本文關(guān)鍵詞：慢病毒載體介導CGRP基因體外轉(zhuǎn)染及對MSC生物學特性的影響

  更多相關(guān)文章： 降鈣素基因相關(guān)肽 轉(zhuǎn)染 間充質(zhì)干細胞 生物學特性

【摘要】：目的探討慢病毒載體介導降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)基因體外轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細胞(MSC)及其對MSC生物學特性的影響。方法大鼠MSC進行分離、培養(yǎng)及鑒定。CGRP重組慢病毒轉(zhuǎn)染MSC后,采用熒光顯微鏡和流式細胞技術(shù)測定其轉(zhuǎn)染率。實時定量PCR、免疫熒光細胞化學及ELISA法檢測MSC中CGRP的表達。慢病毒轉(zhuǎn)染后通過MTT、β-半乳糖苷酶染色和誘導分化評價MSC的增殖、衰老及分化能力。結(jié)果慢病毒載體介導CGRP基因轉(zhuǎn)染MSC后48h可穩(wěn)定表達,MOI=30時,轉(zhuǎn)染率達80%以上。與MSC組和空載病毒轉(zhuǎn)染(MSC-EGFP組)比較,CGRP修飾的MSC(MSC-CGRP組)中CGRP的mRNA和蛋白表達水平增高(均P0.01)。MTT、β-半乳糖苷酶染色和誘導分化結(jié)果顯示,病毒轉(zhuǎn)染后對MSC增殖、衰老及向內(nèi)皮分化基本沒有影響。結(jié)論 MSC是一種理想的基因載體細胞,可作為CGRP基因轉(zhuǎn)染的靶細胞用于基因治療,為后續(xù)體內(nèi)、體外實驗奠定基礎。
【作者單位】： 遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院心血管內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 降鈣素基因相關(guān)肽 轉(zhuǎn)染 間充質(zhì)干細胞 生物學特性
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81060014)
【分類號】：R373
【正文快照】： 本研究小組前期的研究顯示,骨髓間充質(zhì)干細胞(MSC)移植能在一定程度上促進損傷動脈內(nèi)皮的修復,但其對血管平滑肌細胞(VSMC)的影響較小[1-2]。降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)具有抑制VSMC增殖的作用,但CGRP在外周血的半衰期很短,需要通過合適的載體和靶細胞將其帶入體內(nèi)來持續(xù)發(fā)揮作用

【共引文獻】

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本文編號：959850