本文關(guān)鍵詞：Necrostatin-1對(duì)腦外傷后自噬及凋亡的影響

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【摘要】：目的：在小鼠腦外傷模型上研究程序性壞死特異性抑制劑necrostatin-1對(duì)腦外傷導(dǎo)致的自噬、凋亡、組織損傷和神經(jīng)功能損害的影響。 方法：采用改良的自由落體裝置，建立成熟雄性小鼠定量腦外傷(traumatic braininjury, TBI)模型。在腦外傷前通過單側(cè)側(cè)腦室注射Necrostatin-1(NEC-1)給藥，并在傷后不同時(shí)間分別于處死前1h腹腔注射碘化丙啶(propidium iodide, PI)，采用體視學(xué)顯微鏡觀察并計(jì)數(shù)各組損傷及其周邊區(qū)(皮質(zhì)與海馬)PI陽性細(xì)胞數(shù)量。為了進(jìn)一步確證PI陽性細(xì)胞能否代表腦外傷引起的細(xì)胞死亡和丟失，我們利用組織缺損體積(lesion volume, LV)對(duì)TBI后腦組織損傷程度進(jìn)行評(píng)估；同時(shí)利用行為學(xué)試驗(yàn)(Motor Test和Morris水迷宮試驗(yàn))評(píng)估TBI后各組小鼠的運(yùn)動(dòng)和學(xué)習(xí)記憶的情況，以探究腦外傷導(dǎo)致的組織學(xué)損傷能否導(dǎo)致神經(jīng)功能損害。為了進(jìn)一步探究NEC-1是否能夠影響腦外傷后自噬和凋亡的活性，我們利用免疫印記法分別檢測(cè)了自噬活性相關(guān)蛋白(Beclin-1，LC3，，P62)和凋亡活性相關(guān)(Bcl-2，caspase-3)的表達(dá)水平。同時(shí)為了進(jìn)一步確證NEC-1對(duì)腦外傷后自噬和凋亡活性的影響，我們也利用了自噬及凋亡的抑制劑(3MA，Z-VAD)聯(lián)合NEC-1檢測(cè)了caspase-3和LC3-II的表達(dá)。 結(jié)果：NEC-1減少了TBI引起的細(xì)胞丟失數(shù)量、組織缺損體積，并降低了TBI后造成的神經(jīng)功能損害程度。免疫印跡結(jié)果表明NEC-1能夠降低TBI后自噬相關(guān)蛋白Beclin-1、LC3-II的表達(dá)和凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、caspase-3的活性。聯(lián)合使用3MA和Z-VAD進(jìn)一步證實(shí)了NEC-1的作用，并且表明在TBI后24小時(shí)3MA可以同時(shí)降低LC3-II和caspase-3的表達(dá)，而Z-VAD只降低了caspase-3表達(dá)卻增加了LC3-II的轉(zhuǎn)化。 結(jié)論：NEC-1能夠抑制TBI引起的自噬和凋亡活性上調(diào)，并且NEC-1對(duì)于自噬和凋亡的影響機(jī)制可能參與了TBI后組織病理損害和功能障礙的修復(fù)過程。
【關(guān)鍵詞】：腦外傷 自噬 凋亡 necrostatin-1 程序性壞死
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R363
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-9
• 前言9-14
• 第一部分 Necrostatin-1 對(duì)小鼠 TBI 后腦組織形態(tài)學(xué)及行為學(xué)表現(xiàn)的研究14-25
• 第一節(jié) PI 陽性細(xì)胞的時(shí)程變化14-17
• 材料和方法14-16
• 結(jié)果16-17
• 第二節(jié) 蘇木精染色測(cè)量腦缺損體積(lesion volume, LV)17-20
• 材料與方法17-19
• 結(jié)果19-20
• 第三節(jié) 行為學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)運(yùn)動(dòng)及學(xué)習(xí)記憶功能20-24
• 材料與方法20-22
• 結(jié)果22-24
• 小結(jié)24-25
• 第二部分 Necrostatin-1 對(duì)小鼠 TBI 后自噬及凋亡活性的影響及作用機(jī)制25-36
• 第一節(jié) Necrostatin-1 對(duì)腦外傷后自噬和凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響25-33
• 材料與方法25-29
• 結(jié)果29-33
• 第二節(jié) 聯(lián)合使用自噬及凋亡抑制劑探討不同死亡方式間的相互作用33-35
• 材料與方法33-34
• 結(jié)果34-35
• 小結(jié)35-36
• 討論36-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-47
• 展望47-48
• 綜述48-60
• 參考文獻(xiàn)54-60
• 縮略詞60-61
• 本課題資助項(xiàng)目61-62
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文62-63
• 致謝63-64

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陶陸陽,陳溪萍,卞士中,丁梅,官大威,王繼紅;大鼠不同程度腦挫傷后caspase-3表達(dá)的研究[J];法醫(yī)學(xué)雜志;2004年01期

本文編號(hào)：914170