發(fā)布時(shí)間：2017-09-18 10:18

  本文關(guān)鍵詞：分枝桿菌的質(zhì)譜分型及其對(duì)利奈唑胺耐藥機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： MALDI TOF MS 鑒定 分枝桿菌 利奈唑胺 耐藥性 耐藥機(jī)制

【摘要】：目的：研究基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI TOFMS)在鑒定臨床結(jié)核分枝桿菌和非結(jié)核分枝桿菌中的可行性和準(zhǔn)確性；檢測(cè)利奈唑胺對(duì)多重耐藥結(jié)核分枝桿菌和非結(jié)核分枝桿菌的體外活性并研究膿腫分枝桿菌對(duì)利奈唑胺的耐藥機(jī)制。 方法：收集臨床分離47株菌株,經(jīng)hsp65和rpoB基因測(cè)序確認(rèn),使用MALDI TOF MS鑒定分型；比例法檢測(cè)70株多重耐藥結(jié)核分枝桿菌和24株非結(jié)核分枝桿菌對(duì)利奈唑胺的敏感性；檢測(cè)膿腫分枝桿菌與利奈唑胺耐藥相關(guān)的23s rRNA、rplC、rplD、rplV以及whiB基因突變,以及PCR檢測(cè)質(zhì)粒介導(dǎo)的耐藥基因cfr；觀察外排泵抑制劑利血平存在下利奈唑胺對(duì)膿腫分枝桿菌最低抑菌濃度(MIC)的差異。 結(jié)果：1.47株分枝桿菌包括8株結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群,2株結(jié)核分枝桿菌,30株胞內(nèi)分枝桿菌,2株堪薩斯分枝桿菌,1株膿腫分枝桿菌,4株M. marseillense。 MALDI TOF MS準(zhǔn)確鑒定了除4株Mmarseillense外的其余菌株。本實(shí)驗(yàn)成功建立了M. marseillense的飛行時(shí)間質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)。 2.利奈唑胺對(duì)70株多重耐藥結(jié)核分枝桿菌有很好的抗菌活性。利奈唑胺MIC均=1μg/ml,MIC50為0.5μg/ml,MIC90為1μg/ml。利奈唑胺對(duì)M. marseillense的MIC為4μg/ml,利奈唑胺對(duì)胞內(nèi)分枝桿菌MIC為8-16μg/ml,對(duì)膿腫分枝桿菌MIC為64μg/ml。 3.利奈唑胺耐藥的膿腫分枝桿菌未檢測(cè)到23s rRNA、rplC、rplD、 rplV以及whiB基因突變,未發(fā)現(xiàn)質(zhì)粒介導(dǎo)的cfr基因。在利血平存在下,膿腫分枝桿菌的MIC降低至8μg/ml和16μg/ml,提示有外排泵機(jī)制存在。 結(jié)論：1.MALDI TOF MS可快速準(zhǔn)確鑒定臨床分離分枝桿菌,在臨床常規(guī)鑒定方面有著較好的應(yīng)用前景。 2.首次發(fā)現(xiàn)并對(duì)鳥-胞內(nèi)分枝桿菌復(fù)合群亞種M. marseillense并對(duì)其建立了質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)。 3.利奈唑胺對(duì)多重耐藥結(jié)核分枝桿菌具有良好的體外活性；對(duì)非結(jié)核分枝桿菌的活性存在種間差異。 4.首次發(fā)現(xiàn)膿腫分枝桿菌對(duì)利奈唑胺的耐藥機(jī)制與外排泵表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：MALDI TOF MS 鑒定 分枝桿菌 利奈唑胺 耐藥性 耐藥機(jī)制
【學(xué)位授予單位】：浙江工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R378.91;R446.5
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-10
• 符號(hào)說(shuō)明10-11
• 第一章 ：緒論11-25
• 1.1 基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜在分枝桿菌鑒定中的研究進(jìn)展11-19
• 1.1.1 分枝桿菌流行情況12-13
• 1.1.2 分枝桿菌鑒定方法的研究進(jìn)展13-16
• 1.1.3 基質(zhì)輔助激光解析/電離飛行時(shí)間質(zhì)譜及其在細(xì)菌鑒定上的應(yīng)用16-19
• 1.2 利奈唑胺對(duì)分枝桿菌抗菌活性及耐藥機(jī)制的研究進(jìn)展19-25
• 1.2.1 分枝桿菌的耐藥情況日趨嚴(yán)重19-21
• 1.2.2 利奈唑胺的抗菌活性21-22
• 1.2.3 利奈唑胺耐藥機(jī)制22-25
• 第二章 ：基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜鑒定分枝桿菌的研究25-37
• 2.1 前言25
• 2.2 材料方法25-29
• 2.2.1 材料26-27
• 2.2.2 方法27-29
• 2.3 結(jié)果29-35
• 2.3.1 菌株培養(yǎng)結(jié)果29
• 2.3.2 抗酸染色結(jié)果29-30
• 2.3.3 細(xì)菌小批量基因組DNA提取結(jié)果30
• 2.3.4 hsp65基因擴(kuò)增鑒定結(jié)果30-31
• 2.3.5 rpoB基因確認(rèn)鑒定結(jié)果31
• 2.3.6 質(zhì)譜鑒定結(jié)果31-33
• 2.3.7 數(shù)據(jù)庫(kù)的建立33-35
• 2.4 討論35-36
• 2.5 本章小結(jié)36-37
• 第三章 ：利奈唑胺對(duì)分枝桿菌的抗菌活性及膿腫分枝桿菌對(duì)利奈唑胺耐藥機(jī)制的研究37-46
• 3.1 前言37-38
• 3.2 材料和方法38-41
• 3.2.1 材料38
• 3.2.2 方法38-41
• 3.3 結(jié)果41-43
• 3.3.1 菌株培養(yǎng)結(jié)果41
• 3.3.2 菌株鑒定結(jié)果41
• 3.3.3 結(jié)核分枝桿菌的一線藥敏結(jié)果41
• 3.3.4 利奈唑胺對(duì)多重耐藥結(jié)核分枝桿菌抑菌活性41-42
• 3.3.5 利奈唑胺對(duì)非結(jié)核分枝桿菌抑菌活性42-43
• 3.3.6 膿腫分枝桿菌耐藥基因比對(duì)結(jié)果43
• 3.3.7 外排泵抑制試驗(yàn)結(jié)果43
• 3.4 討論43-45
• 3.5 本章小結(jié)45-46
• 第四章 結(jié)論與展望46-48
• 4.1 結(jié)論46
• 4.2 展望46-48
• 參考文獻(xiàn)48-59
• 致謝59-60
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄60

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

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本文編號(hào)：874933