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從2株鏈霉菌次級代謝產(chǎn)物中尋找新化合物以及抗霉素6個組分的高速逆流分離

發(fā)布時間:2016-11-09 08:36

  本文關(guān)鍵詞:腫瘤多藥耐藥性產(chǎn)生機制及其逆轉(zhuǎn)的研究現(xiàn)狀,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


《福建醫(yī)科大學(xué)》 2011年

從2株鏈霉菌次級代謝產(chǎn)物中尋找新化合物以及抗霉素6個組分的高速逆流分離

王嬌艷  

【摘要】:微生物藥物研發(fā)是指綜合應(yīng)用現(xiàn)代分離純化及分析檢測技術(shù)從微生物次級代謝產(chǎn)物中尋找具有一定生物活性的新化合物,并將其開發(fā)成臨床藥物的過程。微生物次級代謝產(chǎn)物具有多樣性,因此,從現(xiàn)有菌株出發(fā)綜合運用各種分離純化手段,對其次級代謝產(chǎn)物進行研究,從而獲得新化合物就成為微生物研發(fā)的一個行之有效的途徑。 玫瑰孢鏈霉菌FIM99608是達托霉素的產(chǎn)生菌。本論文綜合應(yīng)用大孔樹脂柱層析以及高壓制備液相色譜技術(shù)等分離技術(shù)從其次級代謝產(chǎn)物中獲得2個不同于達托霉素及其同系物的新化合物Y和Z。通過紫外、紅外、高效液相色譜、質(zhì)譜、核磁共振波譜等現(xiàn)代波譜學(xué)技術(shù)對這2個化合物的結(jié)構(gòu)進行解析確證,證明化合物Y和Z是由6個氨基酸組成的環(huán)狀脂肽類化合物;衔颵和Z在抗細菌、抗真菌以及抗腫瘤活性試驗結(jié)果均為陰性。 鏈霉菌FIM040512是抗霉素的產(chǎn)生菌。本論文從其發(fā)酵液中分離得到一個次級代謝產(chǎn)物—化合物X。應(yīng)用硅膠柱層析以及重結(jié)晶純化后進行結(jié)構(gòu)解析,確認(rèn)化合物X是一個異黃酮類化合物。對化合物X的生物活性進行初步篩選發(fā)現(xiàn),化合物X對枯草芽孢桿菌具有很好的活性,對宮頸癌細胞(HeLa)、肺癌細胞(SGC7901)和食管癌細胞(KYSE510、TE3)的生長增殖具有明顯的抑制作用。在高濃度時可以引起細胞死亡,隨著作用時間的延長,低濃度亦表現(xiàn)出對腫瘤細胞生長的抑制作用。 本論文將高速逆流色譜技術(shù)應(yīng)用于抗霉素的分離,成功開發(fā)出一種快速的分離抗霉素各組分的新方法。以正己烷:乙酸乙酯:甲醇:水5:2:4:1(V:V:V:V)為溶劑體系成功分離6個抗霉素組分(組分I~VI),并根據(jù)抗霉素在負(fù)離子模式下產(chǎn)生特征離子碎片峰的裂解規(guī)律,對分離得到的6個抗霉素組分進行快速鑒別,其中組分I、II、III、IV分別是A_4(a or b),A_3(a or b),A_8(a or b),A_2(a or b),組分V和VI為抗霉素A_1(a or b)的兩個同分異構(gòu)組分。

【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號】:R914
【目錄】:

  • 中文摘要10-12
  • ABSTRACT12-14
  • 常用英文縮寫詞14-15
  • 第一部分 引言15-29
  • 1. 微生物藥物的重要性15-16
  • 2. 研究依據(jù)16-23
  • 3. 研究目的23-29
  • 第二部分 材料與方法29-47
  • 1. 實驗材料29-35
  • 1.1. 主要儀器29-31
  • 1.2. 微生物次級代謝產(chǎn)物來源菌株31
  • 1.3. 抗菌實驗指示菌31-32
  • 1.4. 抗腫瘤實驗所用癌細胞株32
  • 1.5. 主要試劑與耗材32-35
  • 2. 實驗方法35-47
  • 2.1. 微生物次級代謝產(chǎn)物的發(fā)酵35-40
  • 2.1.1. 玫瑰孢鏈霉菌 FIM99608 的發(fā)酵35-38
  • 2.1.2. 鏈霉菌 FIM040512 的發(fā)酵38-40
  • 2.2 微生物次級代謝產(chǎn)物的分離純化方法40-43
  • 2.2.1. 大孔吸附樹脂柱層析40-41
  • 2.2.2. 硅膠柱層析41-42
  • 2.2.3. 高效液相色譜42
  • 2.2.4. 高壓制備液相色譜42
  • 2.2.5. 高速逆流色譜42-43
  • 2.2.6. 重結(jié)晶43
  • 2.3. 化合物的結(jié)構(gòu)鑒定43-44
  • 2.3.1. 核磁共振43
  • 2.3.2. 質(zhì)譜43
  • 2.3.3. 紫外吸收光譜43
  • 2.3.4. 紅外吸收光譜43-44
  • 2.4. 生物活性測定44-47
  • 2.4.1. 抗細菌實驗44
  • 2.4.2. 抗真菌實驗44
  • 2.4.3. 抗腫瘤實驗44-47
  • 第三部分 結(jié)果與分析47-74
  • 1. 玫瑰孢鏈霉菌FIM99608 次級代謝產(chǎn)物中2 個新化合物Y 和Z 的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定以及生物活性測定47-58
  • 1.1. 玫瑰孢鏈霉菌 FIM99608 的發(fā)酵培養(yǎng)及發(fā)酵液預(yù)處理47-50
  • 1.2. 化合物 Y 和 Z 的分離純化50-52
  • 1.3. 化合物 Y 和 Z 的結(jié)構(gòu)鑒定52-56
  • 1.3.1. 化合物 Y 的結(jié)構(gòu)解析52-54
  • 1.3.2. 化合物 Z 的結(jié)構(gòu)解析54-56
  • 1.4. 化合物 Y 和 Z 的生物活性測定56-58
  • 1.4.1. 抗細菌活性測定56
  • 1.4.2. 抗真菌活性測定56
  • 1.4.3. 抗腫瘤活性測定56-58
  • 2. 鏈霉菌FIM040512 次級代謝產(chǎn)物中化合物X 的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定以及生物活性測定58-66
  • 2.1. 鏈霉菌 FIM040512 的發(fā)酵培養(yǎng)及發(fā)酵液預(yù)處理58-59
  • 2.2. 化合物 X 的分離純化59
  • 2.3. 化合物 X 的結(jié)構(gòu)鑒定59-62
  • 2.4. 化合物 X 的生物活性測定62-66
  • 2.4.1. 抗細菌活性測定62-63
  • 2.4.2. 抗真菌活性測定63
  • 2.4.3. 抗腫瘤活性測定63-66
  • 3. 鏈霉菌FIM040512 產(chǎn)生的抗霉素6 個組分的高速逆流分離66-74
  • 3.1. 鏈霉菌 FIM040512 的發(fā)酵培養(yǎng)及發(fā)酵液預(yù)處理66
  • 3.2. 含抗霉素 6 個組分粗品的制備66
  • 3.3. 高速逆流色譜法用于分離 6 個抗霉素組分66-70
  • 3.3.1. 高速逆流色譜溶劑體系確定66-67
  • 3.3.2. 抗霉素 6 個組分的分離67-70
  • 3.4. 質(zhì)譜鑒定分離得到的 6 個抗霉素組分70-74
  • 第四部分 討論74-79
  • 第五部分 結(jié)論79-80
  • 參考文獻80-89
  • 致謝89-90
  • 附圖90-118
  • 綜述118-143
  • 參考文獻132-143
  • 下載全文 更多同類文獻

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    【引證文獻】

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    6 李冬;朱偉明;顧謙群;崔承彬;朱天驕;劉紅兵;方玉春;;海洋放線菌H2003代謝產(chǎn)物中環(huán)二肽成分及其抗腫瘤活性的初步研究[J];海洋科學(xué);2007年05期

    7 趙文英;朱天驕;古靜燕;顧謙群;朱偉明;;海洋來源放線菌3275化學(xué)成分及抗腫瘤活性研究(英文)[J];天然產(chǎn)物研究與開發(fā);2006年03期

    8 孫奕;呂阿麗;田黎;魏嵐;裴月湖;;海洋真菌Trichoderma reesei的次級代謝產(chǎn)物的分離與鑒定[J];沈陽藥科大學(xué)學(xué)報;2007年09期

    9 聶毅磊;林如;鄭永標(biāo);張慧;程元榮;鄭衛(wèi);江紅;;海綿疣孢菌FIM06031產(chǎn)生的2'-脫氧尿嘧啶核苷[J];中國抗生素雜志;2010年06期

    10 王艷穎;羅都強;師寶忠;楊小龍;;番石榴葉內(nèi)生真菌Pestalotiopsis zonata次級代謝產(chǎn)物的研究[J];中成藥;2011年05期

    中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

    1 孫晶波;林厚文;李水林;劉皋林;張純;張恒弼;;Halichondria屬軟海綿次級代謝產(chǎn)物及其生物活性[A];中國海洋生化學(xué)術(shù)會議論文薈萃集[C];2005年

    2 袁干軍;李沛波;潘微薇;;兩株鏈霉菌抗MRSA次級代謝產(chǎn)物的分析與初步鑒定[A];2011年中國藥學(xué)大會暨第11屆中國藥師周論文集[C];2011年

    3 洪文榮;;次級代謝產(chǎn)物生物合成機制研究進展與策略[A];2008年中國微生物學(xué)會學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2008年

    4 梁法亮;李冬利;陳玉嬋;陶美華;章衛(wèi)民;張德志;;土茯苓內(nèi)生芒果球座菌的次級代謝產(chǎn)物研究[A];中國菌物學(xué)會第五屆會員代表大會暨2011年學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2011年

    5 李莉媛;朱天驕;李德海;顧謙群;;一株南極來源真菌抗腫瘤活性次級代謝產(chǎn)物的研究[A];中國化學(xué)會第八屆天然有機化學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

    6 李德海;;紅樹林來源真菌活性次級代謝產(chǎn)物研究[A];第十屆全國藥用植物及植物藥學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2011年

    7 楊鳴琦;張黎;路宏朝;黃增榮;;豆類絲核菌次級代謝產(chǎn)物的抗腫瘤效應(yīng)研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)病理學(xué)分第12次暨中國動物病理生理學(xué)專業(yè)委員會第11次學(xué)術(shù)討論會論文集[C];2003年

    8 劉天麟;倪赤友;謝建華;喻愛明;;樟腦肟醚類化合物的合成與生物活性[A];中國化工學(xué)會農(nóng)藥專業(yè)委員會第八屆年會論文集[C];1996年

    9 周嚴(yán);趙淼;劉倩;楊春元;郝延明;;Dy_2AlFe_(16-x)Mn_x化合物的飽和磁化強度和居里溫度[A];第五屆中國功能材料及其應(yīng)用學(xué)術(shù)會議論文集Ⅰ[C];2004年

    10 許發(fā)達;馬成;;離子液體中芳碘化合物與亞磺酸鹽的偶聯(lián)反應(yīng)[A];中國化學(xué)會第四屆有機化學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2005年

    中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

    1 記者 劉霞;[N];科技日報;2011年

    2 記者 許琦敏;[N];文匯報;2011年

    3 姚耀;[N];中國化工報;2010年

    4 記者 江南;[N];人民日報海外版;2005年

    5 顧定槐;[N];中國化工報;2011年

    6 葛進;[N];科技日報;2008年

    7 科文;[N];中國醫(yī)藥報;2007年

    8 本報記者 白毅;[N];中國醫(yī)藥報;2009年

    9 一凡;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2006年

    10 王迪 編譯;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2011年

    中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

    1 王嬌艷;從2株鏈霉菌次級代謝產(chǎn)物中尋找新化合物以及抗霉素6個組分的高速逆流分離[D];福建醫(yī)科大學(xué);2011年

    2 矯文策;兩株海洋來源鏈霉菌的分類鑒定及其活性次級代謝產(chǎn)物的研究[D];大連理工大學(xué);2013年

    3 胡建明;氰類化合物在過渡金屬表面吸附反應(yīng)的密度泛函研究[D];福州大學(xué);2005年

    4 敖桂珍;α-取代的對甲磺;奖┧犷惢衔锏脑O(shè)計、合成和抗炎活性研究[D];中國藥科大學(xué);2002年

    5 劉悅;大理白前化學(xué)成分及其生物活性研究大理白前中甾體苷類化學(xué)成分ESI-MS裂解行為研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

    6 王敏敏;基于結(jié)構(gòu)的藥物分子設(shè)計[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1997年

    7 蔣忠;番荔枝科植物田方骨抗腫瘤化學(xué)成分研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1997年

    8 田澤;一些天然三萜類化合物抗腫瘤活性研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

    9 侯書杰;甾體皂苷的平行合成研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

    10 季紅;Ⅰ.宣威烏頭中生物堿成分的研究 Ⅱ.紫杉醇類似物的合成研究Ⅸ.去甲二萜生物堿轉(zhuǎn)化合成紫杉醇類似物的研究[D];四川大學(xué);2006年

    中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

    1 林筱;番荔枝內(nèi)生真菌的分離、鑒定、活性篩選及次級代謝產(chǎn)物的初步研究[D];廈門大學(xué);2008年

    2 尤懷成;兩株植物內(nèi)生炭角菌的次級代謝產(chǎn)物研究[D];廈門大學(xué);2008年

    3 劉洋;一種南海柳珊瑚次級代謝產(chǎn)物及其抗藤壺污損活性初步研究[D];中國海洋大學(xué);2011年

    4 李丹;兩株海洋共附生真菌的次級代謝產(chǎn)物及其生物活性研究[D];中國海洋大學(xué);2012年

    5 胡萍;鏈霉菌neau3次級代謝產(chǎn)物的提取、分離及結(jié)構(gòu)鑒定[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

    6 朱超;豆類絲核菌次級代謝產(chǎn)物對免疫抑制小鼠免疫功能的影響[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2010年

    7 尚卓;兩株海洋真菌抗菌活性次級代謝產(chǎn)物的研究[D];中國科學(xué)院研究生院(海洋研究所);2011年

    8 李琴;三峽庫區(qū)土壤來源真菌SXW-05的分離鑒定及其活性產(chǎn)物的初步研究[D];西南大學(xué);2011年

    9 丁壯;南極真菌物種多樣性及次級代謝產(chǎn)物研究[D];中國海洋大學(xué);2013年

    10 張黎;豆類絲核菌次級代謝產(chǎn)物的生物效應(yīng)研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2004年


      本文關(guān)鍵詞:腫瘤多藥耐藥性產(chǎn)生機制及其逆轉(zhuǎn)的研究現(xiàn)狀,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



    本文編號:168678

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