1.5 化學(xué)發(fā)光免疫傳感器的概述
    1.6 本論文的出發(fā)點(diǎn)與主要工作
第二章 基于免疫磁分離和酶促金屬化的液晶生物傳感器
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
        2.2.2 潔凈玻片的處理
        2.2.3 玻片基底膜的修飾
        2.2.4 納米金修飾的玻片基底的制備
        2.2.5 ALP的檢測(cè)
        2.2.6 CEA的檢測(cè)步驟
    2.3 結(jié)果討論
        2.3.1 基底表面的表征
        2.3.2 基于液晶生物傳感器檢測(cè)ALP的原理
        2.3.3 玻片基底修飾條件的優(yōu)化
        2.3.4 基于液晶生物傳感器檢測(cè)ALP的反應(yīng)機(jī)理探討
        2.3.5 ALP的檢測(cè)
        2.3.6 基于磁球的液晶免疫傳感器檢測(cè)CEA
    2.4 結(jié)論
第三章 基于免疫磁分離和酶催化放大的癌胚抗原化學(xué)發(fā)光免疫傳感器
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 試劑與儀器
        3.2.2 免疫磁球和生物素化CEA抗體的制備
        3.2.3 CEA的檢測(cè)過(guò)程
        3.2.4 特異性和抗干擾實(shí)驗(yàn)
        3.2.5 血清樣品中CEA的檢測(cè)
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 化學(xué)發(fā)光免疫傳感器檢測(cè)CEA的原理
        3.3.2 磁球的表征
        3.3.3 方法的可行性分析
        3.3.4 CEA檢測(cè)條件的優(yōu)化
        3.3.5 方法的分析性能
        3.3.6 檢測(cè)方法的放大性能
        3.3.7 化學(xué)發(fā)光免疫傳感器的特異性
        3.3.8 血清樣品中CEA的檢測(cè)
    3.4 結(jié)論
第四章 基于目標(biāo)誘導(dǎo)銀沉積的可視化檢測(cè)方法的構(gòu)建及其應(yīng)用
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 儀器與試劑
        4.2.2 以谷胱甘肽為配體的納米金的合成
        4.2.3 AA的檢測(cè)
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 納米金合成條件的優(yōu)化
        4.3.2 納米金的表征
        4.3.3 納米金的膠體穩(wěn)定性
        4.3.4 基于目標(biāo)誘導(dǎo)銀沉積的可視化檢測(cè)原理
        4.3.5 方法的性能分析
    4.4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄:攻讀碩士期間已發(fā)表和待發(fā)表的科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Facile synthesis of enzyme functional metal-organic framework for colorimetric detecting H2O2 and ascorbic acid[J]. Cunji Gao,Hongmei Zhu,Jia Chen,Hongdeng Qiu.  Chinese Chemical Letters. 2017(05)
[2]Portable System for Rapid Field Test of CEA in Human Serum Based on Chemiluminescence Enzyme Immunoassay[J]. LIU Juntao,QU Shuxue,LUO Jinping,WANG Bin,CAI Xinxia.  Chinese Journal of Electronics. 2017(01)
[3]陣列紙芯片比色法檢測(cè)堿性磷酸酶[J]. 陳熙,陳錦,張慧妍,汪付兵,王方方,吉邢虎,何治柯.  分析化學(xué). 2016(04)
[4]以pH敏感相分離高分子為載體的酶聯(lián)熒光免疫分析法測(cè)定人IgG[J]. 林鵬,鄭洪,楊黃浩,楊薇,張長(zhǎng)弓,許金鉤.  高等學(xué);瘜W(xué)學(xué)報(bào). 2003(07)



本文編號(hào):3702526

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