本文關(guān)鍵詞：卡波氏肉瘤相關(guān)皰疹病毒ORF65抗體的制備及其特異性檢測(cè)

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【摘要】：目的制備高效價(jià)卡波氏肉瘤相關(guān)皰疹病毒(KSHV)病毒ORF65衣殼蛋白抗體并檢測(cè)其特異性。方法將人工合成的ORF65蛋白抗原肽經(jīng)弗氏佐劑乳化,在家兔背部、頜下等皮下多點(diǎn)免疫注射,間隔2周免疫,共4次。末次免疫后1周取兔血清,ELISA法檢測(cè)兔免疫血清抗體IgG抗體水平。進(jìn)一步采用免疫熒光、Western blot檢測(cè)制備的抗血清中與ORF65結(jié)合的特異性。結(jié)果家兔在全程免疫后產(chǎn)生了高效價(jià)的特異性抗體,最高滴度達(dá)1∶12 800。免疫熒光檢測(cè)顯示,與未經(jīng)佛波酯(TPA)刺激的BCBL-1細(xì)胞相比,兔抗血清主要結(jié)合于BCBL-1細(xì)胞胞質(zhì),與ORF65蛋白在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)位置一致。Western blot結(jié)果顯示在21kD處有特異性蛋白條帶,其大小與預(yù)期的ORF65蛋白大小相符,同時(shí)經(jīng)TPA刺激的BCBL-1細(xì)胞中ORF65蛋白表達(dá)量高于對(duì)照組,與ORF65蛋白裂解期蛋白的特性相符。結(jié)論用ORF65衣殼蛋白抗原肽段免疫家兔,可成功制備高效價(jià)的特異性抗血清,該抗體可與KSHV病毒ORF65蛋白特異性結(jié)合。
【作者單位】： 右江民族醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)與免疫學(xué)教研室;右江民族醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 卡波氏肉瘤相關(guān)皰疹病毒 ORF 抗體 免疫性
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81071345,81160535) 廣西壯族自治區(qū)教育廳桂教科研基金資助項(xiàng)目(201204LX324,2013YB183) 廣西自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2014GXNSFAA118136)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 卡波氏肉瘤相關(guān)皰疹病毒(Kaposi′s sarcoma associatedherpesvirus,KSHV)由Chang等[1]在1994年首先從AIDS相關(guān)型Kaposi′s肉瘤(Kaposi′s sarcoma,KS)患者的肉瘤組織發(fā)現(xiàn),又稱人類8型皰疹病毒(human herpesvirus-8,HHV-8)。KSHV與原發(fā)性彌漫性淋巴瘤(primary effusion lympho

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本文編號(hào)：850933