發(fā)布時間：2017-09-19 13:21

  本文關(guān)鍵詞：不育相關(guān)泛素特異性蛋白酶USP26的分子克隆及活性分析

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【摘要】：目的對克隆泛素特異性蛋白酶26(ubiquitin-specific protease 26,usp26)基因進(jìn)行表達(dá)和活性測定。方法采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR),從小鼠全血中擴(kuò)增獲得usp26基因并測定序列。將基因片段與p GEX-6p-1拼接,應(yīng)用異丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG)使蛋白表達(dá)并利用Ub-Met-β-gal鑒定活性。用多重比對方法分析人類、小鼠及褐家鼠usp26基因編碼氨基酸序列的差異。結(jié)果本實(shí)驗(yàn)克隆出usp26基因。構(gòu)建出p GEX-usp26質(zhì)粒,該質(zhì)粒表達(dá)出GST-USP26結(jié)合蛋白并測得其活性。三個種屬含有相同的賴氨酸結(jié)構(gòu)域(Cys box)與組氨酸結(jié)構(gòu)域(His box)特征部位氨基酸。結(jié)論 usp26基因克隆并表達(dá)成功,完成活性測定,為進(jìn)一步探索usp26在男性不育機(jī)制方面的作用提供了一種活性研究方法。
【作者單位】： 河北醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計學(xué)教研室;河北醫(yī)科大學(xué)電子顯微鏡研究中心;
【關(guān)鍵詞】： 泛素化 克隆 分子 不孕 男(雄)性
【基金】：2012年國家級大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練計劃項(xiàng)目(201210089008)
【分類號】：R3411
【正文快照】： (Chin J Dis Control Prev 2015,19(6):547-550)近年來由于生活節(jié)奏加快、環(huán)境污染、食品安全隱患等原因,人類的生殖水平呈下滑趨勢。目前,不育癥和低生育能力正困擾著約10%~15%的夫妻,據(jù)估計其中半數(shù)以上是由于男性不育導(dǎo)致的[1]。2005年Stouffs等[2]首次運(yùn)用流行病學(xué)方法,在

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 曹云霞;高明;;精子發(fā)生障礙的遺傳學(xué)研究進(jìn)展[J];國際生殖健康/計劃生育雜志;2014年03期

2 Gulay Gulec Ceylan;Cavit Ceylan;;Genetics and male infertility[J];World Journal of Clinical Urology;2015年01期

3 李倩倩;李蓮;劉光磊;陸漢希;王振云;黃文佳;王根林;;BMP7和USP26基因單核苷酸多態(tài)性和牛精液品質(zhì)的相關(guān)分析[J];中國獸醫(yī)學(xué)報;2014年05期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張瑋;泛素特異性蛋白酶Usp46和Usp26基因錯義突變對去泛素化酶活性的影響及其流行病學(xué)意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

2 董媛;染色體異常與睪丸生精障礙相關(guān)研究[D];吉林大學(xué);2014年

3 秦玉峰;關(guān)鍵基因遺傳變異、代表性EDCs暴露及其交互作用在精子生成中的作用[D];南京醫(yī)科大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 劉甜;泛素特異性蛋白酶USP26突變型去泛素化酶活性檢測[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

2 葉祿偉;DAZL基因單核苷酸多態(tài)性與弱畸精子癥的相關(guān)性研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

3 李倩倩;牛的個體識別鑒定及BMP7和USP26基因的多態(tài)性與牛精液品質(zhì)的關(guān)聯(lián)分析[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

4 秘迎君;去泛素化酶USP26基因的2個無義突變及6個錯義突變對其酶活性的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年

5 胡惠雯;siRNA干擾USP9X對肝癌細(xì)胞凋亡和生長的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2014年

【相似文獻(xiàn)】

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張瑋;泛素特異性蛋白酶Usp46和Usp26基因錯義突變對去泛素化酶活性的影響及其流行病學(xué)意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 岳立達(dá);泛素特異性蛋白酶USP26分子克隆及活性檢測[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

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本文編號：881883