本文關(guān)鍵詞：小鼠CLP膿毒癥模型的建立及抗菌肽Lycosin-1對其肝腎功能的影響

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【摘要】：目的 膿毒癥(sepsis)是由細(xì)菌、真菌、病毒等各種感染因素導(dǎo)致的全身炎癥反應(yīng)綜合征,病情加重可發(fā)展為多器官功能衰竭及膿毒癥休克。炎癥反應(yīng)過度激活及免疫調(diào)節(jié)紊亂在膿毒癥發(fā)生發(fā)展中起重要作用。盲腸結(jié)扎穿孔(Cecal ligation and puncture, CLP)法可引起腹腔混合細(xì)菌感染,誘發(fā)急性腹膜炎導(dǎo)致膿毒癥。利用CLP法制作的膿毒癥模型被廣泛用于膿毒癥病理生理機(jī)制及藥物治療等研究�？咕腖ycosin-1(Lyc)是從狼蛛singorensis中提取的陽離子抗菌肽,具有廣譜抗菌作用。近年來,許多研究發(fā)現(xiàn)抗菌肽對CLP膿毒癥模型有抗菌作用,但抗菌肽在抗菌的同時是否對機(jī)體的肝腎功能產(chǎn)生不良影響,目前相關(guān)研究報道較少。本研究旨在通過動物實(shí)驗(yàn)研究探討抗菌肽Lycosin-1對正常Balb/c小鼠及膿毒癥模型小鼠的肝腎功能影響。 方法 本研究分三部分：首先采用盲腸結(jié)扎穿孔(Cecal ligation and puncture,CLP)法制作小鼠膿毒癥模型,改變盲腸結(jié)扎長度、穿刺針大小及穿孔次數(shù),以獲得中重度膿毒癥動物模型,即72h小鼠死亡率達(dá)70-100%。第二部分為腹腔注射不同濃度Lyc對正常小鼠肝腎急性毒性(6h、12h、24h)的研究,分為5個濃度亞組,即25ug/ml、50ug/ml、100ug/ml、200ug/ml、500ug/ml組,各組每個時間點(diǎn)5只。觀察24h內(nèi)各組小鼠死亡情況及一般活動狀況,并在相應(yīng)時間點(diǎn)取血,檢測血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)等生化指標(biāo)的變化。第三部分為探討腹腔注射Lyc(200ug/ml)對CLP膿毒癥模型小鼠的肝臟和腎臟是否有保護(hù)作用,分為Lyc干預(yù)6h組、12h組、24h組,各組再分為4個小組：①Sham組(假手術(shù)組)：打開小鼠腹腔找到盲腸,不結(jié)扎及穿孔,關(guān)閉腹腔后腹腔注射0.5ml生理鹽水；②Sham+Lyc:不結(jié)扎及穿孔盲腸,關(guān)閉腹腔時注射Lyc (200ug/ml)0.5ml:③CLP組：見實(shí)驗(yàn)一中C組CLP模型制備方法,即在距盲腸末端1cm處結(jié)扎,并用12號針頭貫穿盲腸穿孔2次。腹腔注射0.5m1生理鹽水液體復(fù)蘇；④CLP+Lyc見實(shí)驗(yàn)一中的C組CLP模型制備方法,術(shù)后立即腹腔注射Lyc(200ug/ml)0.5ml,每小組各10只小鼠。同樣檢測各組小鼠血清肝腎代謝指標(biāo)的變化。 結(jié)果 1.采用距盲腸末端1cm處結(jié)扎,12號針頭貫穿盲腸穿孔2次的方法制備的CLP模型小鼠72h死亡率達(dá)70-100%,且具有典型膿毒癥表現(xiàn),死亡小鼠解剖證實(shí)腹腔存在惡臭積液、部分腸管粘連。 2.不同濃度Lycosin-1腹腔注射24h內(nèi)均無小鼠死亡,與對照組比較,雖然給藥組的一些指標(biāo)稍偏高或偏低,但差異無顯著性(P0.05),且無劑量依賴性； 3.與假手術(shù)組比較,CLP膿毒癥小鼠血清ALT、AST、BUN、SCr4個指標(biāo)在術(shù)后6h、12h、24h三個時間點(diǎn)均升高,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；Lyc干預(yù)組各時間點(diǎn)血清ALT、AST、BUN、SCr濃度與CLP組比較并沒有降低,反而升高更顯著,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論 1.采用盲腸結(jié)扎穿孔法成功制作了中重度膿毒癥模型。 2.腹腔注射Lyc對正常小鼠的肝腎功能無急性毒副作用,但對膿毒癥所致的小鼠肝腎損傷無保護(hù)作用,甚至可能存在毒副作用。
【關(guān)鍵詞】：盲腸結(jié)扎穿孔法 膿毒癥 抗菌肽 Lycosin-1 肝腎功能
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R459.7;R-332
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-10
• 目錄10-11
• 縮略詞表11-12
• 第一章 前言12-14
• 第二章 小鼠CLP膿毒癥模型的建立及抗菌肽LYCOSIN-1對其肝腎功能的影響14-24
• 第一部分 建立小鼠CLP膿毒癥模型14-16
• 1 材料14
• 2 實(shí)驗(yàn)方法14-15
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果15-16
• 第二部分 抗菌肽Lycosin-1對正常Balb/c小鼠的肝腎功能影響16-19
• 1 材料16-17
• 2 實(shí)驗(yàn)步驟17
• 3 結(jié)果17-19
• 第三部分 抗菌肽Lycosin-1對CLP膿毒癥模型小鼠的肝腎功能影響19-24
• 1 材料19
• 2 實(shí)驗(yàn)步驟19-20
• 3 結(jié)果20-24
• 第三章 討論24-28
• 1 CLP膿毒癥模型的建立24
• 2 抗菌肽Lycosin-1對CLP模型小鼠肝腎功能影響24-28
• 第四章 結(jié)論28-29
• 參考文獻(xiàn)29-32
• 綜述32-48
• 參考文獻(xiàn)41-48
• 致謝48

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張尉;侯麗;于和鳴;;殺精抗菌雙功能抗菌肽的研究進(jìn)展[J];國際生殖健康/計(jì)劃生育雜志;2013年04期

2 代春迎;譚竹鈞;黎子蔚;;誘導(dǎo)前后地鱉血淋巴抗菌活性的研究[J];廣東工業(yè)大學(xué)學(xué)報;2014年01期

3 盧俊鑫;楊金波;鄺哲師;趙祥杰;葉明強(qiáng);潘木水;;豬源性PR39抗菌肽對斷奶仔豬生產(chǎn)性能、血清免疫指標(biāo)和腸道菌群的影響[J];動物營養(yǎng)學(xué)報;2014年06期

4 繆承杜;趙培靜;夏楓耿;;一株產(chǎn)抗菌肽芽孢桿菌的鑒定及發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化[J];輕工科技;2014年07期

5 蘇愷;王凱;孫力軍;劉喚明;劉艷芬;;抗菌肽對斷奶仔豬生產(chǎn)性能和健康水平的影響[J];河南農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年09期

6 武如娟;張日俊;;雜合抗菌肽設(shè)計(jì)及生物學(xué)活性的研究進(jìn)展[J];中國生物工程雜志;2013年09期

7 夏麗潔;張富春;;抗菌肽的研究概述及前景展望[J];生物技術(shù);2013年04期

8 趙學(xué)良;史振霞;;抗菌肽的制備方法及作用機(jī)理研究進(jìn)展[J];食品研究與開發(fā);2014年01期

9 陳玉海;陳慶煌;陳科;章亭洲;陳吉龍;;抗菌肽magainin Ⅱ的密碼子優(yōu)化及在大腸桿菌和畢赤酵母中的表達(dá)[J];生物工程學(xué)報;2014年04期

10 李翠瑩;;抗菌肽的治療應(yīng)用綜述[J];生物技術(shù)世界;2013年11期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 ;A derivative peptide comprising thanatin and protegrin-1 prevents methicillin-resistant Staphylococcus epidermidis sepsis by disturbing bacterial cell division[A];2012年中國藥學(xué)大會暨第十二屆中國藥師周論文集[C];2012年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 嚴(yán)秀文;牛虻唾液腺免疫抑制肽Immunoregulin HA及大熊貓抗菌肽PC的結(jié)構(gòu)與功能研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

2 李秋玲;重組人乳鐵蛋白奶粉對仔豬免疫應(yīng)答和骨形成的影響[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 傅立東;中國明對蝦C-型凝集素的重組表達(dá)和功能分析以及對蝦素與防御素融合抗菌肽表達(dá)載體構(gòu)建、重組表達(dá)和性質(zhì)分析[D];山東大學(xué);2008年

2 王學(xué)琴;噬菌體內(nèi)溶素基因分離、鑒定及功能研究[D];內(nèi)蒙古工業(yè)大學(xué);2010年

3 岳海泉;DEFB-1基因多態(tài)性與甘肅裕固族人群齲病易感性的關(guān)聯(lián)性研究[D];蘭州大學(xué);2013年

4 羅艷超;納米顆粒對腫瘤免疫逃逸影響的研究[D];河北科技大學(xué);2013年

5 郭曉敏;桃、李果實(shí)采后病害發(fā)生特點(diǎn)及其控制措施研究[D];北京工商大學(xué);2011年

6 岳陽;蠶蛹抗菌肽的理化性質(zhì)及其應(yīng)用研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

7 廖學(xué)文;雜合抗菌肽LFM-3的分子設(shè)計(jì)及其在畢赤酵母中的表達(dá)[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

8 陳聰偉;花狹口蛙海南亞種（Kaloula pulchra hainana）皮膚分泌物活性研究及溶血素分離[D];海南大學(xué);2012年

9 楊柳娜;桔梗皂苷D殺精機(jī)制及初步成藥性研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

10 吳婷婷;短小芽孢桿菌產(chǎn)孢培養(yǎng)技術(shù)的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

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本文編號：848065