Nrf2對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖、侵襲、遷移等作用的研究
發(fā)布時(shí)間:2017-04-28 16:25
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【摘要】:目的:研究Nrf2、Keap1在宮頸癌組織中的表達(dá)以及對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖、遷移、侵襲和凋亡的作用。方法:1.免疫組織化學(xué)法檢測(cè)89例宮頸癌,46例CINⅡ-Ⅲ組織及66例正常宮頸組織中Nrf2和Keap1蛋白的表達(dá),分析其相關(guān)性及臨床意義;2.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)宮頸癌HeLa,SiHa,C33a細(xì)胞中mRNA本底表達(dá);3.構(gòu)建Nrf2過表達(dá)質(zhì)粒,上調(diào)C33a細(xì)胞中Nrf2表達(dá),RNA干擾技術(shù)特異性沉默SiHa細(xì)胞中Nrf2表達(dá),并通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)染后mRNA和蛋白水平的變化,Transwell小室實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞技術(shù)分析Nrf2對(duì)宮頸癌細(xì)胞遷移、侵襲、增殖和凋亡的影響。結(jié)果:1.宮頸癌組織中Nrf2的表達(dá)明顯高于CIN和正常宮頸組織(P0.05),Keap1在宮頸癌組織的表達(dá)顯著低于CIN和正常宮頸組織(P0.05),Nrf2的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤組織分化程度及臨床分期有關(guān)(P0.05);2.HeLa、SiHa、C33a宮頸癌細(xì)胞株中Nrf2 mRNA存在不同程度過表達(dá);3.上調(diào)Nrf2的表達(dá)后,mRNA和蛋白水平的表達(dá)均上調(diào),并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲和遷移,對(duì)細(xì)胞凋亡無明顯影響(P0.05)。下調(diào)Nrf2的表達(dá)后,mRNA和蛋白水平的表達(dá)均下調(diào),并抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移,促進(jìn)細(xì)胞凋亡(P0.01)。結(jié)論:1.Nrf2蛋白在宮頸癌組織和細(xì)胞中高表達(dá),Nrf2蛋白的表達(dá)與Keap1表達(dá)密切相關(guān)。2.上調(diào)Nrf2促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲,但對(duì)細(xì)胞的凋亡無影響。
【關(guān)鍵詞】:宮頸癌 Nrf2 Keap1 氧化應(yīng)激
【學(xué)位授予單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R737.33
【目錄】:
- 中英文縮略詞對(duì)照表6-11
- 摘要11-12
- ABSTRACT12-13
- 前言13-15
- 研究?jī)?nèi)容與方法15-32
- 1. 研究對(duì)象15-18
- 1.1 組織及細(xì)胞株來源15
- 1.2 PCR引物和質(zhì)粒信息15-16
- 1.3 主要試劑16-17
- 1.4 主要設(shè)備17-18
- 1.5 實(shí)驗(yàn)相關(guān)溶液配制18
- 2. 內(nèi)容和方法18-30
- 2.1 免疫組織化學(xué)方法18-20
- 2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染及轉(zhuǎn)染后鑒定20-27
- 2.3 轉(zhuǎn)染后細(xì)胞生物學(xué)功能檢測(cè)27-30
- 3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理30-31
- 4. 技術(shù)路線圖31-32
- 結(jié)果32-47
- 討論47-53
- 小結(jié)53-54
- 致謝54-55
- 參考文獻(xiàn)55-60
- 附錄60-61
- 綜述61-69
- 參考文獻(xiàn)65-69
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)位論文69
【相似文獻(xiàn)】
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4 馮理達(dá);錢菊卿;陳淑琴;張s
本文編號(hào):333132
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