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Caco-2細(xì)胞TLR2和TLR4對微小隱孢子蟲刺激信號的識別

發(fā)布時間:2017-09-25 03:03

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【摘要】:目的研究Caco-2細(xì)胞在微小隱孢子蟲感染后TLRs的激活情況。方法微小隱孢子蟲子孢子刺激Caco-2細(xì)胞后,通過qRT-PCR檢測TLRs mRNA的表達(dá)水平,采用Western blot檢測NF-κB激活情況,采用ELISA檢測IL-8的分泌量。同時,在微小隱孢子蟲子孢子感染Caco-2細(xì)胞前加入TLR2或TLR4的抑制劑,檢測NF-κB激活情況以及IL-8的分泌情況。結(jié)果將Caco-2細(xì)胞感染微小隱孢子蟲子孢子2h后,提取的RNA反轉(zhuǎn)成cDNA,采用普通PCR進(jìn)行檢測,結(jié)果表明Caco-2能夠表達(dá)所有10種人TLRs;qRT-PCR檢測刺激組與對照組TLRs表達(dá)量,經(jīng)spss分析,p0.01,刺激組TLR2和TLR4的表達(dá)量較對照組顯著上調(diào)。對Caco-2細(xì)胞感染微小隱孢子蟲子孢子1h后提取的細(xì)胞全蛋白進(jìn)行Western blot,顯示NF-κB激活水平較對照組顯著上調(diào);Caco-2細(xì)胞感染微小隱孢子蟲子孢子12h后收集的細(xì)胞培養(yǎng)上清經(jīng)ELISA檢測,IL-8分泌量由刺激前的65.23pg/ml顯著上調(diào)至488.23pg/ml。而在微小隱孢子蟲子孢子感染Caco-2細(xì)胞前加入TLR2或TLR4的抑制劑,NF-κB激活水平和IL-8的分泌量較未加抑制劑感染組均顯著下調(diào),IL-8的分泌量分別降至204.02pg/ml(抑制TLR2活性后)和142.79pg/ml(抑制TLR4活性后)。結(jié)論 Caco-2細(xì)胞的TLR2和TLR4參與對微小隱孢子蟲子孢子的識別。
【作者單位】: 吉林大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院;廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動物衛(wèi)生研究所;
【關(guān)鍵詞】微小隱孢子蟲 Caco- TLR NF-Κb
【基金】:國家科技支撐計劃項目(No.2007BAD40B05) 廣州市科技計劃(No.2013J4100124)
【分類號】:R382.3
【正文快照】: ***微小隱孢子蟲是一種寄生在腸道上皮細(xì)胞中的頂復(fù)門原蟲,常常可通過污染水源而造成所致疾病隱孢子蟲病的暴發(fā)。同時,隱孢子蟲病也是艾滋病患者、器官移植等處于免疫抑制狀態(tài)的患者的致死因素之一[1,2]。1993在美國密爾沃基市暴發(fā)隱孢子蟲病,居民感染率達(dá)26%,造成了巨大的損

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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9 李和剛;張寶s,

本文編號:914979


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