本論文設(shè)計合成了兩個新型咔唑衍生物1和2,利用多種實(shí)驗方法深入研究了1和2與DNA的相互作用、HepG2細(xì)胞成像及活性,并得到了以下實(shí)驗結(jié)果:(1)以9-乙基-3-甲酰基咔唑為起始原料分別經(jīng)一步和兩步反應(yīng)得到目標(biāo)化合物1和2,用¹H-NMR、¹³C-NMR和HRMS對其進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征。(2)紫外可見吸收滴定和FID實(shí)驗結(jié)果表明,相對于雙鏈DNA和i-motif來說,化合物1和2都能選擇性的優(yōu)先與G-四鏈體DNA結(jié)合,而且化合物1與所有DNA的結(jié)合能力強(qiáng)于2的;Job Plot實(shí)驗結(jié)果表明,化合物1和2與bcl-2的結(jié)合計量比均為1.5:1,與其他G-四鏈體DNA的結(jié)合計量比為2:1,1與i-motif的結(jié)合計量比為2:1,盡管未能準(zhǔn)確測試2與i-motif的結(jié)合計量比;CD實(shí)驗結(jié)果證明了化合物1和2的結(jié)合不會顯著影響DNA的二級結(jié)構(gòu);熒光壽命和熒光滴定實(shí)驗都說明了化合物1和2可以和DNA相互作用,而且化合物1可作為雙鏈DNA探針分子,而化合物2是潛在的G-四鏈體熒光探針。(3)MTT和細(xì)胞形態(tài)實(shí)驗表明,化合物1和2都能抑制HepG2細(xì)胞增殖,...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英文縮略表
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 四鏈體DNA的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
        1.2.1 不同G-四鏈體DNA的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
            1.2.1.1 bcl-2G-四鏈體的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
            1.2.1.2 c-mycG-四鏈體的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
            1.2.1.3 c-kitG-四鏈體的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
            1.2.1.4 端粒G-四鏈體的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
        1.2.2 I-motif四鏈體DNA的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
    1.3 G-四鏈體DNA熒光探針的研究進(jìn)展
    1.4 咔唑衍生物與G-四鏈體DNA相互作用的研究進(jìn)展
    1.5 本論文的設(shè)計思路和研究內(nèi)容
        1.5.1 設(shè)計思路
        1.5.2 研究內(nèi)容
第二章 咔唑衍生物的合成及結(jié)構(gòu)表征
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗材料及儀器
        2.2.1 實(shí)驗材料
        2.2.2 實(shí)驗儀器
    2.3 咔唑衍生物1和2的合成路線
    2.4 咔唑衍生物1和2的合成及表征
        2.4.1 咔唑衍生物1的合成及表征
        2.4.2 咔唑衍生物2的合成及表征
    2.5 小結(jié)
第三章 咔唑衍生物與不同二級結(jié)構(gòu)DNA的相互作用
    3.1 引言
    3.2 研究方法
        3.2.1 紫外可見吸收光譜
        3.2.2 等摩爾連續(xù)變化分析
        3.2.3 熒光指示劑TO置換(FID)
        3.2.4 熒光共振能量轉(zhuǎn)移熔點(diǎn)技術(shù)(FRET-melting)
        3.2.5 圓二色譜(CD)
        3.2.6 熒光光譜
        3.2.7 熒光壽命
    3.3 實(shí)驗試劑及儀器
        3.3.1 實(shí)驗試劑
        3.3.2 實(shí)驗儀器
    3.4 實(shí)驗內(nèi)容
        3.4.1 緩沖溶液及化合物儲備液的配置
        3.4.2 DNA的預(yù)處理及緩沖溶液的選擇
        3.4.3 紫外可見吸收
        3.4.4 JobPlot
        3.4.5 FID
        3.4.6 FRET熔點(diǎn)實(shí)驗
        3.4.7 CD
        3.4.8 熒光光譜
        3.4.9 熒光壽命
    3.5 實(shí)驗結(jié)果與討論
        3.5.1 紫外可見吸收
        3.5.2 JobPlot
        3.5.3 FID
        3.5.4 FRET熔點(diǎn)實(shí)驗
        3.5.5 CD
        3.5.6 熒光光譜
        3.5.7 熒光壽命
    3.6 小結(jié)
第四章 咔唑衍生物對HepG2細(xì)胞增殖影響及細(xì)胞成像研究
    4.1 引言
    4.2 研究方法
        4.2.1 MTT實(shí)驗
        4.2.2 細(xì)胞形態(tài)實(shí)驗
        4.2.3 共聚焦成像
        4.2.4 DNA酶和RNA酶消化實(shí)驗
    4.3 實(shí)驗試劑及儀器
        4.3.1 實(shí)驗試劑
        4.3.2 實(shí)驗儀器
    4.4 實(shí)驗內(nèi)容
        4.4.1 溶液的配制
        4.4.2 MTT實(shí)驗
        4.4.3 細(xì)胞形態(tài)實(shí)驗
        4.4.4 共聚焦成像
        4.4.5 DNA酶和RNA酶消化實(shí)驗
    4.5 實(shí)驗結(jié)果
        4.5.1 化合物1和2對HepG2細(xì)胞活性的影響
        4.5.2 細(xì)胞形態(tài)實(shí)驗
        4.5.3 共聚焦成像
        4.5.4 DNA酶和RNA酶消化實(shí)驗
    4.6 小結(jié)
第五章 總結(jié)與展望
    5.1 總結(jié)
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
致謝
個人簡況及聯(lián)系方式



本文編號：4002347