本文關鍵詞：Caco-2細胞TLR2和TLR4對微小隱孢子蟲刺激信號的識別

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【摘要】：目的研究Caco-2細胞在微小隱孢子蟲感染后TLRs的激活情況。方法微小隱孢子蟲子孢子刺激Caco-2細胞后,通過qRT-PCR檢測TLRs mRNA的表達水平,采用Western blot檢測NF-κB激活情況,采用ELISA檢測IL-8的分泌量。同時,在微小隱孢子蟲子孢子感染Caco-2細胞前加入TLR2或TLR4的抑制劑,檢測NF-κB激活情況以及IL-8的分泌情況。結果將Caco-2細胞感染微小隱孢子蟲子孢子2h后,提取的RNA反轉成cDNA,采用普通PCR進行檢測,結果表明Caco-2能夠表達所有10種人TLRs;qRT-PCR檢測刺激組與對照組TLRs表達量,經spss分析,p0.01,刺激組TLR2和TLR4的表達量較對照組顯著上調。對Caco-2細胞感染微小隱孢子蟲子孢子1h后提取的細胞全蛋白進行Western blot,顯示NF-κB激活水平較對照組顯著上調;Caco-2細胞感染微小隱孢子蟲子孢子12h后收集的細胞培養(yǎng)上清經ELISA檢測,IL-8分泌量由刺激前的65.23pg/ml顯著上調至488.23pg/ml。而在微小隱孢子蟲子孢子感染Caco-2細胞前加入TLR2或TLR4的抑制劑,NF-κB激活水平和IL-8的分泌量較未加抑制劑感染組均顯著下調,IL-8的分泌量分別降至204.02pg/ml(抑制TLR2活性后)和142.79pg/ml(抑制TLR4活性后)。結論 Caco-2細胞的TLR2和TLR4參與對微小隱孢子蟲子孢子的識別。
【作者單位】： 吉林大學動物醫(yī)學學院;廣東省農業(yè)科學院動物衛(wèi)生研究所;
【關鍵詞】： 微小隱孢子蟲 Caco- TLR NF-Κb
【基金】：國家科技支撐計劃項目(No.2007BAD40B05) 廣州市科技計劃(No.2013J4100124)
【分類號】：R382.3
【正文快照】： ***微小隱孢子蟲是一種寄生在腸道上皮細胞中的頂復門原蟲,常�？赏ㄟ^污染水源而造成所致疾病隱孢子蟲病的暴發(fā)。同時,隱孢子蟲病也是艾滋病患者、器官移植等處于免疫抑制狀態(tài)的患者的致死因素之一[1,2]。1993在美國密爾沃基市暴發(fā)隱孢子蟲病,居民感染率達26%,造成了巨大的損

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本文編號：914979