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慢性應(yīng)激對(duì)性動(dòng)機(jī)的影響以及睪丸vimentin、AR表達(dá)的變化

發(fā)布時(shí)間:2017-10-02 08:26

  本文關(guān)鍵詞:慢性應(yīng)激對(duì)性動(dòng)機(jī)的影響以及睪丸vimentin、AR表達(dá)的變化


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【摘要】:目的:一些臨床研究和基礎(chǔ)研究表明,慢性應(yīng)激與性動(dòng)機(jī)、性覺(jué)醒等高級(jí)心理過(guò)程密切相關(guān),可能導(dǎo)致機(jī)體情緒調(diào)節(jié)異常,引起機(jī)體對(duì)各種心理和精神疾病的易感性提高。睪丸是雄性生殖器官,對(duì)于維持正常的性偏愛(ài)行為、性覺(jué)醒以及進(jìn)行性交配具有重要作用。正常的生精作用對(duì)于維持生殖功能具有很重要的作用。慢性應(yīng)激可能會(huì)導(dǎo)致生精細(xì)胞凋亡增加,導(dǎo)致生精細(xì)胞數(shù)目減少,從而影響生殖功能。波形蛋白、雄性激素受體作為在睪丸上表達(dá)的蛋白,對(duì)于維持正常的生精功能具有重要作用。本研究通過(guò)建立動(dòng)物模型,探索慢性應(yīng)激對(duì)性動(dòng)機(jī)行為的影響;檢測(cè)睪丸上細(xì)胞凋亡水平在慢性應(yīng)激作用下發(fā)生的改變;并檢測(cè)慢性應(yīng)激作用下睪丸波形蛋白、雄性激素受體是否發(fā)生改變,從而探討慢性應(yīng)激狀態(tài)下,性動(dòng)機(jī)改變的可能原因。 方法:將雄性Sprague-Dawley大鼠16只隨機(jī)分為對(duì)照組和模型組,使用慢性不可預(yù)見(jiàn)溫和應(yīng)激(CUMS)方法建立大鼠慢性應(yīng)激模型。情緒狀態(tài)的檢測(cè)采取糖水消耗實(shí)驗(yàn)和曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn),通過(guò)這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠慢性應(yīng)激模型是否建立成功。性動(dòng)機(jī)行為通過(guò)Agmo提出性偏好行為檢測(cè)裝置進(jìn)行檢測(cè),探討動(dòng)物性動(dòng)機(jī)行為是否受慢性應(yīng)激的影響。行為實(shí)驗(yàn)后,進(jìn)一步研究睪丸細(xì)胞結(jié)構(gòu)變化情況,采用tunel檢測(cè)睪丸各部位細(xì)胞凋亡水平分布情況變化。同時(shí)采用Western blotting方法,檢測(cè)睪丸中波形蛋白、雄性激素受體蛋白總量的改變,采用免疫組織化學(xué)方法檢驗(yàn)睪丸各具體位置中蛋白表達(dá)分布情況。 結(jié)果:(1)由多種行為實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可知,慢性應(yīng)激模型建立成功,同時(shí)慢性應(yīng)激導(dǎo)致大鼠性動(dòng)機(jī)損傷。首先,模型組在糖水消耗實(shí)驗(yàn)中對(duì)糖水偏好下降,在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出探索欲望下降、活動(dòng)能力下降,這些說(shuō)明慢性應(yīng)激模型建立成功。性動(dòng)機(jī)行為實(shí)驗(yàn)中當(dāng)雌鼠在發(fā)情期時(shí),模型組在雌鼠區(qū)停留時(shí)間減少,,表明慢性應(yīng)激狀態(tài)下大鼠的性動(dòng)機(jī)下降。 (2)慢性應(yīng)激引起大鼠睪丸細(xì)胞的凋亡表達(dá)上升。激光共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果為生精小管中的精原細(xì)胞、精母細(xì)胞凋亡表達(dá)上升;生精小管間隙間質(zhì)細(xì)胞凋亡增加。 (3)慢性應(yīng)激引起睪丸波形蛋白、雄性激素受體蛋白表達(dá)下調(diào)。Western blotting檢測(cè)睪丸細(xì)胞總蛋白發(fā)現(xiàn)慢性應(yīng)激使得睪丸中波形蛋白、雄性激素受體總量改變。免疫組化分析表明波形蛋白在生精小管基底部支持細(xì)胞中表達(dá)減少,雄性激素受體在生精細(xì)胞中表達(dá)減少。 結(jié)論:慢性應(yīng)激引發(fā)大鼠情緒調(diào)節(jié)障礙和性動(dòng)機(jī)障礙;并伴有睪丸上皮生精細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞和支持細(xì)胞的凋亡現(xiàn)象;大鼠睪丸各級(jí)生精細(xì)胞均有波形蛋白表達(dá)下調(diào),支持細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞和精母細(xì)胞雄性激素受體表達(dá)下調(diào),這些表明上述兩個(gè)蛋白參與慢性應(yīng)激對(duì)大鼠性動(dòng)機(jī)影響的過(guò)程。這些結(jié)果為進(jìn)一步探明慢性應(yīng)激引發(fā)生殖功能異常的機(jī)制提供了實(shí)驗(yàn)證據(jù),并提示波形蛋白、雄性激素受體蛋白可能對(duì)治療慢性應(yīng)激引起的性動(dòng)機(jī)障礙具有一定的臨床價(jià)值。
【關(guān)鍵詞】:慢性應(yīng)激 性動(dòng)機(jī) 凋亡 波形蛋白 雄性激素受體
【學(xué)位授予單位】:浙江理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類(lèi)號(hào)】:R363
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-8
  • 目錄8-12
  • 表目錄12-13
  • 圖目錄13-14
  • 縮略語(yǔ)14-15
  • 引言15-17
  • 第一章 綜述17-31
  • 1.1 慢性應(yīng)激對(duì)性動(dòng)機(jī)的影響17-19
  • 1.1.1 性動(dòng)機(jī)的概念和評(píng)價(jià)17-18
  • 1.1.2 慢性應(yīng)激對(duì)性動(dòng)機(jī)的影響18-19
  • 1.2 慢性應(yīng)激對(duì)性行為的影響19-20
  • 1.3 慢性應(yīng)激對(duì)睪丸結(jié)構(gòu)的影響20-24
  • 1.3.1 慢性應(yīng)激對(duì)生精細(xì)胞的影響21-22
  • 1.3.2 慢性應(yīng)激與支持細(xì)胞22-23
  • 1.3.3 慢性應(yīng)激與間質(zhì)細(xì)胞23-24
  • 1.4 波形蛋白與生殖24-27
  • 1.4.1 波形蛋白與支持細(xì)胞結(jié)構(gòu)24-25
  • 1.4.2 波形蛋白與精子形成過(guò)程25-26
  • 1.4.3 波形蛋白與應(yīng)激26-27
  • 1.5 雄性激素受體與生殖27-29
  • 1.5.1 雄性激素受體27-28
  • 1.5.2 雄性激素受體在性行為中的作用28-29
  • 1.5.3 雄性激素受體與應(yīng)激29
  • 1.6 結(jié)語(yǔ)29-31
  • 第二章 研究設(shè)計(jì)31-36
  • 2.1 研究目的31
  • 2.2 研究意義31-32
  • 2.2.1 理論意義31
  • 2.2.2 實(shí)踐意義31-32
  • 2.3 研究?jī)?nèi)容與創(chuàng)新32-33
  • 2.3.1 研究?jī)?nèi)容32
  • 2.3.2 研究創(chuàng)新32-33
  • 2.4 研究假設(shè)33
  • 2.5 研究方法和技術(shù)路線(xiàn)33-36
  • 2.5.1 研究方法33-34
  • 2.5.2 技術(shù)路線(xiàn)34-36
  • 第三章 實(shí)驗(yàn)一:慢性應(yīng)激對(duì)大鼠的情緒影響36-43
  • 3.1 材料與方法36-38
  • 3.1.1 動(dòng)物及分組36
  • 3.1.2 實(shí)驗(yàn)器材36-37
  • 3.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑37
  • 3.1.4 建立慢性應(yīng)激大鼠模型37
  • 3.1.5 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)37-38
  • 3.1.6 糖水消耗實(shí)驗(yàn)38
  • 3.1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理38
  • 3.2 結(jié)果38-41
  • 3.2.1 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)38-40
  • 3.2.3 糖水消耗實(shí)驗(yàn)40-41
  • 3.3 討論41-43
  • 3.3.1 慢性應(yīng)激模型41
  • 3.3.2 慢性應(yīng)激對(duì)情緒變化的影響41-42
  • 3.3.3 小結(jié)42-43
  • 第四章 實(shí)驗(yàn)二:慢性應(yīng)激對(duì)大鼠性動(dòng)機(jī)行為的影響43-52
  • 4.1 材料與方法43-45
  • 4.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物43
  • 4.1.2 實(shí)驗(yàn)器材及試劑43-44
  • 4.1.3 雌鼠發(fā)情周期檢測(cè)44
  • 4.1.4 性動(dòng)機(jī)行為檢測(cè)44-45
  • 4.1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理45
  • 4.2 結(jié)果45-49
  • 4.2.1 雌鼠發(fā)情周期確定45-46
  • 4.2.2 移動(dòng)距離46
  • 4.2.3 雌鼠偏愛(ài)分?jǐn)?shù)46-47
  • 4.2.4 雌/雄鼠刺激區(qū)停留時(shí)間47-49
  • 4.3 討論49-52
  • 第五章 實(shí)驗(yàn)三慢性應(yīng)激對(duì)睪丸細(xì)胞凋亡的影響52-57
  • 5.1 材料與方法52-54
  • 5.1.1 動(dòng)物及分組52
  • 5.1.2 儀器及設(shè)備52-53
  • 5.1.3 試劑及藥品53
  • 5.1.4 組織固定步驟53-54
  • 5.1.5 Tunel 檢測(cè)54
  • 5.2 結(jié)果54-56
  • 5.2.1 睪丸組織中 Tunel 表達(dá)的變化54-56
  • 5.3 討論56-57
  • 第六章 實(shí)驗(yàn)三:慢性應(yīng)激對(duì)波形蛋白表達(dá)的影響57-67
  • 6.1 材料與方法57-61
  • 6.1.1 動(dòng)物及分組57
  • 6.1.2 儀器及設(shè)備57-58
  • 6.1.3 試劑及藥品58-60
  • 6.1.4 試劑的配置60-61
  • 6.1.5 Western blotting 檢測(cè)61
  • 6.1.6 免疫組織化學(xué)檢測(cè)61
  • 6.1.7 統(tǒng)計(jì)方法61
  • 6.2 結(jié)果61-64
  • 6.2.1 大鼠睪丸組織波形蛋白表達(dá)免疫印跡分析61-62
  • 6.2.2 大鼠睪丸組織波形蛋白表達(dá)免疫組化結(jié)果62-64
  • 6.3 討論64-67
  • 6.3.1 慢性應(yīng)激導(dǎo)致大鼠睪丸波形蛋白表達(dá)降低64-65
  • 6.3.2 波形蛋白表達(dá)同大鼠睪丸凋亡關(guān)系65-67
  • 第七章 實(shí)驗(yàn)四:慢性應(yīng)激對(duì)大鼠睪丸雄性激素受體表達(dá)的影響67-75
  • 7.1 材料與方法67-69
  • 7.1.1 動(dòng)物及分組67
  • 7.1.2 儀器及設(shè)備67
  • 7.1.3 試劑及藥品67-68
  • 7.1.4 試劑的配置68
  • 7.1.5 Western blotting 檢測(cè)68
  • 7.1.6 免疫組織化學(xué)檢測(cè)68
  • 7.1.7 統(tǒng)計(jì)方法68-69
  • 7.2 結(jié)果69-72
  • 7.2.1 大鼠睪丸組織 AR 表達(dá)免疫印跡分析69-70
  • 7.2.2 大鼠睪丸組織 AR 表達(dá)免疫組化結(jié)果70-72
  • 7.3 討論72-75
  • 第八章 總結(jié)與展望75-77
  • 8.1 討論與總結(jié)75-76
  • 8.2 不足與展望76-77
  • 參考文獻(xiàn)77-84
  • 附錄 184-85
  • 附錄 285-86
  • 附錄 386-87
  • 附錄 487-88
  • 致謝88

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 周永翠;三個(gè)新的精子發(fā)生相關(guān)基因在人和小鼠睪丸中的表達(dá)特征[D];汕頭大學(xué);2009年



本文編號(hào):958548

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