本文關(guān)鍵詞：湖北釘螺糖原濃度節(jié)律性變化和溶菌酶活力的研究

  更多相關(guān)文章： 湖北釘螺 肝糖原 頭足肌糖原 整體軟體組織糖原 季節(jié)節(jié)律 晝夜節(jié)律 湖北釘螺 溶菌酶 酶活力 抑菌作用

【摘要】：第一部分 湖北釘螺糖原濃度的節(jié)律性變化研究 目的：探索湖北釘螺（Oncomelania hupensis）體內(nèi)不同組織糖原濃度與季節(jié)、晝夜節(jié)律變化的關(guān)系。 方法：于2012年8月到2013年7月（2013年1月未采）每個(gè)月的月初，采集安徽蕪湖青弋江灘上的釘螺，壓碎螺殼，分離肝臟及頭足部肌肉，用濾紙吸干組織外水分，收集肝、頭足肌及整體軟體組織并稱重。用硫酸-蒽酮比色法分別測定湖北釘螺各月份雌、雄螺的肝、頭足肌及整體軟體組織的糖原濃度。2013年6月采集青弋江灘上的釘螺，收集24h內(nèi)每隔2h的釘螺，按前述方法分別測定24h內(nèi)每隔2h的整體軟體組織糖原濃度（不分雌雄）。 結(jié)果：9月至次年的6月，整體軟體組織和肝的糖原濃度逐月下降；6月份時(shí)雌性整體軟體組織糖原濃度最低（0.55μg/mg），而雄性則在4月份降至全年最低值（0.88μg/mg），雌、雄螺整體軟體組織年平均值分別為2.99μg/mg和3.39μg/mg。肝糖原濃度5月份最低（♀=0.29μg/mg，♂=0.22μg/mg），兩者同時(shí)8月達(dá)到最高（♀=2.49μg/mg，♂=2.78μg/mg），雌、雄螺肝糖原濃度年平均值分別為1.09μg/mg和0.89μg/mg。頭足肌糖原濃度從2月份到6月份逐月下降，6月份最低（♀=0.25μg/mg，♂=0.41μg/mg），12月份達(dá)到最高（♀=16.59μg/mg，♂=10.06μg/mg），雌、雄螺頭足肌糖原濃度年平均值分別為7.99μg/mg和6.05μg/mg。整體軟體組織糖原濃度與肝糖原濃度存在線性正相關(guān)關(guān)系（P＜0.05），且具有與肝糖原相似的月份變化規(guī)律。雌、雄螺的頭足肌糖原濃度與整體軟體組織和肝的糖原濃度呈線性正相關(guān)關(guān)系（P＜0.05），頭足肌糖原與整體軟體組織和肝糖原濃度變化規(guī)律有部分相同。湖北釘螺糖原24h內(nèi)從2點(diǎn)開始到24點(diǎn)每隔2h的平均濃度分別為5.227±1.000、4.495±0.100、7.010±0.200、6.175±0.500、6.37±0.700、7.097±0.300、8.242±0.300、5.895±1.500、5.362±1.70、6.5075±0.200、6.220±0.010、6.792±1.4μg/mg，經(jīng)單因素方差分析（F=3.763，P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：湖北釘螺體內(nèi)不同組織糖原濃度隨著季節(jié)、晝夜節(jié)律變化而出現(xiàn)有規(guī)律的變化。 第二部分 湖北釘螺溶菌酶活力的初步研究 目的：探討湖北釘螺體內(nèi)溶菌酶活力、最適pH值、最適溫度、抑菌效果、不同季節(jié)及不同螺齡釘螺體內(nèi)溶菌酶活力差異。 方法：將釘螺軟體組織勻漿后，采用浸提法用Tris-HCl-TritonX-114緩沖液浸提24h，10000×g離心10min；取上清，37℃水浴15min后，2000×g離心10min；取沉淀，置于超濾離心管中截留相對(duì)分子質(zhì)量（Mr）=3000，在4℃下5000×g離心30min，使之濃縮，即得濃縮酶。采用二喹啉甲酸（BCA）法測定其蛋白質(zhì)含量，濁度法測定溶菌酶的活力及溶菌酶的最適pH值、最適溫度；瓊脂擴(kuò)散（K－B）法分別檢查其抑菌作用。 結(jié)果：湖北釘螺體內(nèi)存在溶菌酶，7月份成螺濃縮酶中蛋白質(zhì)含量為3.428mg/ml，總活力為（1520±240）U，比活力為（221±35）U/mg。成螺體內(nèi)濃縮酶液對(duì)底物溶壁微球菌的最適作用pH值為7.0，，最適溫度為50℃，在35℃以上和60℃以下，pH5.0～8.0都有較好的穩(wěn)定性；加入濃縮酶后，溶壁微球菌、痢疾志賀菌實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)抑菌圈，抑菌環(huán)直徑平均分別為10～12、12～15mm，Tris-HCl-TritonX-114緩溶液陰性對(duì)照未見抑菌圈，金黃色葡萄球菌、大腸桿菌及白色念珠菌組均未見抑菌圈；春、夏、秋、冬季釘螺溶菌酶活力分別為（71.33±4.16）、（93.67±7.10）、（150.33±10.01）、（358±35.38） U/mg，冬季活力最高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=144.455，P＜0.01），成螺和幼螺溶菌酶活力分別為（93.67±7.10）U/mg和（69.33±5.03） U/mg，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=4.845，P＜0.05）。 結(jié)論：緩沖液浸提法能從釘螺軟體組織中分離出具有活力溶菌酶；釘螺溶菌酶最適作用pH值為7.0，最適溫度為50℃；溶菌酶對(duì)溶壁微球菌、痢疾志賀菌有抑菌作用，而對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和白色念珠菌無抑菌作用；湖北釘螺成螺體內(nèi)溶菌酶活力隨季節(jié)變化而改變，成螺溶菌酶活力高于幼螺。
【關(guān)鍵詞】：湖北釘螺 肝糖原 頭足肌糖原 整體軟體組織糖原 季節(jié)節(jié)律 晝夜節(jié)律 湖北釘螺 溶菌酶 酶活力 抑菌作用
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R383.2
【目錄】：

• 中文摘要9-12
• Abstract12-15
• 第一部分 湖北釘螺糖原濃度的節(jié)律性變化研究15-30
• 前言15-16
• 材料與方法16-19
• 1 材料16-17
• 1.1 實(shí)驗(yàn)釘螺16
• 1.2 主要試劑16
• 1.3 主要儀器16-17
• 2 方法17-19
• 2.1 軟體組織獲取17
• 2.2 糖原樣品的制備17
• 2.3 0.2%硫酸-蒽酮試劑的配制17
• 2.4 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作17-18
• 2.5 糖原濃度測定18
• 2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析18-19
• 結(jié)果19-23
• 1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線19
• 2 湖北釘螺肝糖原濃度的季節(jié)變化19-20
• 3 湖北釘螺頭足肌糖原濃度的季節(jié)變化20-21
• 4 湖北釘螺整體軟體組織糖原濃度的季節(jié)變化21-22
• 5 湖北釘螺軟體組織糖原濃度的晝夜節(jié)律變化22-23
• 討論23-26
• 結(jié)論26-27
• 參考文獻(xiàn)27-30
• 第二部分 湖北釘螺溶菌酶活力的初步研究30-50
• 前言30-31
• 材料與方法31-38
• 1 材料31-35
• 1.1 釘螺來源31
• 1.2 主要儀器31
• 1.3 主要試劑31
• 1.4 培養(yǎng)基及試劑的配制31-32
• 1.4.1 沙氏培養(yǎng)基配方31
• 1.4.2 溶壁微球菌培養(yǎng)基配方31-32
• 1.4.3 大腸桿菌培養(yǎng)基配方32
• 1.4.4 PBS 緩沖液32
• 1.4.5 Tis-HCl-Triton X-1142432
• 1.5 無菌濾紙片的制作32-35
• 2 方法35-38
• 2.1 軟體組織的獲取35
• 2.2 粗酶的制備35
• 2.3 濃縮酶的制備35
• 2.4 蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線制作35-36
• 2.5 蛋白質(zhì)含量的測定36
• 2.6 溶菌酶活力測定36
• 2.7 不同 pH 值下溶菌酶活力36-37
• 2.8 不同溫度下溶菌酶活力37
• 2.9 抑菌實(shí)驗(yàn)37
• 2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析37-38
• 結(jié)果38-44
• 1 蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線38
• 2 7 月份濃縮酶蛋白質(zhì)含量38
• 3 7 月份濃縮酶中的溶菌酶活力38-39
• 4 7 月份濃縮酶中的溶菌酶抑菌實(shí)驗(yàn)39-41
• 5 pH 值變化對(duì)溶菌酶活力的影響41-42
• 6 溫度變化對(duì)溶菌酶活力的影響42
• 7 不同季節(jié)成螺濃縮酶蛋白質(zhì)含量42
• 8 不同季節(jié)釘螺成螺溶菌酶活力比較42-43
• 9 7 月份成、幼螺溶菌酶活力比較43-44
• 討論44-46
• 結(jié)論46-47
• 參考文獻(xiàn)47-50
• 綜述 軟體動(dòng)物糖原的研究進(jìn)展50-63
• 摘要50
• Abstract50
• 1 糖原在軟體動(dòng)物的分布50-51
• 2 影響軟體動(dòng)物糖原的因素51-52
• 3 軟體動(dòng)物糖原的意義52-53
• 4 軟體動(dòng)物糖原的結(jié)構(gòu)53
• 5 糖原的代謝53-56
• 5.1 糖原合酶54-55
• 5.2 糖原磷酸化酶55-56
• 6 軟體動(dòng)物糖原的國內(nèi)外研究現(xiàn)狀56-58
• 參考文獻(xiàn)58-63
• 附錄63-76
• 作者簡介及讀研期間主要科研成果76-77
• 致謝77

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王文達(dá);實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)片山湖北釘螺的新法[J];國外醫(yī)學(xué)(寄生蟲病分冊(cè));1981年04期

2 張儀,GeorgeM.Davis,劉和香,馮婷;應(yīng)用同工酶技術(shù)研究我國湖北釘螺(腹足綱:麂眼螺超科:圓口螺科)不穩(wěn)定螺群內(nèi)的遺傳變異(續(xù))(英文)[J];中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;2000年02期

3 胡纓,黎學(xué)銘;湖北釘螺分類學(xué)研究進(jìn)展[J];廣西預(yù)防醫(yī)學(xué);2005年01期

4 周書林;;湖北釘螺體內(nèi)酚氧化酶及其組織學(xué)定位[J];中國血吸蟲病防治雜志;2006年04期

5 李石柱;王強(qiáng);錢穎駿;張儀;周曉農(nóng);;中國大陸湖北釘螺種下分化研究進(jìn)展[J];中國血吸蟲病防治雜志;2009年02期

6 李石柱;王藝秀;劉琴;呂山;王強(qiáng);吳纓;張儀;周曉農(nóng);;湖北釘螺線粒體基因組全序列測定研究[J];中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;2009年04期

7 李石柱;王藝秀;馬雅軍;王強(qiáng);劉琴;吳纓;呂山;張儀;周曉農(nóng);;湖北釘螺多態(tài)微衛(wèi)星DNA位點(diǎn)篩選和特征初步分析[J];中國血吸蟲病防治雜志;2010年02期

8 馬琳;趙玲;李石柱;尤平;周曉農(nóng);;景觀遺傳學(xué)及其在湖北釘螺研究中的應(yīng)用[J];中國血吸蟲病防治雜志;2010年06期

9 馬琳;李石柱;楊頻;尤平;周曉農(nóng);;湖北釘螺基因組5種抽提方法的比較[J];中國病原生物學(xué)雜志;2011年02期

10 夏英定;汪世平;劉雪琴;高冬梅;李慶華;吳平;陳秀春;馮其梅;周云飛;張樹菊;;湖北釘螺人工感染、室內(nèi)傳代與模擬野外飼養(yǎng)的研究(英文)[J];中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2011年01期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 歐陽頤;黎學(xué)銘;林睿;胡纓;張鴻滿;;廣西地理株湖北釘螺基因變異及種群變遷[A];全國寄生蟲學(xué)與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

2 胡相;;安徽省宣城地區(qū)湖北釘螺調(diào)查分析[A];中國動(dòng)物學(xué)會(huì)、中國海洋湖沼學(xué)會(huì)貝類學(xué)分會(huì)第三次代表大會(huì)暨第四次學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];1988年

3 李石柱;王強(qiáng);錢穎駿;周曉農(nóng);;湖北釘螺指名亞種不同地理群體遺傳多樣性研究[A];中國動(dòng)物學(xué)會(huì)·中國海洋湖沼學(xué)會(huì)貝類學(xué)分會(huì)第九次會(huì)員代表大會(huì)暨第十五次學(xué)術(shù)討論會(huì)會(huì)議摘要集[C];2011年

4 彭德華;;湖北釘螺生殖細(xì)胞的透射電鏡觀察[A];中國動(dòng)物學(xué)會(huì)、中國海洋湖沼學(xué)會(huì)貝類學(xué)分會(huì)第三次代表大會(huì)暨第四次學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];1988年

5 張儀;劉和香;馮婷;馮正;;中國湖北釘螺(湖北亞種)實(shí)驗(yàn)株釘螺COI、Cyb基因分析[A];貝類學(xué)會(huì)第七次會(huì)員代表大會(huì)暨第十一次學(xué)術(shù)討論會(huì)摘要[C];2003年

6 彭延;蔣明森;鐘沁萍;桂建芳;董惠芬;;湖北釘螺細(xì)胞原代培養(yǎng)的初步研究[A];中國動(dòng)物學(xué)會(huì)全國第九次寄生蟲學(xué)學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2003年

7 朱丹;周曉農(nóng);吳曉華;王強(qiáng);;META&MBO復(fù)方劑殺滅湖北釘螺作用的研究[A];貝類學(xué)會(huì)第七次會(huì)員代表大會(huì)暨第十一次學(xué)術(shù)討論會(huì)摘要[C];2003年

8 劉松泉;;湖北釘螺自然消長及血吸蟲感染性的時(shí)間分布規(guī)律[A];中國動(dòng)物學(xué)會(huì)、中國海洋湖沼學(xué)會(huì)貝類學(xué)分會(huì)第三次代表大會(huì)暨第四次學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];1988年

9 朱丹;張儀;劉和香;周曉農(nóng);張功華;張世清;操治國;吳維鐸;李文新;;HL殺滅湖北釘螺效果觀察[A];中國動(dòng)物學(xué)會(huì)、中國海洋湖沼學(xué)會(huì)貝類學(xué)分會(huì)第八次會(huì)員代表大會(huì)暨第十三次全國貝類學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2007年

10 馬憲亮;張儀;;湖北釘螺硫氧還蛋白過氧化物酶基因全長cDNA克隆、表達(dá)與純化[A];中國動(dòng)物學(xué)會(huì)·中國海洋湖沼學(xué)會(huì)貝類學(xué)分會(huì)第九次會(huì)員代表大會(huì)暨第十五次學(xué)術(shù)討論會(huì)會(huì)議摘要集[C];2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 李石柱;應(yīng)用現(xiàn)代生物信息技術(shù)對(duì)湖北釘螺遺傳多樣性的研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2009年

2 汪浩;湖北釘螺慢性感染階段免疫防御相關(guān)基因的篩選和鑒定[D];武漢大學(xué);2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 馬琳;中國大陸湖北釘螺不同地理景觀群體遺傳變異分析[D];陜西師范大學(xué);2011年

2 崔斌;長江中下游地區(qū)湖北釘螺小尺度景觀群體的種群遺傳結(jié)構(gòu)研究[D];陜西師范大學(xué);2014年

3 黃春蘭;湖北釘螺糖原濃度節(jié)律性變化和溶菌酶活力的研究[D];皖南醫(yī)學(xué)院;2014年

4 蔡新;食物與溫度對(duì)湖北釘螺生長發(fā)育及繁殖率的影響研究[D];湖北大學(xué);2012年

5 白潔;云南省血吸蟲病流行區(qū)湖北釘螺COI基因序列分析[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2008年

6 郭俊濤;湖北釘螺微衛(wèi)星遺傳變異的小尺度空間自相關(guān)分析[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

本文編號(hào)：947582