本文關(guān)鍵詞：人臍帶血造血干細(xì)胞體外分化為NK細(xì)胞的效率及功能檢測(cè)

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【摘要】：目的檢測(cè)人臍帶血造血干細(xì)胞(HSCs)體外分化為自然殺傷(NK)細(xì)胞的效率及功能。方法從人臍帶血中分離CD34+HSCs,接種于含20μg/L FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)、干細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF)、白細(xì)胞介素(IL)-7、IL-15及IL-21的SCGM培養(yǎng)基中,定向誘導(dǎo)CD34+HSCs分化為NK細(xì)胞。觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),在分化的第7、14、21及28天,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各階段CD56、NKG2D、NKp46、CD3、CD19及CD34等細(xì)胞免疫表型的表達(dá)變化;分化的第21、28天,以分化得到細(xì)胞為效應(yīng)細(xì)胞,K562細(xì)胞作為靶細(xì)胞,設(shè)置8∶1、4∶1、2∶1和1∶1 4組效靶細(xì)胞比,分別采用乳酸脫氫酶(LDH)細(xì)胞毒性檢測(cè)法和7AAD/CFSE標(biāo)記法,檢測(cè)分化得到的細(xì)胞殺傷功能。結(jié)果臍帶血來(lái)源的CD34+HSCs在體外適宜的條件下可大量增殖;整個(gè)分化進(jìn)程的不同階段中,CD3和CD19表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,CD56、NKG2D及NKp46的表達(dá)量逐漸增加,最高達(dá)(72.57±1.60)%、(32.83±1.29)%和(29.53±2.40)%,CD34的表達(dá)量逐漸降低,最低為(12.13±2.01)%。LDH毒性檢測(cè)法和7AAD/CFSE標(biāo)記法測(cè)得最大殺傷效率可達(dá)(49.91±2.76)%和(40.87±1.12)%,8∶1、4∶1、2∶1和1∶1組NK細(xì)胞殺傷能力均依次降低(P0.05),誘導(dǎo)分化28 d的NK細(xì)胞殺傷能力與21 d差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論人臍帶血HSCs在體外適宜的培養(yǎng)條件下,可定向分化為NK細(xì)胞,誘導(dǎo)分化得到的NK細(xì)胞具有殺傷功能。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室;天津醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)系;
【關(guān)鍵詞】： 胎血 造血干細(xì)胞 殺傷細(xì)胞 天然 免疫表型分型 細(xì)胞毒性試驗(yàn) 免疫 CD+HSCs 體外分化 細(xì)胞殺傷
【基金】：973國(guó)家重大科學(xué)研究計(jì)劃資助項(xiàng)目(2014CB910104) 國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81171899)
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 臍帶血(UCB)中富含造血干細(xì)胞(HSCs),是除骨髓和外周血之外的第3種HSCs的重要來(lái)源[1]。在適宜的條件下,HSCs可以在體內(nèi)和體外分化為自然殺傷(NK)細(xì)胞[2]。隨著細(xì)胞免疫治療的興起,NK細(xì)胞越來(lái)越為人們所重視。由于人體自身NK細(xì)胞數(shù)量有限,而且在NK細(xì)胞不同發(fā)育階段,甚至同一發(fā)

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 汪漣明,孫酬經(jīng),歐陽(yáng)淹,王紅葉,顧錫榮,錢(qián)美華;低能量激光與集落刺激因子對(duì)人臍帶血造血細(xì)胞的增殖作用[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;1998年04期

2 王曉慧;邱偉;徐祥;黃宏;劉曉萍;;高濃度葡萄糖和亮氨酸聯(lián)合作用對(duì)人臍帶血間質(zhì)干細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2013年11期

3 曹風(fēng)芹;人類(lèi)細(xì)小病毒B19在人臍帶血祖代紅細(xì)胞中的復(fù)制與致細(xì)胞病變[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).預(yù)防.診斷.治療用生物制品分冊(cè);1993年03期

4 汪漣明,孫酬經(jīng),歐陽(yáng)淹,王紅葉,顧錫榮,錢(qián)美華;低能量激光與集落刺激因子對(duì)人臍帶血造血細(xì)胞的增殖作用[J];激光生物學(xué)報(bào);1997年04期

5 帥建華;人臍帶血漿中的IgM類(lèi)自身抗體[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).婦產(chǎn)科學(xué)分冊(cè);1996年04期

6 朱為國(guó),邢獻(xiàn)志,錢(qián)新華,程少杰,黃志光,劉春雁;臍帶血T淋巴細(xì)胞免疫特性研究[J];中國(guó)腫瘤生物治療雜志;1995年03期

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8 ;[J];;年期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 肖洪海;李軍;華澤釗;谷雪蓮;王欣;;人臍帶血造血干細(xì)胞冷凍干燥保存實(shí)驗(yàn)初步研究[A];上海市制冷學(xué)會(huì)二○○三年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2003年

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