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miR-302對脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向成脂和成骨分化的調(diào)控

發(fā)布時間:2017-10-01 21:14

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【摘要】:背景:間充質(zhì)干細(xì)胞具有自我更新能力,在一定條件下能夠分化為一定譜系的細(xì)胞,但很多機(jī)制至今未明。目的:探究mi R-302b對脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向成脂和成骨分化的調(diào)控作用。方法:mi R-302模擬物轉(zhuǎn)染作用于脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行成骨成脂誘導(dǎo),對照組轉(zhuǎn)染mi R-302陰性對照模擬物mi R-NC。采用堿性磷酸酶染色及活性分析、茜素紅染色、油紅O染色和萃取實驗觀察mi R-302上調(diào)對脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨和成脂分化的影響,以及Western blot檢測miR-302上調(diào)后成骨分化轉(zhuǎn)錄因子Runx2和成骨早期標(biāo)志物堿性磷酸酶在脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)。結(jié)果與結(jié)論:1堿性磷酸酶沉淀物在miR-302過表達(dá)細(xì)胞中產(chǎn)生的量均明顯少于對照組,進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)mi R-302過表達(dá)實驗組堿性磷酸酶活性明顯低于對照組(P0.05)。2mi R-302過表達(dá)明顯抑制了礦物質(zhì)沉積鈣結(jié)節(jié)的形成,mi R-302上調(diào)實驗組橘紅色的鈣結(jié)節(jié)明顯少于對照組。3mi R-302過表達(dá)實驗組油紅O染色陽性的細(xì)胞數(shù)明顯高于對照組,進(jìn)一步表明實驗組細(xì)胞萃取得到的油紅O吸光度值明顯上升(P0.05)。4成骨誘導(dǎo)第6天時成骨分化轉(zhuǎn)錄因子Runx2和成骨早期標(biāo)志物堿性磷酸酶在mi R-302過表達(dá)的細(xì)胞中都有不同程度的下降。5以上結(jié)果表明miR-302的上調(diào)能夠抑制脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨分化,同時促進(jìn)其向成脂分化。mi R-302在間充質(zhì)干細(xì)胞向成脂和成骨分化平衡發(fā)揮了雙向調(diào)控作用。
【作者單位】: 徐州醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院組織胚胎學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】脂肪組織 間質(zhì)干細(xì)胞 微RNAs 細(xì)胞分化 成脂分化 組織工程 干細(xì)胞 脂肪干細(xì)胞 成骨分化 Micro RNAs 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 堿性磷酸酶 RUNX
【基金】:江蘇省高校自然科學(xué)基金(14KJB310021) 江蘇省腦病生物信息重點實驗室開放課題(JSBl1403)~~
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 0引言Introduction脂或成骨分化誘導(dǎo),每次實驗兩組均設(shè)置3個以上的復(fù)孔,Micro RNAs(mi RNAs)是一類被證明能夠通過轉(zhuǎn)錄或同樣的實驗重復(fù)3次以上。轉(zhuǎn)錄后水平負(fù)向調(diào)控靶基因表達(dá)發(fā)揮功能的非編碼小RNA分子[1],越來越多的證據(jù)表明mi RNAs能夠參與調(diào)控多種分間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培

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8 本報記者 王新佳;我國“原始間充質(zhì)干細(xì)胞”注射液進(jìn)入臨床研究[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報;2005年

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