本文關鍵詞：骨髓源性側群細胞的體外增殖及其向肝樣細胞分化的實驗研究

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【摘要】：目的 1．通過觀察BMSP在體外培養(yǎng)條件下能否保持側群細胞的特性，以探討B(tài)MSP在體外擴增的可能性。 2．觀察在HGF定向誘導下大鼠BMSP轉分化的情況，初步探討HGF在大鼠BMSP轉分化為肝樣細胞中發(fā)揮的作用及機制。 方法 1．從大鼠的股骨和脛腓骨分離骨髓細胞并制備骨髓細胞懸液，通過流式細胞儀分選獲取BMSP；用低糖DMEM㧏10％胎牛血清培養(yǎng)基培養(yǎng)BMSP。采用RT-PCR檢測細胞中ABCG-2基因表達水平。 2．在體外向BMSP中加入不同濃度的HGF誘導其向肝樣細胞分化，并分別于第3、7、14、21天，通過RT-PCR、免疫印跡法等技術檢測AFP、ALB等細胞表面標志物的表達情況。 結果 1．每只SD大鼠的雙側股骨和脛腓骨所制備的骨髓細胞懸液的細胞總數約2-10×108個，經分選可獲得5-10×105個BMSP。 2．BMSP在體外培養(yǎng)6小時后開始貼壁生長，細胞形態(tài)以長梭形為主。隨著培養(yǎng)時間的延長,細胞生長曲線顯示第7天細胞數量最多，以后進入平臺期。第7天細胞按1:2傳代培養(yǎng)，傳代后細胞于24小時內完全貼壁，細胞傳至第10代時，細胞增殖能力仍然很強。 3．誘導分化實驗表明：一定濃度的HGF具有明顯的促進BMSP轉分化為肝樣細胞。RT-PCR檢測顯示：培養(yǎng)第3天的BMSP空白組及因子組未見AFP、ALB mRNA表達；AFP mRNA在第7天的因子組表達、ALB mRNA在因子組則不表達，空白組AFP、ALB mRNA均未表達；AFP mRNA在第14天的因子組表達減弱、ALB mRNA在第14天的因子組表達，空白組AFP、ALB mRNA均未表達；第21天因子組見AFP mRNA不表達、ALB mRNA表達減弱，空白組AFP、ALB mRNA均未表達。因子組與對照組相比有顯著性差異，P0.05，有統(tǒng)計學意義。 結論 1．通過流式細胞儀分選獲得BMSP在一定時間內可以在體外擴增并保持干細胞的特性，，且傳代的BMSP仍具有很強的自我更新和增殖能力。 2．擴增的BMSP在HGF的誘導下可以逐漸向肝樣細胞分化。
【關鍵詞】：骨髓源性側群細胞 干細胞 流式細胞分選術 肝細胞生長因子
【學位授予單位】：遵義醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 中英文縮略詞表4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-13
• 第一部分 骨髓源性側群細胞的分選、體外增殖培養(yǎng)及鑒定13-29
• 前言13
• 1．材料與方法13-21
• 2．結果21-26
• 3．討論26-29
• 第二部分 骨髓源性側群細胞向肝樣細胞的定向誘導分化29-46
• 前言29
• 1．材料與方法29-36
• 2．結果36-43
• 3．討論43-46
• 結論46-47
• 參考文獻47-51
• 綜述51-65
• 參考文獻60-65
• 致謝65-66
• 作者簡介66

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前8條

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本文編號：992709