定向誘導分化環(huán)境下骨髓間充質(zhì)干細胞向成骨及成脂細胞的分化
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【摘要】:背景:骨髓間充質(zhì)干細胞屬于骨髓中的非造血干細胞,能夠在不同的條件下誘導分化為軟骨細胞、骨細胞以及脂肪細胞等,是最有前途的組織工程種子細胞。目的:探討定向誘導分化環(huán)境下骨髓間充質(zhì)干細胞向成骨細胞及脂肪細胞分化的關(guān)系。方法:無菌抽取日本大耳兔骨髓,采用密度梯度離心法和細胞貼壁法分離、純化出骨髓間充質(zhì)干細胞,分別采用成脂誘導培養(yǎng)基和成骨誘導培養(yǎng)基進行誘導培養(yǎng),培養(yǎng)后不同時間點進行蘇丹Ⅳ染色、Von Kossa染色、堿性磷酸酶活性檢測,比較細胞成脂和成骨率。以正常DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞為對照組。結(jié)果與結(jié)論:骨髓間充質(zhì)干細胞經(jīng)過7 d成脂誘導后細胞漿開始出現(xiàn)小脂滴、細胞無序,培養(yǎng)21 d后細胞漿內(nèi)形成高折光性的脂滴。蘇丹Ⅳ染色結(jié)果顯示:骨髓間充質(zhì)干細胞克隆中心的細胞漿內(nèi)存在大量的顆粒狀紅色脂滴,對照組僅5%骨髓間充質(zhì)干細胞分化為脂肪細胞。骨髓間充質(zhì)干細胞經(jīng)過7 d成骨誘導后細胞逐漸匯合成鋪路石狀,并且形成多個結(jié)節(jié);培養(yǎng)14 d后能夠看見褐色點狀礦化結(jié)節(jié)中心;培養(yǎng)21 d后形成小片狀礦化結(jié)節(jié)。成骨誘導實驗組成骨率為40%,成脂率為20%,顯著高于對照組(成骨率為5%,成脂率為5%)。結(jié)果提示在適當?shù)沫h(huán)境下骨髓間充質(zhì)干細胞能夠一部分轉(zhuǎn)化為脂肪細胞,另一部轉(zhuǎn)化為骨細胞,并且二者存在一定的聯(lián)系,即分化的脂肪細胞多,骨細胞則少;反之分化的脂肪細胞少,骨細胞則多。
【作者單位】: 西安交通大學醫(yī)學院附屬紅會醫(yī)院脊柱外科;
【關(guān)鍵詞】: 骨髓 間質(zhì)干細胞 細胞分化 干細胞 骨髓干細胞 誘導分化 骨髓間充質(zhì)干細胞 成骨細胞 脂肪細胞
【基金】:陜西省科技廳科技惠民專項(2013k14-02-13)~~
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 0引言Introduction嚴格遵守相關(guān)標準進行飼養(yǎng),合格證號為SCXK(粵)骨髓是機體最大的干細胞庫,包括了造血干細胞、間2007-0010。實驗過程中對動物的處置符合2009年《Ethical充質(zhì)干細胞等,它是一種具有多向分化潛能的成體干細胞,issues in animal experimentation》相關(guān)動物倫理
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本文編號:915382
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