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重組蛋白PTD-HSP27的制備及其穿細胞膜和角膜組織的功能研究

發(fā)布時間:2017-09-22 18:00

  本文關(guān)鍵詞:重組蛋白PTD-HSP27的制備及其穿細胞膜和角膜組織的功能研究


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【摘要】:目的:制備PTD-HSP27蛋白并研究其能否穿過人晶狀體上皮細胞SRA01/04細胞膜及新西蘭大白兔的角膜組織進入眼前房。方法:利用重疊延伸PCR法獲得重組目的基因片段PTD-HSPB1-6His,構(gòu)建重組質(zhì)粒p KYB-PTD-HSP27-6His,原核誘導(dǎo)PTD-HSP27蛋白表達及純化重組蛋白后對其進行Western blotting鑒定;用異硫氰酸熒光素(FITC)標記重組蛋白PTD-HSP27并檢測其穿透SRA01/04細胞膜的能力及兔眼角膜組織的能力。結(jié)果:成功構(gòu)建并純化制備目的蛋白PTD-HSP27,在PTD-HSP27孵育后的SRA01/04細胞及結(jié)膜囊滴注PTDHSP27兔眼前房內(nèi)均可檢測出重組蛋白PTD-HSP27。結(jié)論:通過重疊延伸PCR法及鎳柱層析純化法可以獲得較純的重組蛋白PTD-HSP27;重組蛋白PTD-HSP27能夠穿透SRA01/04細胞膜及穿越兔眼角膜進入房水。
【作者單位】: 暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院眼科;暨南大學(xué)生物工程研究所;
【關(guān)鍵詞】蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)域 熱休克蛋白 反式轉(zhuǎn)錄激活因子 晶狀體上皮細胞
【基金】:國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃(973計劃)(No.2011CB707501) 廣東省自然科學(xué)基金資助項目(No.S2013010016037)
【分類號】:R363
【正文快照】: 熱休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)的低分子量使其隸屬于小分子熱休克蛋白家族,是由生物體(或離體培養(yǎng)細胞)在不良環(huán)境因素刺激下產(chǎn)生的一組應(yīng)激蛋白,它在結(jié)構(gòu)上具有高度的保守性,對于細胞的結(jié)構(gòu)維持、更新和修復(fù)等方面起到十分重要的保護細胞作用。反式轉(zhuǎn)錄激活因子

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 閆冀煥;史玲莉;韓偉;崔鷹;趙俊偉;張舒林;;7種結(jié)核分枝桿菌重組蛋白的純化及血清學(xué)特性[J];中國國境衛(wèi)生檢疫雜志;2013年03期

2 肖潔;郭剛;鄒全明;;提高大腸桿菌分泌表達重組蛋白的研究進展[J];微生物學(xué)雜志;2007年02期

3 陳章權(quán);梁曉東;陸田田;黃震;;重組人psoriasin蛋白的制備與鑒定[J];山東醫(yī)藥;2008年48期

4 王新華;胡敬東;孔娜;李宏梅;趙宏坤;;人工分子伴侶輔助雞白細胞介素18重組蛋白的復(fù)性[J];細胞與分子免疫學(xué)雜志;2008年04期

5 余t,

本文編號:902244


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