環(huán)介導恒溫擴增技術快速檢測鼠疫耶爾森菌
本文關鍵詞:環(huán)介導恒溫擴增技術快速檢測鼠疫耶爾森菌
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【摘要】:目的建立簡單、快速環(huán)介導恒溫擴增技術(LAMP)檢測鼠疫耶爾森菌的方法。方法基于鼠疫菌染色體上特異的核酸序列3a設計引物;應用濁度儀和目視法對反應結果進行檢測;通過對鼠疫菌和其他近源菌同時進行檢測評價方法的特異性;通過對不同稀釋濃度的鼠疫菌DNA模板進行LAMP和PCR檢測以確定方法的靈敏度。結果用建立的LAMP法對與鼠疫菌近源30種其他菌株進行擴增,結果均為陰性,該方法具有很高的特異性。LAMP法檢測鼠疫菌DNA的靈敏度可達到20 pg,比常規(guī)PCR法高10倍。檢測反應在25 min以內(nèi)完成。結論該方法具有快速、靈敏、特異、操作簡單的特點,有望發(fā)展成為現(xiàn)場快速檢測鼠疫菌的有效手段。
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學;軍事醫(yī)學科學院微生物流行病研究所病原微生物生物安全國家重點實驗室;
【關鍵詞】: 鼠疫耶爾森菌 環(huán)介導恒溫擴增技術 檢測
【基金】:國家自然科學基金資助項目(31430006,81171529) 國家重點基礎研究發(fā)展計劃課題(2014CB744405)
【分類號】:R378.61
【正文快照】: 鼠疫是由鼠疫耶爾森菌(Yersinia pestis)引起的一種傳染性強、死亡率高的烈性傳染病,同時鼠疫菌又是一種標準的生物戰(zhàn)劑和生物恐怖劑,也是生物戰(zhàn)和生物恐怖最有可能使用的生物劑之一。鼠疫菌是在6000~10 000年前從假結核耶爾森菌(Y.pseudotuberculosis)進化來的[1]。鼠疫在歷
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,本文編號:890221
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