本文關鍵詞：胃癌及轉移淋巴結中Pokemon表達與腫瘤耐藥關系的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:作為國內最常見消化系統(tǒng)惡性腫瘤中的一種,胃癌早期發(fā)現(xiàn)的不易導致臨床病例往往處于進展期,伴有局部或遠處轉移,影響預后�；煴患{入挽救胃癌病人生命有效療法,可是多藥耐藥(multidrug resistance,MDR)致使部分病例失去療效,為造成較高死亡率眾因素之一。MDR為腫瘤細胞對某一特定藥物及其他分子布局、起效途徑不同的化療藥均表現(xiàn)耐藥。它包括原發(fā)性和繼發(fā)性耐藥,前者指在化療開始即對多種藥物不敏感;后者指在開始化療時有良好效果,接受一段時間的用藥后對所用藥物出現(xiàn)耐藥性。MDR產(chǎn)生的機制復雜,是多基因、多途徑綜合調控的結果。Pokemon(POK erythroid myeloid ontogenic factor),POK紅系髓性致癌因子,屬于轉錄抑制因子POK家族,在胚胎生長、分化及癌形成歷程起重要影響。研究表明Pokemon既能調控腫瘤細胞生長,還能通過多種機制對某些癌基因和抑癌基因進行調控,從而被稱為腫瘤總開關。目前雖有資料表明Pokemon與多種惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展息息相關,但對它是否參與腫瘤多藥耐藥并不肯定。本課題以胃癌及相應轉移淋巴結為研究對象,采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應(quantitative real-time polymerase chain reaction,q PCR)以及免疫組織化學鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(streptavidin-perosidase,SP)法檢測Pokemon及四種腫瘤耐藥相關因子mRNA及蛋白表達情況,并行噻唑藍[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]藥敏性實驗,探索Pokemon與腫瘤耐藥相關蛋白以及Pokemon與化療藥敏性的關系,為臨床治療提供新的理論基礎。方法:取40例進展期胃癌病人原發(fā)灶及對應轉移淋巴結新鮮標本,采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應和免疫組織化學SP法檢驗Pokemon在原發(fā)灶及轉移淋巴結的表達;選取免疫組化SP法檢驗胃癌原發(fā)灶與轉移淋巴結中P-糖蛋白(p-glycoprotein,P-gp)、多藥耐藥相關蛋白-1(multidrug resistance associated protein-1,MRP-1)、谷胱甘肽-S-轉移酶-π(glutathione-S-transferase-π,GST-π)、胸苷酸合酶(thymidylatesynthase,TS)的表達;采用mtt法檢測5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-fu)、長春新堿(vincristine,VCR)、紫杉醇(paclitaxel,PTX)、奧沙利鉑(OXAliplatin,OXA)影響胃癌原發(fā)灶與轉移淋巴結細胞體外抑制情況;分析Pokemon和腫瘤耐藥相關因子以及Pokemon和化療藥敏性之間聯(lián)系。全部數(shù)據(jù)使用SPSS 19.0軟件解析,P0.05具統(tǒng)計學意義。結果:1 胃癌及轉移淋巴結中Pokemon的表達免疫組織化學結果顯示,Pokemon蛋白在胃癌原發(fā)灶和轉移淋巴結高表達率分別是65%、70%,此差別無顯著性(P0.05)。相關性分析表明,Pokemon蛋白于胃癌原發(fā)灶與淋巴結兩部位間表達無明顯相關性(r=-0.128,P0.05)。熒光定量pcr結果顯示胃癌原發(fā)灶和轉移淋巴結里Pokemon mRNA相對表達量分別是0.196±0.375、0.098±0.071,經(jīng)wilcoxon符號秩檢驗,差異無統(tǒng)計學意義(Z=-0.282,P=0.778)。經(jīng)相關分析,Pokemonmrna表達于胃癌原發(fā)灶和轉移淋巴結兩部位間沒有明顯相關關系(r=0.077,P=0.637)。2 胃癌及轉移淋巴結中P-gp、MRP-1、GST-π、TS蛋白的表達免疫組化結果表明,P-gp、MRP-1和TS蛋白在轉移淋巴結表達顯著高于胃癌原發(fā)灶(82.5%vs57.5%,75%vs55%,72.5%vs52.5%,均P0.05);轉移淋巴結、原發(fā)灶gst-π蛋白表達強度沒有顯著區(qū)別(72.5%vs65%,P0.05)。相關分析表明P-gp、MRP-1于胃癌原發(fā)灶、轉移淋巴結兩部位間表達分別具有正相關關系(r=0.332,r=0.427,均P0.05)。3 胃癌及轉移淋巴結中Pokemon與P-gp、MRP-1、gst-π、TS的相關性經(jīng)相關性檢測,在胃癌組織,Pokemon分別同P-gp、MRP-1、TS的表達呈現(xiàn)正相關性(r=0.399,r=0.428,r=0.508,均p0.05);在轉移淋巴結,Pokemon與P-gp、MRP-1之間的表達均具有正相關性(r=0.325,r=0.326,均p0.05)。4 胃癌及轉移淋巴結細胞對5-fu、VCR、PTX、OXA化療藥物敏感性比較VCR、OXA作用轉移淋巴結細胞的抑制率顯著小于原發(fā)灶(t=2.056,t=2.481,均P0.05),5-fu、PTX作用于這兩種細胞時抑制率無顯著差異(P0.05)。5 胃癌及轉移淋巴結細胞中Pokemon表達與化療藥敏性關系在原發(fā)灶中,VCR、PTX作用Pokemon高表達組腫瘤細胞時抑制率顯著小于低表達組(t=2.417,t=3.281,均P0.05);而轉移淋巴結,5-Fu、VCR、OXA作用Pokemon高表達組腫瘤細胞時抑制率顯著小于低表達組(t=2.071,t=2.220,t=2.558,均P0.05)。結論:1 Pokemon于胃癌原發(fā)灶與轉移淋巴結都存在較高陽性表達率,啟示Pokemon可能參與了胃癌侵襲轉移,可以作為基因治療的靶點;Pokemon于胃癌原發(fā)灶與轉移淋巴結的表達間沒有相關關系,提示Pokemon在胃癌原發(fā)灶與轉移淋巴結發(fā)揮的作用不同,無明顯規(guī)律性。2 P-gp、MRP-1、GST-π、TS于胃癌癌組織與轉移淋巴結都存在較高的高表達率,提示與胃癌原發(fā)性耐藥形成存在某種聯(lián)系;P-gp、MRP-1和TS蛋白在轉移淋巴結的表達比原發(fā)灶高,表明胃癌原發(fā)灶和轉移淋巴結存在耐藥性差別,轉移淋巴結可能更具耐藥性。3在胃癌原發(fā)灶和轉移淋巴結,Pokemon分別與P-gp、MRP-1表達間存在正相關關系,提示Pokemon通過某種機制可以調控P-gp、MRP-1表達,參與了胃癌原發(fā)性多藥耐藥;Pokemon與TS的表達在胃癌原發(fā)灶具有正相關性而在淋巴結無相關性,提示Pokemon可能參與了對TS的調控,但出現(xiàn)了異質性改變。4 Pokemon表達僅影響部分化療藥物的敏感程度,提示胃癌多藥耐藥是多因素網(wǎng)絡化作用結果。
【關鍵詞】：胃癌 轉移淋巴結 Pokemon 多藥耐藥相關因子 化療藥敏性
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-11
• 前言11-12
• 材料與方法12-19
• 結果19-21
• 附圖21-27
• 附表27-30
• 討論30-35
• 結論35-36
• 參考文獻36-39
• 綜述 Pokemon與惡性腫瘤的關系39-58
• 參考文獻53-58
• 致謝58-59
• 個人簡歷59

【參考文獻】

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本文編號：335432