本文關(guān)鍵詞：臍血源神經(jīng)干細(xì)胞移植治療大鼠脊髓損傷模型后基因表達(dá)譜的變化及臨床初步應(yīng)用研究

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【摘要】：目的1.了解臍血源神經(jīng)干細(xì)胞（Umbilical cord blood neural stemcells,UCBNSCs）移植治療大鼠脊髓損傷模型的后肢功能改善情況，篩選出UCBNSCs移植組和安慰劑對(duì)照組差異表達(dá)的基因，探討其中部分基因的功能及其與脊髓損傷后肢體功能恢復(fù)的可能關(guān)系，以期為脊髓損傷的基因治療提供參考。2.將UCBNSCs應(yīng)用到臨床實(shí)踐中治療陳舊性脊髓損傷患者，通過(guò)相關(guān)量表評(píng)估其有效性，希望為脊髓損傷患者提供一種新的治療措施。 方法1.60只健康雌性SD(Sprague-Dawley)大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組（n=10）、磷酸鹽緩沖液(phosphate buffer saline,PBS)移植對(duì)照組（n=20）、UCBNSCs移植組（n=30）。假手術(shù)組僅在顯微鏡下行T9-11椎板打開(kāi)，不做其他處理。后兩組打開(kāi)T9-11椎板后橫斷脊髓，制作大鼠脊髓全斷模型。1w后UCBNSCs移植組行UCBNSCs（1×107/L細(xì)胞懸浮液10ul）腦室穿刺移植，對(duì)照組用PBS代替，移植術(shù)后第2w、4w、8w分別處死SD大鼠4只，獲得損傷處脊髓樣本行免疫組化染色，觀察UCBNSCs在體內(nèi)的存活情況，及第2周時(shí)在體內(nèi)的分化。分別于移植后1d、1w、2w、4w、6w、8w分別對(duì)三組大鼠（分別n=10,17,16只）行BBB行為評(píng)分。第8周分別取PBS注射組和UCBNSCs移植組各7只SD大鼠，獲得脊髓損傷處組織樣本，行基因芯片分析，篩選出差異表達(dá)基因。2.臨床研究中，36名陳舊性脊髓損傷患者入院后采用脊髓損傷神經(jīng)學(xué)分類國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)（ASIA）對(duì)入選患者進(jìn)行評(píng)分，并通過(guò)導(dǎo)尿法測(cè)定患者膀胱殘余尿量。利用新生嬰兒臍帶血，在體外條件下分化成神經(jīng)干細(xì)胞，制成濃度為109/L的懸液，經(jīng)腰椎穿刺（L3-4或L4-5）注入蛛網(wǎng)膜下腔。術(shù)后3月重新對(duì)所有患者行ASIA評(píng)分和膀胱殘余尿量測(cè)定，以此來(lái)判斷UCBNSCs移植對(duì)脊髓損傷患者的臨床療效。 結(jié)果1.假手術(shù)組術(shù)后各時(shí)間段后肢功能未出現(xiàn)明顯受損，PBS和UCBNSCs移植組造模后均出現(xiàn)了雙下肢不同程度癱瘓、小便功能障礙等表現(xiàn)。隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，后肢功能有所恢復(fù)，移植術(shù)后1d、1w兩組BBB評(píng)分無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，術(shù)后2w、4w、6w和8w兩組差別明顯，且P0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。移植的UCBNSCs在4w時(shí)在病灶周圍數(shù)量仍很大，并且能夠存活至少8w，第2w時(shí)UCBNSCs很少分化為神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。兩組大鼠受損脊髓樣本的芯片分析篩選出24個(gè)差異表達(dá)基因，其中表達(dá)上調(diào)的有20個(gè)，表達(dá)下調(diào)有4個(gè)；2.陳舊性脊髓損傷患者UCBNSCs移植術(shù)后，生命體征平穩(wěn)，術(shù)后3月ASIA各項(xiàng)評(píng)分較前提高、膀胱殘余尿量減少且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)平面下降，患者的脊髓損傷狀況較前改善。 結(jié)論1.UCBNSCs移植治療大鼠脊髓損傷有確切療效，與安慰劑對(duì)照組相比，UCBNSCs移植組術(shù)后8w有24個(gè)基因表達(dá)的量發(fā)生變化，可能與脊髓功能的恢復(fù)有一定的關(guān)系，，為后續(xù)相關(guān)基因的研究打下初步基礎(chǔ)。2.UCBNSCs移植作為一種新的治療方法，可以改善陳舊性脊髓損傷患者肢體功能，提高患者生活質(zhì)量。
【關(guān)鍵詞】：臍血源神經(jīng)干細(xì)胞 脊髓損傷 基因表達(dá)譜 膀胱殘余尿量 ASIA評(píng)分
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R651.2;R-332
【目錄】：

• 中英文縮略詞表6-8
• 中文摘要8-10
• Abstract10-13
• 前言13-17
• 參考文獻(xiàn)14-17
• 第1部分 臍血源神經(jīng)干細(xì)胞移植治療大鼠脊髓損傷模型及其基因表達(dá)譜的變化17-45
• 1.1 前言17
• 1.2 對(duì)象與方法17-29
• 1.3 結(jié)果29-38
• 1.4 討論38-41
• 1.5 結(jié)論41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 第2部分 臍血源神經(jīng)干細(xì)胞移植治療陳舊性脊髓損傷的臨床研究45-60
• 2.1 引言45-46
• 2.2 對(duì)象和方法46-48
• 2.3 UCBNSCs 移植48-53
• 2.4 結(jié)果53-57
• 2.5 討論57-58
• 2.6 結(jié)論58
• 參考文獻(xiàn)58-60
• 附錄60-62
• 致謝62-63
• 綜述63-71
• 參考文獻(xiàn)69-71

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 肖林;馬振蓮;李欣;林秋霞;闕海萍;劉少君;;應(yīng)用cDNA微陣列技術(shù)篩選大鼠脊髓損傷修復(fù)相關(guān)基因(英文)[J];生理學(xué)報(bào);2005年06期

本文編號(hào)：974996