本文關鍵詞：重組蛋白PTD-HSP27的制備及其穿細胞膜和角膜組織的功能研究

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【摘要】：目的:制備PTD-HSP27蛋白并研究其能否穿過人晶狀體上皮細胞SRA01/04細胞膜及新西蘭大白兔的角膜組織進入眼前房。方法:利用重疊延伸PCR法獲得重組目的基因片段PTD-HSPB1-6His,構建重組質(zhì)粒p KYB-PTD-HSP27-6His,原核誘導PTD-HSP27蛋白表達及純化重組蛋白后對其進行Western blotting鑒定;用異硫氰酸熒光素(FITC)標記重組蛋白PTD-HSP27并檢測其穿透SRA01/04細胞膜的能力及兔眼角膜組織的能力。結果:成功構建并純化制備目的蛋白PTD-HSP27,在PTD-HSP27孵育后的SRA01/04細胞及結膜囊滴注PTDHSP27兔眼前房內(nèi)均可檢測出重組蛋白PTD-HSP27。結論:通過重疊延伸PCR法及鎳柱層析純化法可以獲得較純的重組蛋白PTD-HSP27;重組蛋白PTD-HSP27能夠穿透SRA01/04細胞膜及穿越兔眼角膜進入房水。
【作者單位】： 暨南大學附屬第一醫(yī)院眼科;暨南大學生物工程研究所;
【關鍵詞】： 蛋白轉(zhuǎn)導域 熱休克蛋白 反式轉(zhuǎn)錄激活因子 晶狀體上皮細胞
【基金】：國家重點基礎研究發(fā)展計劃(973計劃)(No.2011CB707501) 廣東省自然科學基金資助項目(No.S2013010016037)
【分類號】：R363
【正文快照】： 熱休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)的低分子量使其隸屬于小分子熱休克蛋白家族,是由生物體(或離體培養(yǎng)細胞)在不良環(huán)境因素刺激下產(chǎn)生的一組應激蛋白,它在結構上具有高度的保守性,對于細胞的結構維持、更新和修復等方面起到十分重要的保護細胞作用。反式轉(zhuǎn)錄激活因子

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本文編號：902244