本文關(guān)鍵詞：大鼠腎小球分離和離體培養(yǎng)方法的建立

  更多相關(guān)文章： 大鼠腎小球 腎小球分離 離體培養(yǎng)

【摘要】：本文旨在建立大鼠腎小球分離和離體培養(yǎng)的實驗方法。應用差異過篩法分離技術(shù)分離大鼠腎小球,用Ⅳ型膠原酶消化法去除Bowman囊,用相差顯微鏡觀察腎小球純度和形態(tài)結(jié)構(gòu),臺盼藍拒染法檢測腎小球的活性,雙標免疫熒光技術(shù)鑒定腎小球固有細胞的標志蛋白nephrin和α-SMA的表達分布,熒光顯微鏡和酶標儀檢測Ang Ⅱ?qū)﹄x體培養(yǎng)腎小球ROS水平的影響,real-time PCR方法觀察離體培養(yǎng)的腎小球中TGF-β1 mRNA和collagen Ⅳ mRNA的水平。結(jié)果顯示,離體培養(yǎng)的腎小球結(jié)構(gòu)完整,無包囊,毛細血管袢結(jié)構(gòu)清晰;離體培養(yǎng)48 h后,腎小球內(nèi)細胞仍具有活性;激光共聚焦顯微鏡下可見腎小球內(nèi)足細胞和間質(zhì)細胞的標志蛋白nephrin和α-SMA表達清晰;給予離體培養(yǎng)的腎小球Ang Ⅱ刺激后,腎小球ROS的產(chǎn)生明顯增加,TGF-β1和collagen Ⅳ mRNA水平升高。以上結(jié)果提示,大鼠腎小球的分離及離體培養(yǎng)技術(shù)建立成功,該分離方法獲得的腎小球可以進行離體培養(yǎng)及藥物作用觀察,為基礎(chǔ)和臨床研究提供實驗技術(shù)和研究手段。
【作者單位】： 復旦大學上海醫(yī)學院生理與病理生理學系;
【關(guān)鍵詞】： 大鼠腎小球 腎小球分離 離體培養(yǎng)
【基金】：supported by the National Natural Science Foundation of China(No.81470591,81170636)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 腎單位是腎臟尿生成的基本功能單位,由腎小μm,由大量的毛細血管袢組成,似一團相互分支又球和腎小管組成,腎小球是原尿生成的部位,具有吻合的血管團,毛細血管袢外又被腎小囊(Bowman’s獨特的結(jié)構(gòu)。腎小球形似球形,直徑約為150~250capsule)所包被[1]。腎小球具有濾過血漿成分生

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 呂楊;謝院生;張術(shù)佳;李曉帆;謝振聲;楊福全;陳香美;;利用雙向電泳技術(shù)分析正常大鼠腎小球蛋白質(zhì)組方法的建立[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2010年03期

2 趙金垣,王世俊;慢性汞暴露大鼠腎小球的透射電鏡研究[J];北京醫(yī)科大學學報;1987年06期

3 王明青;竇國祥;尹蓮芳;;降氮湯對5/6腎切除大鼠腎小球硬化的防治作用[J];中醫(yī)雜志;2004年04期

4 尹蓮芳;胡麗華;竇國祥;;中藥降氮湯對5/6腎切除大鼠腎小球結(jié)締組織生長因子表達的影響[J];東南大學學報(醫(yī)學版);2006年05期

5 陳惠萍;楊俊偉;王建平;朱茂艷;黎磊石;;大黃提取物Ⅰ號對糖尿病大鼠腎小球形態(tài)改變的影響及定量分析[J];中國中西醫(yī)結(jié)合雜志;1996年S1期

6 李保羅,陸德琴,戴大英,龍義國,孫渝;高蛋白負荷大鼠腎小球圖像分析[J];貴陽醫(yī)學院學報;1998年02期

7 任勃，陶慶豐，王乃欣，，張瑞珠;大鼠腎小球微循環(huán)活體觀察實驗研究[J];中國應用生理學雜志;1996年01期

8 盧遠航;鄧安國;李寧;楊曉;劉建社;;血管生成素在柔紅霉素誘導大鼠腎小球硬化中的變化及意義[J];腎臟病與透析腎移植雜志;2006年01期

9 李雪軍,張賽南,陳小松;大黃對增生性腎小球腎炎大鼠腎小球細胞外基質(zhì)的影響[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志;1999年07期

10 肖建武,易著文,吳小川;環(huán)孢素A對大鼠腎小球系膜細胞增生水平的影響[J];醫(yī)學臨床研究;2002年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 董興剛;楊海春;殷祥雷;顧建新;周江華;林善錟;;漢防已甲素對腎小球硬化大鼠腎小球細胞外基質(zhì)的作用及機理的研究[A];第六屆全國中西醫(yī)結(jié)合腎臟病學術(shù)會議論文匯編[C];2000年

2 劉玉寧;郭立中;王立紅;;益氣養(yǎng)陰,化瘀降濁法防治糖尿病腎病大鼠腎小球硬化的實驗研究[A];第七屆全國中西醫(yī)結(jié)合腎臟病會議論文匯編[C];2003年

3 董興剛;楊海春;殷祥雷;顧建新;周江華;林善錟;;漢防已甲素對腎小球硬化大鼠腎小球細胞外基質(zhì)的作用及機理的研究[A];第六屆全國中西醫(yī)結(jié)合腎臟病學術(shù)會議論文匯編[C];2000年

4 張磊;張愛平;丁堯海;王艷俠;姜曉宇;張穎瑋;石書梅;;PDGF對大鼠腎小球基質(zhì)表達的影響[A];中華醫(yī)學會腎臟病學分會2006年學術(shù)年會論文集[C];2006年

5 張廷星;晉學慶;吳可貴;許昌聲;陳小明;;雌激素對SD大鼠腎小球硬化的影響[A];中華醫(yī)學會心血管病分會第八次全國心血管病學術(shù)會議匯編[C];2004年

6 賴凌云;陳靖;郝傳明;林善錟;顧勇;;醛固酮對大鼠腎小球硬化的影響及機制探討[A];2007年浙滬兩地腎臟病學術(shù)年會資料匯編[C];2007年

7 何立群;高建東;鄭平東;;腎衰沖劑緩解5/6腎切除大鼠腎小球硬化的研究[A];第六屆全國中西醫(yī)結(jié)合腎臟病學術(shù)會議論文匯編[C];2000年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 余杰;SIK1在糖尿病腎病大鼠腎小球早期病變中的作用及機制研究[D];華中科技大學;2013年

2 張麗芬;疏利少陽標本兼治法之腎疏寧防治大鼠腎小球硬化及其作用機理的實驗研究[D];天津中醫(yī)學院;2004年

3 張圓圓;血管緊張素Ⅱ和12-脂氧化酶的相互作用對2型糖尿病腎病蛋白尿影響的機制研究[D];吉林大學;2015年

4 曹文富;糖尿病大鼠腎小球與系膜細胞CTGF、ECM表達變化及Losartan的干預作用研究[D];重慶醫(yī)科大學;2004年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 鐔秋_g;補脾腎活血泄?jié)嶂兴帉Υ笫竽I小球系膜細胞增殖和調(diào)亡的影響[D];第一軍醫(yī)大學;2006年

2 高青松;12-脂氧化酶對糖尿病腎病大鼠腎小球內(nèi)ACE和血管緊張素Ⅱ表達水平的影響[D];吉林大學;2011年

3 裴娟;全反式維甲酸延緩大鼠腎小球硬化慢性進展的實驗研究[D];廣西醫(yī)科大學;2007年

4 盧祖禮;腎安Ⅰ號對大鼠腎小球系膜細胞增殖及TGF-β_1、HGF表達影響的實驗研究[D];湖北中醫(yī)學院;2005年

5 郭麗君;糖尿病大鼠腎小球NF-κB、ICAM-1的表達及其干預研究[D];山西醫(yī)科大學;2005年

6 賈倩倩;小白菊內(nèi)酯及其衍生物對高糖誘導的大鼠腎小球系膜細胞增殖及NF-κB、MCP-1表達的影響[D];南方醫(yī)科大學;2013年

7 岳欣閣;糖尿病大鼠腎小球IL-18、TNF-α、ICAM-1表達及干預研究[D];鄭州大學;2007年

本文編號：941612