本文關鍵詞：黃芪對荷瘤小鼠化療后免疫功能的影響

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【摘要】：目的 本研究通過構(gòu)建小鼠T細胞淋巴瘤模型,應用黃芪(astragalus mongholicus)聯(lián)合吉西他濱(gemcitabine, GEM)治療小鼠T細胞淋巴瘤,探討黃芪對荷瘤小鼠化療后T輔助細胞1型細胞亞群(Thelper cell type1cells cellular subpopulations, TH1)/T輔助細胞2型細胞亞群(T helper cell type2cells cellular subpopulations, Th2)細胞因子表達的影響及免疫機制研究,評價黃芪對機體的免疫保護作用,為T細胞淋巴瘤的免疫治療研究提供實驗依據(jù)及理論依據(jù)。 方法 1本研究采用皮下注射法構(gòu)建小鼠T細胞淋巴瘤動物模型。 2將120只C57BL/6小鼠隨機分為5組,其中24只為正常對照組小鼠不接種EL-4細胞,其他4組即96只小鼠接EL-4細胞,待荷瘤小鼠瘤體長至lcm3左右,將荷瘤小鼠按原編碼輸入SPSS,由軟件隨機分為4組。最終分組即：正常對照組(n=24)不做任何處理；荷瘤小鼠空白對照組(n=24)腹腔注射生理鹽水0.2ml,第1、8、15天給藥,3周為一周期；吉西他濱化療組(n=24)腹腔注射,給藥劑量為80mg/kg鼠重,第1、8、15天給藥,3周為一周期；黃芪治療組(n=24)腹腔注射,給藥劑量為12g/kg鼠重,化療第3天后給藥,每天給藥；吉西他濱+黃芪治療組(n=24)吉西他濱腹腔注射,給藥劑量為80mg/kg鼠重,第1、8、15天給藥,3周為一周期；黃芪腹腔注射,給藥劑量為12g/kg鼠重,化療第3天后給藥,每天給藥。 3大體觀察與組織形態(tài)學研究：每天觀察各組小鼠的精神狀態(tài)及活動情況,測量小鼠體重,游標卡尺測量腫瘤的最長徑L和最短徑W,4組荷瘤小鼠分別于d7、d14取瘤體組織標本,制備HE染色瘤體組織切片,光鏡下觀察各實驗組不同時間點瘤體組織形態(tài)學變化。 4生存期：每日記錄各組小鼠的死亡情況,最終計算小鼠生存期。 5酶聯(lián)免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)：4組荷瘤小鼠分別于d7、d14取瘤體組織標本,制備HE染色瘤體組織切片,光鏡下觀察各實驗組不同時間點瘤體組織形態(tài)學變化。 結(jié)果 1荷瘤小鼠體重在吉西他濱給藥第1、7、14天,較給藥前體重逐漸升高。正常對照組與荷瘤小鼠空白對照組、吉西他濱化療組、黃芪治療組、吉西他濱+黃芪治療組兩兩比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 2各組荷瘤小鼠瘤重,吉西他濱給藥d7,吉西他濱組、黃芪組、吉西他濱+黃芪組各組小鼠平均瘤重兩兩比較差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。吉西他濱給藥d14,吉西他濱組、吉西他濱+黃芪組、荷瘤小鼠空白對照組各組小鼠平均瘤重,黃芪組除外兩兩比較差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 3觀察各實驗組小鼠瘤體生長情況,各荷瘤小鼠組在接種第7天和第9天,差異不具有統(tǒng)計學意義(P0.05)；接種第11天,荷瘤小鼠空白對照組與吉西他濱化療組、吉西他濱+黃芪治療組(黃芪治療組除外)兩兩比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),吉西他濱化療組與黃芪治療組兩兩比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),黃芪治療組與吉西他濱+黃芪治療組兩兩比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。接種第13天,荷瘤小鼠空白對照組與黃芪治療組兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義(p0.05),吉西他濱化療組與吉西他濱+黃芪治療組兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。接種第15天,各組瘤體體積隨時間逐漸增長,除吉西他濱化療組與吉西他濱+黃芪治療組兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義伊0.05),其他各組兩兩比較均有統(tǒng)計學意義伊0.05)。 4各荷瘤小鼠抑瘤率,吉西他濱組、黃芪組、吉西他濱+黃芪組抑瘤率分別為52.92%、45.61%、72.81%。 5HE染色組織病理學觀察可見吉西他濱+黃芪治療組有較多的腫瘤細胞壞死區(qū)。 6酶聯(lián)免疫吸附劑測定,各組荷瘤小鼠d7,各組細胞因子IFN-γ、IL-12的表達呈下降趨勢,Th2型細胞因子IL-4,黃芪組和吉西他濱化療組+黃芪治療組低于其他三組,黃芪組細胞因子IL-10低于正常對照組。各組荷瘤小鼠d14,黃芪治療組和吉西他濱+黃芪治療組細胞因子IL-12、IFN-y表達明顯升高,其中吉西他濱+黃芪治療組細胞因子IL-12、IFN-γ表達高于黃芪組,Th2細胞因子IL-4、IL-10,在黃芪治療組和吉西他濱+黃芪治療組的表達明顯降低,而吉西他濱+黃芪治療組的IL-4、IL-10的表達低于黃芪治療組,各組細胞因子表達比較及兩兩比較均具有統(tǒng)計學意義。 結(jié)論 1成功構(gòu)建了小鼠T細胞淋巴瘤模型,從瘤體體積、抑瘤率、各組腫瘤組織HE(蘇木精一伊紅)染色病理形態(tài)學、Thl/Th2型細胞因子等的變化,證實黃芪聯(lián)合化療藥對T細胞淋巴瘤小鼠機體具有免疫保護作用。 2黃芪能增強小鼠的免疫功能,改善疾病癥狀,最終延長小鼠生存期。
【關鍵詞】：黃芪 吉西他濱 淋巴瘤 免疫
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R285.5;R392
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-12
• 英文縮寫詞索引12-13
• 1 前言13-16
• 2 材料與方法16-25
• 3 結(jié)果25-32
• 4 討論32-40
• 5 結(jié)論40-41
• 附圖41-43
• 參考文獻43-48
• 綜述 黃芪免疫功能保護作用研究進展48-59
• 參考文獻55-59
• 個人簡歷、在校期間論文發(fā)表情況59-61
• 致謝61

【參考文獻】

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本文編號：948680