本文關(guān)鍵詞：AIPC細(xì)胞模型建立及LSD1在AI表型轉(zhuǎn)化中的作用機(jī)制

  更多相關(guān)文章： 前列腺癌 雄激素非依賴性（AI） 賴氨酸特異性去甲基化酶1（LSD1） 激素受體（AR） p53

【摘要】：目的:建立雄激素非依賴性前列腺癌LNCaP-AI細(xì)胞模型，初步探討LSD1在前列腺癌獲得AI表型中的作用機(jī)制。 方法:LNCaP細(xì)胞在含10%活性炭/葡聚糖處理的胎牛血清的無(wú)酚紅RPMI1640培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)3個(gè)月。在此期間，動(dòng)態(tài)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)變化。CCK-8法檢測(cè)LNCaP-AI與LNCaP細(xì)胞增殖情況。RT-PCR檢測(cè)LNCaP-AI細(xì)胞與LNCaP細(xì)胞中基因AR、前列腺特異性抗原（prostate-specificantigen,PSA）、LSD1、p53、p21、Bax、Bcl-2轉(zhuǎn)錄水平差異。WesternBlot檢測(cè)LNCaP-AI細(xì)胞與LNCaP細(xì)胞中的基因AR、PSA、LSD1、p53、p21、Bax、Bcl-2蛋白表達(dá)水平差異。ELISA法分析LNCaP-AI細(xì)胞與LNCaP細(xì)胞分泌蛋白PSA的能力。免疫共沉淀法（Co-Immunoprecipitation,Co-IP）分析LNCaP-AI細(xì)胞中LSD1與AR、p53的相互作用。 結(jié)果:在去雄激素誘導(dǎo)過(guò)程中，LNCaP細(xì)胞生長(zhǎng)受到抑制并出現(xiàn)神經(jīng)內(nèi)分泌樣狀態(tài)。經(jīng)過(guò)3個(gè)月，LNCaP細(xì)胞擺脫了神經(jīng)內(nèi)分泌樣狀態(tài)并恢復(fù)快速增殖。CCK-8證實(shí)LNCaP-AI細(xì)胞在去雄激素培養(yǎng)基中能夠快速生長(zhǎng)，，而LNCaP細(xì)胞生長(zhǎng)受到持續(xù)抑制。RT-PCR與WesternBlot表明，與LNCaP細(xì)胞相比，LNCaP-AI細(xì)胞中基因PSA表達(dá)明顯下調(diào)而基因AR表達(dá)上調(diào)。ELISA顯示，LNCaP-AI細(xì)胞群落在去雄激素培養(yǎng)基中分泌PSA總量明顯高于LNCaP細(xì)胞群落。RT-PCR與WesternBlot分析表明，與LNCaP細(xì)胞相比，LNCaP-AI細(xì)胞中基因LSD1表達(dá)明顯上調(diào)。Co-IP分析提示，LNCaP-AI細(xì)胞中存在LSD1與AR、p53的直接相互作用。進(jìn)一步用RT-PCR與WesternBlot分析顯示，與LNCaP細(xì)胞相比，LNCaP-AI細(xì)胞中基因p53、p21、Bax表達(dá)明顯下調(diào)，而基因Bcl-2表達(dá)顯著增加。 結(jié)論:對(duì)LNCaP細(xì)胞進(jìn)行3個(gè)月的去雄激素誘導(dǎo)，獲得AIPC細(xì)胞模型。雄激素非依賴性與依賴性前列腺癌中，LSD1表達(dá)存在明顯差異。在去雄激素條件下，LSD1表達(dá)上調(diào)：一方面可能通過(guò)活化AR通路，促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞適應(yīng)去雄激素條件；另外，可能通過(guò)抑制p53凋亡通路促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞抵抗去雄激素性凋亡而存活。LSD1可能通過(guò)正調(diào)控AR通路和負(fù)調(diào)控P53通路而在前列腺癌AI表型轉(zhuǎn)化中發(fā)揮重要作用。
【關(guān)鍵詞】：前列腺癌 雄激素非依賴性（AI） 賴氨酸特異性去甲基化酶1（LSD1） 激素受體（AR） p53
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 主要縮略詞表5-6
• 前言6-7
• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 引言11-13
• 材料與方法13-27
• 結(jié)果27-33
• 討論33-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-44
• 綜述44-56
• [參考文獻(xiàn)]51-56
• 致謝56

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：922601