本文關(guān)鍵詞：人血清中衰老相關(guān)循環(huán)microRNA表達(dá)譜

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【摘要】：研究背景：微小核糖核酸(microRNAs)是一類長度約為18～25個(gè)核苷酸的非編碼單鏈小分子RNA。血清miRNAs的發(fā)現(xiàn)以及他們?cè)诟鞣N疾病患者中特異的表達(dá)譜使他們成為具有吸引力的、新型的用于診斷的非侵入性生物標(biāo)志物。雖然血清小分子核糖核酸(microRNA)在診斷各種疾病中發(fā)揮重要作用, 人們很少知道循環(huán)microRNA與年齡的相關(guān)性。我們調(diào)查研究了四組123例不同年齡的健康個(gè)體血清microRNA表達(dá)譜,以鑒定隨衰老改變的循環(huán)microRNA,然后我們建立了衰老的血清生物標(biāo)志物。研究方法：Solexa測(cè)序技術(shù)用于初始的microRNA篩選,我們收集了21例平均年齡分別為22歲(y)的健康中國受試者(11例男性和10例女性)的血清樣本混合匯集成一組血清樣品庫,同樣,10例平均年齡為40 y的血清分為第二組,10例59y和9例70y各分為第三組和第四組。 另外,我們還獲得了123例正常人的血清樣本,每一個(gè)年齡段約31例。定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-qPCR)用于測(cè)定血清中隨年齡改變的microRNA的濃度。研究結(jié)果：Solexa測(cè)序提示有10個(gè)microRNA在衰老過程中表達(dá)顯著改變。RT-qPCR分析確定了5個(gè)隨年齡增長表達(dá)下調(diào)的microRNA (miR-29b, miR-106 b, miR-130b, miR-142-5p和miR-340)及3個(gè)隨年齡增長表達(dá)上調(diào)的microRNA (miR-92 a, miR-222和miR-375)。最后,我們對(duì)這些衰老相關(guān)miRNA靶基因的蛋白質(zhì)分類、相關(guān)疾病、分子功能和參與信號(hào)通路途徑的進(jìn)行進(jìn)一步分析, 這些結(jié)果可應(yīng)用于揭示衰老相關(guān)的miRNA在病理和生理過程中的調(diào)節(jié)作用。研究結(jié)論：血清microRNA的定量研究提供了一種新穎的、非創(chuàng)傷性的鑒定衰老過程的方法。我們的生物信息學(xué)分析為遺傳咨詢和未來潛在發(fā)展新的衰老治療方法提供理論基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：衰老 血清microRNA Solexa測(cè)序 RT-PCR 經(jīng)典信號(hào)通路
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R339.38;Q78
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 第一章 綜述部分9-18
• 一. miRNA的定義及發(fā)現(xiàn)歷程10-11
• 1.1 miRNA的定義及特點(diǎn)10
• 1.2 miRNA的發(fā)現(xiàn)歷程10-11
• 1.3 miRNA的重要性11
• 1.4 miRNA的命名11
• 二. miRNA的加工成熟過程及作用機(jī)制11-16
• 2.1 miRNA的加工成熟過程12-13
• 2.2 miRNA指導(dǎo)翻譯抑制13-14
• 2.3 靶基因的識(shí)別14-16
• 三、衰老與miRNA的研究進(jìn)展16-18
• 3.1 衰老的基本概況16
• 3.2 衰老與miRNA的關(guān)系16
• 3.3 衰老相關(guān)miRNA的線蟲模型研究16-17
• 3.4 衰老相關(guān)miRNA的小鼠模型研究17
• 3.5 人衰老相關(guān)miRNA的組織模型研究17-18
• 第二章 實(shí)驗(yàn)部分18-41
• 一. 引言19
• 二. 實(shí)驗(yàn)材料和方法19-25
• 2.1 研究對(duì)象與血樣收集19-20
• 2.2 儀器與試劑20-21
• 2.3 血清中RNA的抽提21
• 2.4 Solexa測(cè)序21-22
• 2.5 實(shí)時(shí)熒光qRT-PCR定量檢測(cè)microRNA22-24
• 2.6 生物信息學(xué)分析24-25
• 2.7 數(shù)值統(tǒng)計(jì)分析25
• 三. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-38
• 3.1 Solexa測(cè)序結(jié)果25-26
• 3.2 衰老相關(guān)血清microRNA表達(dá)譜的qRT-PCR驗(yàn)證26-29
• 3.3 衰老相關(guān)miRNA的靶基因分析29-38
• 四. 討論38-41
• 參考文獻(xiàn)41-44
• PUBLICATIONS44
• 專利44-45
• 致謝45-46

【共引文獻(xiàn)】

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4 楊q，

本文編號(hào)：935605