第一部分人骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)與鑒定[目的]體外培養(yǎng)并擴(kuò)增人骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞,并對(duì)培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞進(jìn)行鑒定,為后續(xù)實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。[方法]收集確診為骨關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis,OA)行膝關(guān)節(jié)置換術(shù)患者的軟骨組織塊,采用胰酶聯(lián)合Ⅱ型膠原酶兩步消化法體外培養(yǎng)人骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞。第1 代(Passage1,P1) OA 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)第 1、2、4、6、8、10、12 天時(shí),MTT檢測(cè)軟骨細(xì)胞生長曲線。P1代細(xì)胞培養(yǎng)2天時(shí),采用甲苯胺藍(lán)染色及Ⅱ型膠原蛋白免疫組化染色鑒定軟骨細(xì)胞,Annexin V/PI凋亡試劑盒染色細(xì)胞并用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。[結(jié)果] (1)OA軟骨原代細(xì)胞形態(tài)為小多角形,胞膜伸展,折光性好,軟骨細(xì)胞聚集成生發(fā)中心呈鋪路石樣,軟骨細(xì)胞生長較慢,至14-18天時(shí)方可長滿培養(yǎng)瓶;傳代后細(xì)胞形態(tài)逐漸增大,細(xì)胞觸角增多,胞膜伸展變寬,細(xì)胞形態(tài)呈寬大扁平狀,折光性降低,細(xì)胞增殖緩慢。(2)MTT檢測(cè)后發(fā)現(xiàn),P1代軟骨細(xì)胞在1-3天為細(xì)胞增殖潛伏期,4-8天為對(duì)數(shù)生長期,10天以后為平臺(tái)期,整個(gè)生長曲線呈“S”狀。(3)甲苯胺藍(lán)染色及Ⅱ型膠原免疫組化染色見所培養(yǎng)細(xì)胞均為...

【文章頁數(shù)】：130 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 人骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)與鑒定
    1 引言
    2 材料與方法
    3 結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
    6 參考文獻(xiàn)
第二部分 三種拮抗劑阻斷SDF-1/CXCR4信號(hào)通路對(duì)OA軟骨細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)的影響
    1 引言
    2 材料與方法
    3 結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
    6 參考文獻(xiàn)
第三部分 計(jì)算機(jī)模擬三種拮抗劑與CXCR4分子靶點(diǎn)對(duì)接研究
    1 引言
    2 材料與方法
    3 結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
    6 參考文獻(xiàn)
第四部分 基于計(jì)算機(jī)模擬的小分子探針設(shè)計(jì)與生物學(xué)特性研究
    1 引言
    2 材料與方法
    3 結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
    6 參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
綜述一、SDF-1/CXCR4信號(hào)通路在骨關(guān)節(jié)炎中的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
綜述二、小分子標(biāo)記探針在藥物靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)中的研究應(yīng)用
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝



本文編號(hào)：3859523