本文關(guān)鍵詞：HPV18 E5蛋白穩(wěn)定表達(dá)株的篩選及對(duì)細(xì)胞增殖和周期的影響

  更多相關(guān)文章： 人乳頭瘤病毒型 E蛋白 細(xì)胞增殖 細(xì)胞周期

【摘要】：本研究篩選能穩(wěn)定表達(dá)HPV18E5蛋白的細(xì)胞株,并檢測(cè)HPV18E5蛋白對(duì)細(xì)胞增殖及周期的影響。通過(guò)PCR方法擴(kuò)增得到HPV18E5基因,經(jīng)酶切和連接構(gòu)建含His標(biāo)簽的pSecTag-HPV18E5真核表達(dá)質(zhì)粒。運(yùn)用脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染Balb/c3T3細(xì)胞,并用含有博來(lái)霉素的培養(yǎng)基篩選陽(yáng)性細(xì)胞株。利用Western blot和免疫酶法鑒定HPV18E5在細(xì)胞中的表達(dá)。運(yùn)用CCK-8法、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HPV18E5對(duì)細(xì)胞增殖及細(xì)胞周期的影響。結(jié)果顯示pSecTag-HPV18E5真核表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建成功;重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染Balb/c3T3細(xì)胞后,經(jīng)400μg/mL博來(lái)霉素篩選21d,得到穩(wěn)定表達(dá)HPV18E5蛋白的細(xì)胞株;與對(duì)照組相比,HPV18E5穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株的細(xì)胞增殖能力明顯增強(qiáng),細(xì)胞周期中S期的比值明顯增加。研究表明HPV18E5對(duì)細(xì)胞增殖及細(xì)胞周期有影響。本結(jié)果為進(jìn)一步深入研究HPV18E5蛋白的生物學(xué)特性及致癌作用奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 北京工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與生物工程學(xué)院環(huán)境與病毒腫瘤學(xué)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所傳染病預(yù)防控制國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 人乳頭瘤病毒型 E蛋白 細(xì)胞增殖 細(xì)胞周期
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(21277001) 北京市教育委員會(huì)科技計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目(KZ201110005003) 傳染病預(yù)防控制國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室自主研究重點(diǎn)課題(2011SKLID103) 北京工業(yè)大學(xué)基礎(chǔ)基金(015000514314004)
【分類號(hào)】：R373
【正文快照】： 人乳頭瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)是一種能引起皮膚和黏膜鱗狀上皮增生的DNA腫瘤病毒[1]。迄今為止,已發(fā)現(xiàn)的人乳頭瘤病毒多達(dá)170種[2-3]。高危型HPV,特別是HPV16、18型感染與人類多種癌癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[4]。研究表明,90%宮頸癌的發(fā)生與HPV16、18型的感染有關(guān)[5-6

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王繼;李星蓉;左丹;王麗;;RNA干擾對(duì)HeLa細(xì)胞VEGF表達(dá)和細(xì)胞增殖的影響[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年06期

2 楊成,周樹(shù)夏,劉彥普,楊耀武;肌肉組織工程的基礎(chǔ)研究——不同培養(yǎng)條件對(duì)衛(wèi)星細(xì)胞增殖的影響[J];中國(guó)美容醫(yī)學(xué);2004年02期

3 柯丹;李發(fā)琪;刁慶春;;低強(qiáng)度脈沖超聲波對(duì)細(xì)胞增殖及生物合成的影響[J];臨床超聲醫(yī)學(xué)雜志;2007年05期

4 李言秋;鈣調(diào)素在細(xì)胞增殖中的調(diào)節(jié)作用[J];棗莊師專學(xué)報(bào);1995年04期

5 姜立;馬文麗;李晉;彭翼飛;徐兵;鄭文嶺;;Antizyme1基因轉(zhuǎn)染對(duì)K562細(xì)胞增殖與凋亡的影響[J];中國(guó)生物工程雜志;2007年08期

6 王堅(jiān),羅國(guó)春,巴建明;白細(xì)胞介素1α對(duì)鼠甲狀腺細(xì)胞增殖的影響[J];江蘇醫(yī)藥;1997年09期

7 陸玲,黃為一,袁生,樊慶笙;鈣在粟酒裂殖酵母細(xì)胞增殖過(guò)程中的效應(yīng)[J];南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2000年02期

8 陸玲,蔣愛(ài)芹,袁生,尹麗紅,黃為一,樊慶笙;吩噻嗪類鈣調(diào)素抑制劑對(duì)芽殖酵母(Saccharomyces cerevisiae)和粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)細(xì)胞增殖的不同效應(yīng)[J];實(shí)驗(yàn)生物學(xué)報(bào);2000年02期

9 王堅(jiān),羅國(guó)春,巴建明;白細(xì)胞介素1α對(duì)鼠甲狀腺細(xì)胞增殖的影響[J];金陵醫(yī)院學(xué)報(bào);1997年03期

10 張培霖;槲皮素對(duì)細(xì)胞增殖影響的研究進(jìn)展[J];瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1999年02期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 徐楓;趙玫;杜菲;林梁;周啟兵;余權(quán);黃常志;;Hsp 70與T細(xì)胞增殖的相關(guān)研究[A];第七屆全國(guó)腫瘤生物治療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2001年

2 黃蓓;Gavin Porter;Haian Fu;;PRAS40對(duì)細(xì)胞增殖調(diào)控作用的初步研究[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第九次會(huì)員代表大會(huì)暨青年學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2007年

3 苗艷穎;侯忠赤;翁良;祝世功;;Ghrelin促進(jìn)PC12細(xì)胞增殖的機(jī)制研究[A];中國(guó)神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)第六屆學(xué)術(shù)會(huì)議暨學(xué)會(huì)成立十周年慶祝大會(huì)論文摘要匯編[C];2005年

4 行書(shū)麗;賈偉;吳士良;;人類β3GalT7/GNT8對(duì)HL-60細(xì)胞增殖與侵襲特性的影響[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)2008年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2008年

5 李揚(yáng);宋長(zhǎng)城;羅松;宋小元;齊建國(guó);王永潮;;IDl對(duì)細(xì)胞增殖、分化和調(diào)亡的影響[A];中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)全國(guó)顯微與亞顯微形態(tài)科學(xué)分會(huì)第十次形態(tài)科學(xué)與顯微注射技術(shù)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2000年

6 林亞秋;龐衛(wèi)軍;楊公社;;TNF-α對(duì)大鼠脂肪細(xì)胞增殖與凋亡的影響[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)大會(huì)、青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2005年

7 鄒偉;;Caveolin-1及其生理功能多樣性[A];“基因、進(jìn)化與生理功能多樣性”海內(nèi)外學(xué)術(shù)研討會(huì)暨中國(guó)生理學(xué)會(huì)第七屆比較生理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2009年

8 鄧錦波;牛艷麗;范文娟;劉彬;;死亡受體5與神經(jīng)細(xì)胞增殖[A];Proceedings of the 8th Biennial Conference of the Chinese Society for Neuroscience[C];2009年

9 陳勇;呂合作;胡建國(guó);李柏青;;可刺激人γδT細(xì)胞增殖的結(jié)核桿菌多肽抗原的生物學(xué)特性分析[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第四屆學(xué)術(shù)大會(huì)會(huì)議議程及論文摘要集[C];2002年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 曹萌萌;KIAA0157和Hepassocin調(diào)節(jié)肝源性細(xì)胞增殖的機(jī)制研究[D];天津大學(xué);2012年

2 張麗平;稀土離子對(duì)NIH3T3和MC3T3細(xì)胞增殖及細(xì)胞膜鉀通道的作用研究[D];山西大學(xué);2010年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 梁丁芳;hsBAFF通過(guò)Ca~(2+)-CaMKII依賴抑制PP2A激活Erk1/2導(dǎo)致B細(xì)胞增殖機(jī)理研究[D];南京師范大學(xué);2013年

2 宋東莉;縫隙連接蛋白Connexin 43半通道在H9c2細(xì)胞增殖調(diào)節(jié)中的作用及機(jī)制[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

3 白海濤;低水平輻射所致細(xì)胞增殖刺激效應(yīng)及淋巴細(xì)胞體外增殖的自由基機(jī)理[D];蘇州大學(xué);2002年

4 肖小平;生長(zhǎng)抑素2型受體對(duì)細(xì)胞增殖的影響[D];暨南大學(xué);2007年

5 李莉;內(nèi)源性代謝產(chǎn)物X通過(guò)激活ERK通路上調(diào)cyclinD1促進(jìn)C_2C_（12）細(xì)胞增殖[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

6 程曉剛;衰變加速因子（DAF）對(duì)Jurkat細(xì)胞增殖效應(yīng)的影響及其信號(hào)傳遞機(jī)制的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2001年

7 蘇衛(wèi)敏;MLCK鈣調(diào)蛋白結(jié)合位點(diǎn)突變體的構(gòu)建及其對(duì)VSMC增殖和遷移的影響[D];大連醫(yī)科大學(xué);2014年

8 朱偉;Cr（VI）對(duì)果蠅S2細(xì)胞增殖影響及機(jī)制的研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2013年

9 黃欣;脈沖微波對(duì)細(xì)胞增殖影響的研究[D];華東師范大學(xué);2010年

10 李蓮;不同因子對(duì)HeLa細(xì)胞增殖、凋亡和HSP70表達(dá)的影響[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

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本文編號(hào)：950558